摘要 发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应(PCR)
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摘要 用青岛曹家汶河口沉积物中分离出的细菌L10(希瓦氏菌属)进行了水体中甲基对硫磷的细菌降解研究。研究表明，该菌对甲基对硫磷具有显著的降解性。采用高效液相色谱/飞行时间质谱(HPLCTOFMS)联用技术对甲基对硫磷及其细菌降解产物进行了分析。样品经SPEC18小柱富集分离后,进行液相色谱和在线电喷雾飞行时间质谱分析。采用C18反相色谱柱(15 cm×4.6 mm i.d. 5 μm), 线性梯度为：0 min 乙腈/水(30/70)，5 min 乙腈/水(30/70)，20 min 乙腈/水(80/20)，25 min 乙腈/水(80/20)；流速0.8 ml/min，甲酸铵缓冲溶液浓度为0.1% (V/V)；电喷雾正离子(ESI)模式，m/z扫描范围50～1000进行TOFMS扫描、测定，测定结果用Analyst QS软件进行分析。结果表明，与甲基对硫磷光降解产生甲基对氧磷和对硝基酚不同，在降解菌L10的存在下，甲基对硫磷发生了取代、氧化、还原等一系列反应，产生了相应的降解产物。降解过程的机理很复杂，从甲基对硫磷及其降解产物的分子结构式来分析，推断可能与细菌本身的代谢有关。关键词 甲基对硫磷，细菌，降解，高效液相色谱飞行时间质谱
1 引言
甲基对硫磷(O,O二甲基O对硝基苯基硫代磷酸酯)是剧毒有机磷农药，具有高效杀虫、杀螨作用，长期以来被广泛应用，是我国环境污染物黑名单中所列主要有机污染物之一。甲基对硫磷主要由硝基苯基和二甲氧硫代磷酸基两部分构成(图1)。
图1 甲基对硫磷分子结构式(略)
Fig.1 Molecular structure of the pesticide methyl parathion
a. 二甲氧硫代磷酸基 (dimethoxythiophosphoryl)； b. 硝基苯基(nitrophenyl)。
有机磷农药具有较高的毒性，在环境中有一定残留水平，在生物体内易形成具有生物活性的轭合残留和结合残留，对人体健康或生态环境构成潜在威胁。在其生产和使用过程中，大量残留物会以多种方式转移进入水体。在水体中，有机磷的降解可以通过几个途径同时发生，如水解、光催化氧化降解、微生物降解等降解过程。研究证实，微生物降解是其彻底矿化降解的主要方式[1~3]。
农药的微生物降解及代谢研究已有不少报道。人们已分离选育出可降解甲基对硫磷的高效菌株主要包括邻单胞菌属(Plesiomonas sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、黄杆菌属(Flavobacterium sp.)等[4] ......
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