丹参酮ⅡA在碳糊电极上的伏安行为及其测定
摘要 研究了丹参酮ⅡA(TS)在碳糊电极(CPE)上的伏安行为,结果表明：在0.2 mol/L BR(pH 2.4)的乙醇/水(40∶60， V/V)中，TS的羰基发生单电子、单质子的氧化还原反应，该反应是一个有吸附特征的可逆过程；还原产物半醌自由基能稳定存在，这可能是由于CPE中疏水有机相阻止了该自由基的岐化反应。还原峰和氧化峰的峰电位分别为-0.31和-0.24 V (vs,SCE)，二阶导数氧化峰峰电流与TS浓度在1.2×10-8 ~82×10-7mol/L范围内呈线性关系；检出限为4.1×10-9mol/L。本方法可用于复方丹参片中丹参酮总含量的测定。
关键词 丹参酮ⅡA，半醌自由基，碳糊电极
1 引言
丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA ,TS)和隐丹参酮是丹参(salvia miltiorrhiza bunge)的有效成分，属二萜醌类化合物, 有扩张冠状动脉,增加心肌血流量等多种药理活性。现已报道的TS测定方法主要有高效液相色谱法[1～4] 、固相萃取高效液相色谱法[5]、液相色谱电喷雾质谱法[6]、薄层色谱法[7] 和超临界流体萃取毛细管气相色谱法[8]等。吴晓苹等[9]研究了隐丹参酮在玻碳电极上的电化学行为，结果表明，隐丹参酮发生的是两电子、两质子的准可逆电化学反应。碳糊电极具有电位范围宽，制备方便，价格低廉等特点，在伏安法中得到了广泛应用[10]。由于碳糊电极中有机相的存在，有机分析物可能在该电极上富集并表现出不同的电化学行为。本实验研究了TS在碳糊电极上的电化学行为。在选定的最佳条件下，TS产生一对可逆的氧化还原峰，可用于分析目的。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
JP303型极谱分析仪(成都仪器厂)；CHI660型电化学工作站(CHI仪器公司，美国)，CHI660软件包在Windows2000环境下控制工作站运行；自制碳糊电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝为对电极。
3.4×10-3 mol/L TS标准储备液：准确称取TS对照品(中国药品生物制品检定所)0.1000 g, 用95%乙醇溶解并定容至100 mL棕色容量瓶中，冰箱4℃保存；其它标准工作溶液由该储备液用95%乙醇和水稀释而成(乙醇和水体积比为40∶60)；复方丹参片(市售)；1.0 mol/L BR缓冲液按常规方法配制；碳粉(化学纯，北京化学试剂公司)；硅油(色谱纯，成都市科龙化工试剂厂)；其余所用试剂均为分析纯，实验用水均为二次蒸馏水。所有实验均在室温下操作。
2.2 碳糊电极的制备与活化
将碳粉和硅油(5∶2， w/w)在研钵中混合均匀后，装入塑料管(3 mm i.d.)中，压紧，用铜导线引出，将电极表面在称量纸上磨平抛光[11]。将碳糊电极在0.2 mol/L BR(pH 2.4)乙醇/水(40∶60，V/V)底液中在0.0～1.0和0.0～-1.0 V范围内分别以0.1 V/s扫速多次循环扫描至基线稳定。然后在1.1 V预氧化2 min，在-1.0 V预还原2 min。需要更新电极表面时,将碳糊挤出2～3 mm,抛光活化后即可使用。
2.3 实验方法
移取适量TS标准工作溶液于10 mL容量瓶中,加入 2 mL 1.0 mol/L BR (pH 2.4) 缓冲液，补充95%乙醇使其最终含量为40%(V/V),用水稀释至刻度，摇匀,转入伏安池中，在CHI660型电化学工作站上，以02 V/s在0.0~-0.60 V范围内循环扫描，记录循环伏安曲线；在JP303型极谱分析仪上，以02V/s在-0.40~0.0 V范围内作阳极化线性扫描，记录-0.24 V处的二阶导数氧化峰峰电流。用TS氧化峰二阶导数峰峰电流i″p对TS浓度作图得校准曲线。每次测量完毕，将CPE 置于0.1 mol/L HCL溶液中，在1.0~0.0 V范围内阴极化线性扫描至该电极在底液中基线稳定，再用清水冲洗，以除去电极表面的分析物残留并活化电极。
