RAPD技术在中药材鉴定中的应用
中药材,,RAPD技术；中药材；鉴定,1RAPD在中药材鉴定中的作用,2RAPD在中药材鉴定方面要注意的问题[18、19],3RAPD在中药材鉴定方面的优点及展
摘 要 RAPD技术是一种DNA分子标记技术，自90年代问世以来，人们即把它试用于中药材的鉴定，并在该领域取得可喜的研究进展。本文就RAPD技术的基本原理以及它应当用于中药格鉴定的优缺点、注意事项、目前国内外研究动态、可能发展前景等方面作了较详细的阐述。关键词 RAPD技术；中药材；鉴定
在读硕士研究生 RAPD即随机扩增的多态性DNA(Random amplified polymorphic DNA),是美国的Williams与Welsh两个研究小组于1990年同时提出的一种DNA分子标记技术。Williams等[1]称之为RAPD，Welsh等[2]称之为ApPCR(Arbitarily primed PCR)。RAPD技术建立在PCR(polymerase chain reaction)技术基础上，它是以任意顺序列的寡核苷酸单链(通常为10个碱基，ApPCR则为20～30个碱基。)为引物，对所研究的基因组DNA进行随机扩增。RAPD所用的一系列引物的DNA序列各不相同，但对于任一引物，它同基因组DNA序列有特定的结合位点。这些特定的结合位点在基因组某些区域内的分布如符合PCR扩增的反应条件，即在一定范围内模板DNA上有与引物互补的反相重复序列时，就可扩增出此范围的DNA片段。在不同物种基因组DNA中，这种反相重复序列的数目和间隔的长短不同，就可导致这些特定的结合位点分布发生相应的变化，而使PCR扩增产物增加、减少或发生分子量的变化。通过对PCR产物的检测(扩增产物以琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色，紫外灯下测视，拍照。)和比较，即可识别这些物种基因组DNA的扩增多态性片段。Williams[1]等已用实验证明这种短的随机引物可用于扩增从低等到高等各种生物的基因组DNA，并已证明这种多态性是按孟德尔方式遗传的，因而可以用此作遗传标记，研究物种的亲缘关系。
RAPD技术问世以来，在应用于中药材鉴定方面，人们开展了大量的研究工作，并在植物药材和部分动物药材的鉴定方面取得了很大的成绩。
1 RAPD在中药材鉴定中的作用
1.1 植物药材相近种类的鉴定 邵鹏柱等[3]在1994年首次报道了对中药材人参与西洋参采用ApPCR标记进行鉴别，他们采用20个碱基的Galk,Seq2,24个碱基的MB forward,MB reverse和27个碱基的OTCS backward作引物成功地利用APPCR指纹图谱技术鉴定出人参和西洋参。1995年分离人参属三种植物人参、西洋参、三七(P.notoginseng)和四种伪品包括桔梗、紫茉莉、栌兰、商陆的基因组DNA ......
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