夹心ELISA法快速检测肝病患者血清中金属蛋白酶组织抑制剂1
细胞与分子免疫学杂志
目的: 建立一种快速检测肝病患者血清基质金属蛋白酶组织抑制剂1 (TIMP1)的双抗体夹心ELISA, 了解血清TIMP1的水平与肝纤维化病程进展程度的关系. 方法: 以不同浓度的抗人TIMP1单克隆抗体(mAb)为包被抗体, 加入待测抗原以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP1 mAb作为标记抗体进行方阵滴定, 建立双抗体夹心ELISA, 并用于临床检测408例肝病患者血清TIMP1的水平. 结果: 方阵滴定的结果表明包被抗体浓度为1 mg/L, 血清稀释倍数1∶100,HRP标记mAb的最佳工作浓度为1∶400. 以此条件建立的夹心ELISA法具有良好的可重复性, 中和抑制率在85%以上,稳定性良好, 与国外检测TIMP1的ELISA试剂盒进行对比试验, 具有良好的相关性(r=0.988). 用于临床快速检测肝硬化的检出阳性率为76.4%, 明显高于慢性肝炎(40.2%)和急性肝炎(19.5%, P<0.005), 并随着患者肝纤维化程度的加重而升高(P<0.001). 结论: 血清TIMP1水平的变化可作为诊断肝纤维化良好指标. 本法简便、快速, 敏感性高、特异性强, 用于肝纤维化的人血清学快速诊断. 尤其适于医院及基层医疗单位应用., 百拇医药(邵彬, 聂青和, 王平忠, 李光玉, 张亚飞, 苟)
目的: 建立一种快速检测肝病患者血清基质金属蛋白酶组织抑制剂1 (TIMP1)的双抗体夹心ELISA, 了解血清TIMP1的水平与肝纤维化病程进展程度的关系. 方法: 以不同浓度的抗人TIMP1单克隆抗体(mAb)为包被抗体, 加入待测抗原以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP1 mAb作为标记抗体进行方阵滴定, 建立双抗体夹心ELISA, 并用于临床检测408例肝病患者血清TIMP1的水平. 结果: 方阵滴定的结果表明包被抗体浓度为1 mg/L, 血清稀释倍数1∶100,HRP标记mAb的最佳工作浓度为1∶400. 以此条件建立的夹心ELISA法具有良好的可重复性, 中和抑制率在85%以上,稳定性良好, 与国外检测TIMP1的ELISA试剂盒进行对比试验, 具有良好的相关性(r=0.988). 用于临床快速检测肝硬化的检出阳性率为76.4%, 明显高于慢性肝炎(40.2%)和急性肝炎(19.5%, P<0.005), 并随着患者肝纤维化程度的加重而升高(P<0.001). 结论: 血清TIMP1水平的变化可作为诊断肝纤维化良好指标. 本法简便、快速, 敏感性高、特异性强, 用于肝纤维化的人血清学快速诊断. 尤其适于医院及基层医疗单位应用., 百拇医药(邵彬, 聂青和, 王平忠, 李光玉, 张亚飞, 苟)