2.4 试样制备及分析手续
称取10粒复方丹参片，研细，求得每片平均质量为0.3013 g。准确称取质量相当于一粒复方丹参片的粉末样，加95%乙醇溶解并定容至50 mL棕色容量瓶中，备用。溶液放置12 h至澄清后，取清液按上述方法进行测定，用标准曲线法求出复方丹参片中丹参酮总含量。
3 结果与讨论
3.1 丹参酮ⅡA电化学行为
图1为丹参酮ⅡA在0.2 mol/L BR(pH 2.4)乙醇/水(40∶60， V/V)底液中的循环伏安曲线。于0.0~-0.60 V范围内作阴极化线性电位扫描，在-0.306 V出现一阴极峰。反扫时,在-0.238 V出现一阳极峰。阳极峰与阴极峰两峰电位差ΔEp＝68 mV, 阳极峰与阴极峰两峰电流比ipa /ipc＝1.2。当扫速v由0.1 V/s增加至0.5 V/s时，氧化峰、还原峰峰电流均与扫速v的一次方成正比(图2)；同时，氧化峰峰电位正移，还原峰峰电位负移，峰电位均与lg v成正比(图3)。说明TS电极反应是有吸附特征的可逆过程。
图1 循环伏安图(略)
Fig.1 Cyclic voltammogram of BR buffer (a) and tanshinone (TS) (b)
a. 0.2 mol/L BR (pH 2.4)ethanol/water (40∶60， V/V) medium; b. a+ 4.8×10-6 mol/L TS . The initial potential 0.0 V, the potential of reverse -0.6 V, scan rate v: 0.2 V/s.
图2 还原峰(1)和氧化峰(2)峰电流与扫速的关系(略)
Fig.2 The relationship of reduction (1) and oxidation (2) peak current with scan rate in 6.8×10-6 mol/L TS+BR (pH 2.4) ethanol/water (40∶60， V/V) medium
图3 还原峰 (1)和氧化峰(2)峰电位与lg v的关系(略)
Fig.3 The relationship of reduction (1) and oxidation (2) peak potential with logarithm of scan rate
其它条件同图2(the conditions as in Fig.2)。
由实验纪录的方波伏安曲线上测得TS氧化峰半峰宽84 mV，还原峰半峰宽108 mV，依据可逆体系理论半峰宽ω1/2 =90.4/n,求得氧化峰电子转移数n＝0.93，还原峰电子转移数n＝1.2。由上述单扫描伏安法可知，阳极峰与阴极峰两峰电位差ΔEp＝68 mV, 求得n＝0.87。另外，在pH值2.09~5.02 范围内，TS氧化峰电位Ep与pH的关系为-Ep/V=0.12+0.049 pH (r=0.9962, n=7)。由此推知TS电极反应是单电子、单质子过程。
TS(见图1)为9,10菲醌的衍生物，邻位羰基是其主要活性基团[12]，它应有与母体9,10菲醌相似的电化学性质。研究表明，9,10菲醌分子中邻位羰基经两电子、两质子加成反应生成菲氢醌，中间产物为半醌自由基[13～15]。脉冲辐解技术在水溶液中研究9,10菲醌还原性质的结果还表明，9,10菲醌经单电子还原生成半醌自由基,该半醌自由基能发生岐化反应[15]。在水溶液中，隐丹参酮在玻碳电极上发生两电子、两质子参与的准可逆反应，只观察到一个还原峰[9]，这可能是由于水及质子的存在加速了半醌自由基的岐化反应[15]。在本实验条件下，TS通过单电子、单质子反应生成半醌自由基,由于CPE中有机物硅油的存在，有机相使反应生成的半醌自由基能够稳定存在，这与有机介质中9,10菲醌的电化学行为相似[14]。
图4 pH值对峰电流的影响(略)
Fig.4 Effect of pH values on peak current in 68×10-6 mol/L TSethanol/water (40∶60， V/V) medium
v＝0.2 V/s.
