当归注射液对免疫诱导再障小鼠骨髓微环境及IL3的影响
再生障碍性贫血,1材料与方法,2实验结果,3讨论,4结论,参考文献
再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)是血液系统常见疾病，传统的治疗方法效果欠佳，临床死亡率高。因此，对AA发病机制的研究以及寻找有效的治疗药物具有重要的理论和实践意义。目前对于AA，国内多采用中西医结合治疗。当归是著名常用中药，具有养血活血作用[1]，过去多用于治疗腰腿痛和妇科疾病，随着临床研究的进展，其应用范围逐渐扩大。作为补血中药，其在血液系统疾病中的应用及研究也日渐增多。至目前为止，有关当归在血液系统的药理作用基本归纳为：①抑制血小板聚集及抗血栓形成；②刺激骨髓造血；③促进免疫功能恢复；④抗辐射损伤等。武汉大学人民医院儿科从1991年起将当归注射液用于临床治疗AA，取得较好的疗效[2]。但该药治疗AA的实验研究却少有报道。本实验用当归注射液对免疫诱导AA小鼠进行干预治疗，观察其对AA小鼠体重、外周血白细胞计数、骨髓单个核细胞计数、骨髓微环境等的影响，并从分子水平研究其作用机制，进一步为临床应用该药治疗AA提供实验依据。
1材料与方法
11材料
111动物雌性Balb/c小鼠(H2a 、MLSb)8~12周龄，17~20 g，由武汉生物制品研究所提供。DBA/2小鼠(H2a、MLSa)8~10周龄，雌雄不拘，由上海斯莱克实验动物有限公司提供。
112药品、试剂及来源25%当归注射液由武汉大学中南医院药剂科提供，批号：0303131，每毫升含当归生药0.25g。大鼠抗小鼠CD49dRPE单克隆抗体、CD49eFITC单克隆抗体、羊抗大鼠IgGFITC荧光抗体、大鼠抗小鼠细胞周期蛋白D2单克隆抗体、溴化丙啶(PI)、Rnase A、Triton100均购自深圳晶美公司。Ficoll干粉、人淋巴细胞分离液购自美国Sigma公司。
113试剂配制
(1) 0.01mol/L磷酸生理盐水(phosphate buffer saline, PBS)的配制：
磷酸氢二钠(Na2HPO4)：3.48g；氯化钾(KCl)：0.2g；磷酸二氢钾(KH2PO4)：0.2g；氯化钠(NaCl)：8.0g。加入1 L双蒸水稀释后滤纸过滤，消毒，4℃冰箱保存待用。
(2) 小鼠淋巴细胞分离液的配制：
Ficoll干粉2.1g加入20 ml双蒸水，配成10.5%溶液，过滤待用，用人淋巴细胞分离液100 ml加入配制好的10.5% Ficoll溶液7 ml，配成小鼠淋巴细胞分离液。过滤消毒，4℃冰箱避光保存待用。
(3) 台盼蓝的配制： ......
您现在查看是摘要页，全文长 13553 字符。