3.2 实验条件的优化
碳糊电极有较大的背景电流,而导数技术能有效地抑制背景电流并具有较好的分辨率，同时，氧化峰比还原峰灵敏，峰形好。因此，实验选用二阶导数技术记录TS氧化峰峰电流，并以此进行定量测定。
TS在BR缓冲液中出现的一对氧化还原峰峰形最好，灵敏度最高。当BR缓冲液pH值在2.1~2.6范围内，峰电流最大，且基本保持稳定不变；当pH值在2.6~5.0范围内，峰电流随pH值的增加而减小(图4)。本实验选用pH 2.4±0.1 BR缓冲液作支持电解质。
TS不溶于水易溶于乙醇，实验用乙醇作溶剂。乙醇含量(V/V)对TS氧化峰峰电流影响的实验结果表明(图5)，当乙醇含量小于35%时，峰电流随乙醇含量的增加而增大； 当乙醇含量在35%~45%范围内，峰电流达到最大值并基本保持不变；当乙醇含量大于45%时，峰电流开始降低。实验控制乙醇在支持电解质中含量为40%。
图5 乙醇含量(V)对氧化峰峰电流的影响(略)
Fig.5 Effect of ethanol content (V) on oxidation peak current
v＝0.2 V/s, 其它条件同图2(other conditions as in Fig. 2)。
随着扫速的增加,峰电流增大，峰形变差。为兼顾峰形和分析灵敏度，本实验选用扫速0.2 V/s。
3.3 线性范围和检出限
在选定的实验条件下，TS二阶导数氧化峰峰电流i″p与其浓度在1.2×10-8~8.2×10-7mol/L范围内呈线性关系，线性回归方程为：i″p (nAs-2)＝3.12+0.28C (nmol/L) (r=0.9936, n=7)，检出限(3 σ/s)为4.1×10-9 mol/L。
为验证该方法的重复性，选取标准曲线范围内不同浓度TS溶液：2.0×10-8、4.0×10-8、6.0×10-8、1.2×10-7、3.0×10-7 mol/L，并在一周内进行4次测量，标准曲线斜率分别为：0.289、0.268、0.276、0.285 nAs-2 L·nmol-1 ，截距为3.14、3.21、3.09、3.04，这些斜率和截距的相对标准偏差(RSD)分别为3.3%和23%。用同一支CPE对浓度分别为6.0×10-8和84×10-7mol/L TS溶液进行6次平行测定,其RSD分别为2.7%和3.4%。用6只相同表面积的CPE对浓度为7.2×10-8 mol/L TS溶液进行测定，其RSD为35%。以上参数说明本方法有较好的重复性。
3.4 样品分析和回收率的测定
由于复方丹参片中含有TS、丹参酮 A、隐丹参酮等丹参酮类物质，在实验条件下这些物质具有相似的伏安特征。因此，本方法测得的是样品中丹参酮的总含量。对同一份样品溶液进行5次平行测定，求得每片复方丹参片中丹参酮的总含量分别为0068、0.066、0.066、0.067、0.065%；相对标准偏差为3.7%。在相同浓度的样品溶液中加入不同浓度标准溶液做回收率实验，结果如表1所示。
表1 回收率实验结果(略)
Table 1 Results of recovery test
a. 平均测得值±标准偏差(average found ±standard deviation); b. 平均回收率±相对标准偏差(average reocvery±retative standard deviation)。
References
1 Shi Z H, He J T, Yao T T, Chang W B, Zhao M P. J. Pharm. Biomed. Anal., 2005, 37 (3): 481～486
2 Chen H, Yuan J P, Chen F, Zhang Y L, Song J Y. J. Biotechnol., 1997, 58 (3): 147～156
3 Pan X J, Niu G G, Liu H Z. J. Chromatogr. A, 2001, 922 (12): 371～375
4 Xue M, Cui Y, Wang H Q, Hu Z Y, Zhang B. J. Pharm. Biomed. Anal., 1999, 21 (1): 207～213
5 Chen Lei(陈 雷), Zhu Jihong(朱霁虹), Li Yongqing(李永庆). Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis(药物分析杂志), 2004, 24 (2): 137～139
6 Li J, Wang G J, Li P, Hao H P. J. Chromatogr. B, 2005, 826 (12): 26～30
7 Yuan Jiacai(袁加才). Nanjing University of Traditional Chinese Medicine(南京中医药大学学报), 2005, 21(1): 42
8 Chen Bin(陈 斌), Zhu Mei(朱 梅), Xing Wangxing(邢旺兴), Liu Lili(刘荔荔), Wu Yutian (吴玉田). Acta Pharmaceutica Sinica (药学学报), 2001, 36 (1): 55～57
9 Wu Xiaoping(吴晓苹), Liu Wei(刘 薇), Duan Jianping(段建平), Chen Hongqing(陈红青), Chen Guonan(陈国南). The 9th National Conference on Electroanalytical Chemistry (第九届全国电分析化学学术会议), 2005： 153～154
10 Kalcher K, Kauffmann J M, Wang J, Svancara I, Vytras K, Neuhold C, Yang Z. Electroanalysis, 1995, 7 (1): 5～22
11 Ravichandran K, Baldwin R P. Anal. Chem., 1984, 56 (9): 1744～1747
12 Bu X Z, Huang Z S, Zhang M, Ma L, Xiao G W, Gu L Q. Tetrahedron Letters, 2001, 42 (33): 5737～5740
13 Phani K L N, Narayan R. J. Electroanal. Chem., 1985, 187 (1): 187～195
14 Hossain M S, Tryk D, Yeager E. Electrochim. Acta, 1989, 34 (12): 1733～1737
15 Bao Huaying(包华影), Navaratnam S, Parsons B J, Phillips G Q. Journal of Radiation Research and Radiation Processing (辐射研究与辐射工艺学报), 1997, 15 (1): 10～14
本文系国家自然科学基金资助项目(No.20475043)
(西北大学分析科学研究所,西安 710069), 百拇医药(田新娟 宋俊峰*)
关键词 丹参酮ⅡA，半醌自由基，碳糊电极
1 引言
丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA ,TS)和隐丹参酮是丹参(salvia miltiorrhiza bunge)的有效成分，属二萜醌类化合物, 有扩张冠状动脉,增加心肌血流量等多种药理活性。现已报道的TS测定方法主要有高效液相色谱法[1～4] 、固相萃取高效液相色谱法[5]、液相色谱电喷雾质谱法[6]、薄层色谱法[7] 和超临界流体萃取毛细管气相色谱法[8]等。吴晓苹等[9]研究了隐丹参酮在玻碳电极上的电化学行为，结果表明，隐丹参酮发生的是两电子、两质子的准可逆电化学反应。碳糊电极具有电位范围宽，制备方便，价格低廉等特点，在伏安法中得到了广泛应用[10]。由于碳糊电极中有机相的存在，有机分析物可能在该电极上富集并表现出不同的电化学行为。本实验研究了TS在碳糊电极上的电化学行为。在选定的最佳条件下，TS产生一对可逆的氧化还原峰，可用于分析目的。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
JP303型极谱分析仪(成都仪器厂)；CHI660型电化学工作站(CHI仪器公司，美国)，CHI660软件包在Windows2000环境下控制工作站运行；自制碳糊电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝为对电极。
3.4×10-3 mol/L TS标准储备液：准确称取TS对照品(中国药品生物制品检定所)0.1000 g, 用95%乙醇溶解并定容至100 mL棕色容量瓶中，冰箱4℃保存；其它标准工作溶液由该储备液用95%乙醇和水稀释而成(乙醇和水体积比为40∶60)；复方丹参片(市售)；1.0 mol/L BR缓冲液按常规方法配制；碳粉(化学纯，北京化学试剂公司)；硅油(色谱纯，成都市科龙化工试剂厂)；其余所用试剂均为分析纯，实验用水均为二次蒸馏水。所有实验均在室温下操作。
2.2 碳糊电极的制备与活化
将碳粉和硅油(5∶2， w/w)在研钵中混合均匀后，装入塑料管(3 mm i.d.)中，压紧，用铜导线引出，将电极表面在称量纸上磨平抛光[11]。将碳糊电极在0.2 mol/L BR(pH 2.4)乙醇/水(40∶60，V/V)底液中在0.0～1.0和0.0～-1.0 V范围内分别以0.1 V/s扫速多次循环扫描至基线稳定。然后在1.1 V预氧化2 min，在-1.0 V预还原2 min。需要更新电极表面时,将碳糊挤出2～3 mm,抛光活化后即可使用。
2.3 实验方法
移取适量TS标准工作溶液于10 mL容量瓶中,加入 2 mL 1.0 mol/L BR (pH 2.4) 缓冲液，补充95%乙醇使其最终含量为40%(V/V),用水稀释至刻度，摇匀,转入伏安池中，在CHI660型电化学工作站上，以02 V/s在0.0~-0.60 V范围内循环扫描，记录循环伏安曲线；在JP303型极谱分析仪上，以02V/s在-0.40~0.0 V范围内作阳极化线性扫描，记录-0.24 V处的二阶导数氧化峰峰电流。用TS氧化峰二阶导数峰峰电流i″p对TS浓度作图得校准曲线。每次测量完毕，将CPE 置于0.1 mol/L HCL溶液中，在1.0~0.0 V范围内阴极化线性扫描至该电极在底液中基线稳定，再用清水冲洗，以除去电极表面的分析物残留并活化电极。
2.4 试样制备及分析手续
称取10粒复方丹参片，研细，求得每片平均质量为0.3013 g。准确称取质量相当于一粒复方丹参片的粉末样，加95%乙醇溶解并定容至50 mL棕色容量瓶中，备用。溶液放置12 h至澄清后，取清液按上述方法进行测定，用标准曲线法求出复方丹参片中丹参酮总含量。
3 结果与讨论
3.1 丹参酮ⅡA电化学行为
图1为丹参酮ⅡA在0.2 mol/L BR(pH 2.4)乙醇/水(40∶60， V/V)底液中的循环伏安曲线。于0.0~-0.60 V范围内作阴极化线性电位扫描，在-0.306 V出现一阴极峰。反扫时,在-0.238 V出现一阳极峰。阳极峰与阴极峰两峰电位差ΔEp＝68 mV, 阳极峰与阴极峰两峰电流比ipa /ipc＝1.2。当扫速v由0.1 V/s增加至0.5 V/s时，氧化峰、还原峰峰电流均与扫速v的一次方成正比(图2)；同时，氧化峰峰电位正移，还原峰峰电位负移，峰电位均与lg v成正比(图3)。说明TS电极反应是有吸附特征的可逆过程。
图1 循环伏安图(略)
Fig.1 Cyclic voltammogram of BR buffer (a) and tanshinone (TS) (b)
a. 0.2 mol/L BR (pH 2.4)ethanol/water (40∶60， V/V) medium; b. a+ 4.8×10-6 mol/L TS . The initial potential 0.0 V, the potential of reverse -0.6 V, scan rate v: 0.2 V/s.
图2 还原峰(1)和氧化峰(2)峰电流与扫速的关系(略)
Fig.2 The relationship of reduction (1) and oxidation (2) peak current with scan rate in 6.8×10-6 mol/L TS+BR (pH 2.4) ethanol/water (40∶60， V/V) medium
图3 还原峰 (1)和氧化峰(2)峰电位与lg v的关系(略)
Fig.3 The relationship of reduction (1) and oxidation (2) peak potential with logarithm of scan rate
其它条件同图2(the conditions as in Fig.2)。
由实验纪录的方波伏安曲线上测得TS氧化峰半峰宽84 mV，还原峰半峰宽108 mV，依据可逆体系理论半峰宽ω1/2 =90.4/n,求得氧化峰电子转移数n＝0.93，还原峰电子转移数n＝1.2。由上述单扫描伏安法可知，阳极峰与阴极峰两峰电位差ΔEp＝68 mV, 求得n＝0.87。另外，在pH值2.09~5.02 范围内，TS氧化峰电位Ep与pH的关系为-Ep/V=0.12+0.049 pH (r=0.9962, n=7)。由此推知TS电极反应是单电子、单质子过程。
TS(见图1)为9,10菲醌的衍生物，邻位羰基是其主要活性基团[12]，它应有与母体9,10菲醌相似的电化学性质。研究表明，9,10菲醌分子中邻位羰基经两电子、两质子加成反应生成菲氢醌，中间产物为半醌自由基[13～15]。脉冲辐解技术在水溶液中研究9,10菲醌还原性质的结果还表明，9,10菲醌经单电子还原生成半醌自由基,该半醌自由基能发生岐化反应[15]。在水溶液中，隐丹参酮在玻碳电极上发生两电子、两质子参与的准可逆反应，只观察到一个还原峰[9]，这可能是由于水及质子的存在加速了半醌自由基的岐化反应[15]。在本实验条件下，TS通过单电子、单质子反应生成半醌自由基,由于CPE中有机物硅油的存在，有机相使反应生成的半醌自由基能够稳定存在，这与有机介质中9,10菲醌的电化学行为相似[14]。
图4 pH值对峰电流的影响(略)
Fig.4 Effect of pH values on peak current in 68×10-6 mol/L TSethanol/water (40∶60， V/V) medium
v＝0.2 V/s.
3.2 实验条件的优化
碳糊电极有较大的背景电流,而导数技术能有效地抑制背景电流并具有较好的分辨率，同时，氧化峰比还原峰灵敏，峰形好。因此，实验选用二阶导数技术记录TS氧化峰峰电流，并以此进行定量测定。
TS在BR缓冲液中出现的一对氧化还原峰峰形最好，灵敏度最高。当BR缓冲液pH值在2.1~2.6范围内，峰电流最大，且基本保持稳定不变；当pH值在2.6~5.0范围内，峰电流随pH值的增加而减小(图4)。本实验选用pH 2.4±0.1 BR缓冲液作支持电解质。
TS不溶于水易溶于乙醇，实验用乙醇作溶剂。乙醇含量(V/V)对TS氧化峰峰电流影响的实验结果表明(图5)，当乙醇含量小于35%时，峰电流随乙醇含量的增加而增大； 当乙醇含量在35%~45%范围内，峰电流达到最大值并基本保持不变；当乙醇含量大于45%时，峰电流开始降低。实验控制乙醇在支持电解质中含量为40%。
图5 乙醇含量(V)对氧化峰峰电流的影响(略)
Fig.5 Effect of ethanol content (V) on oxidation peak current
v＝0.2 V/s, 其它条件同图2(other conditions as in Fig. 2)。
随着扫速的增加,峰电流增大，峰形变差。为兼顾峰形和分析灵敏度，本实验选用扫速0.2 V/s。
3.3 线性范围和检出限
在选定的实验条件下，TS二阶导数氧化峰峰电流i″p与其浓度在1.2×10-8~8.2×10-7mol/L范围内呈线性关系，线性回归方程为：i″p (nAs-2)＝3.12+0.28C (nmol/L) (r=0.9936, n=7)，检出限(3 σ/s)为4.1×10-9 mol/L。
为验证该方法的重复性，选取标准曲线范围内不同浓度TS溶液：2.0×10-8、4.0×10-8、6.0×10-8、1.2×10-7、3.0×10-7 mol/L，并在一周内进行4次测量，标准曲线斜率分别为：0.289、0.268、0.276、0.285 nAs-2 L·nmol-1 ，截距为3.14、3.21、3.09、3.04，这些斜率和截距的相对标准偏差(RSD)分别为3.3%和23%。用同一支CPE对浓度分别为6.0×10-8和84×10-7mol/L TS溶液进行6次平行测定,其RSD分别为2.7%和3.4%。用6只相同表面积的CPE对浓度为7.2×10-8 mol/L TS溶液进行测定，其RSD为35%。以上参数说明本方法有较好的重复性。
3.4 样品分析和回收率的测定
由于复方丹参片中含有TS、丹参酮 A、隐丹参酮等丹参酮类物质，在实验条件下这些物质具有相似的伏安特征。因此，本方法测得的是样品中丹参酮的总含量。对同一份样品溶液进行5次平行测定，求得每片复方丹参片中丹参酮的总含量分别为0068、0.066、0.066、0.067、0.065%；相对标准偏差为3.7%。在相同浓度的样品溶液中加入不同浓度标准溶液做回收率实验，结果如表1所示。
表1 回收率实验结果(略)
Table 1 Results of recovery test
a. 平均测得值±标准偏差(average found ±standard deviation); b. 平均回收率±相对标准偏差(average reocvery±retative standard deviation)。
References
1 Shi Z H, He J T, Yao T T, Chang W B, Zhao M P. J. Pharm. Biomed. Anal., 2005, 37 (3): 481～486
2 Chen H, Yuan J P, Chen F, Zhang Y L, Song J Y. J. Biotechnol., 1997, 58 (3): 147～156
3 Pan X J, Niu G G, Liu H Z. J. Chromatogr. A, 2001, 922 (12): 371～375
4 Xue M, Cui Y, Wang H Q, Hu Z Y, Zhang B. J. Pharm. Biomed. Anal., 1999, 21 (1): 207～213
5 Chen Lei(陈 雷), Zhu Jihong(朱霁虹), Li Yongqing(李永庆). Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis(药物分析杂志), 2004, 24 (2): 137～139
6 Li J, Wang G J, Li P, Hao H P. J. Chromatogr. B, 2005, 826 (12): 26～30
7 Yuan Jiacai(袁加才). Nanjing University of Traditional Chinese Medicine(南京中医药大学学报), 2005, 21(1): 42
8 Chen Bin(陈 斌), Zhu Mei(朱 梅), Xing Wangxing(邢旺兴), Liu Lili(刘荔荔), Wu Yutian (吴玉田). Acta Pharmaceutica Sinica (药学学报), 2001, 36 (1): 55～57
9 Wu Xiaoping(吴晓苹), Liu Wei(刘 薇), Duan Jianping(段建平), Chen Hongqing(陈红青), Chen Guonan(陈国南). The 9th National Conference on Electroanalytical Chemistry (第九届全国电分析化学学术会议), 2005： 153～154
10 Kalcher K, Kauffmann J M, Wang J, Svancara I, Vytras K, Neuhold C, Yang Z. Electroanalysis, 1995, 7 (1): 5～22
11 Ravichandran K, Baldwin R P. Anal. Chem., 1984, 56 (9): 1744～1747
12 Bu X Z, Huang Z S, Zhang M, Ma L, Xiao G W, Gu L Q. Tetrahedron Letters, 2001, 42 (33): 5737～5740
13 Phani K L N, Narayan R. J. Electroanal. Chem., 1985, 187 (1): 187～195
14 Hossain M S, Tryk D, Yeager E. Electrochim. Acta, 1989, 34 (12): 1733～1737
15 Bao Huaying(包华影), Navaratnam S, Parsons B J, Phillips G Q. Journal of Radiation Research and Radiation Processing (辐射研究与辐射工艺学报), 1997, 15 (1): 10～14
本文系国家自然科学基金资助项目(No.20475043)
(西北大学分析科学研究所,西安 710069), 百拇医药(田新娟 宋俊峰*)