http://www.100md.com 2006年9月28日 杨 隽 郭红卫 仲伟鉴 安达龙太 北野健

    图1 BPA对日本比目鱼性别比例的影响

    每条鱼的性别判定依据于成年期生殖腺形态学和组织学观察检测。18℃对照,n=27; 27℃对照,n=40;

    E2,1μg/g食料, n=23;

    BPA,100μg/g食料, n=21

    2.2 原位杂交分析各组生殖腺中P450arom mRNA的表达

    图3(见封3)和表1显示原位杂交分析的各组比目鱼第100天性成熟的青年期生殖腺中P450arom mRNA的表达。在18℃对照组(图3a)、E2组(图3c)和BPA组(图3d)的雌性生殖腺中P450arom mRNA有显著表达；然而在27℃模型组(图3b)的雄性生殖腺中没有表达。

    2.3 原位杂交分析各组生殖腺中MIS mRNA的表达

    图4(见封底)和表2显示原位杂交分析的各组比目鱼第100天性成熟的青年期生殖腺中MIS

    mRNA的表达。在18?C对照组(图4a)、E2组(图4c)和BPA组(图4d)的雌性生殖腺中MIS mRNA几乎没有表达；然而在27℃模型组(图4b)的雄性生殖腺中有极其明显的表达。

    2.4 RT-PCR分析各组生殖腺中P450arom和MIS mRNA的表达。

    表2组织学和原位杂交分析青年期生殖腺的小结

    组别卵巢腔P450arom mRNA

    表达的强弱MIS mRNA

    表达的强弱18℃对照有+-27℃对照无-+++27℃+E2有+-27℃+BPA有+-表达位置基质细胞支持细胞

    图5(见封底)显示RT-PCT分析每组各3条比目鱼第100天性成熟的青年期生殖腺中P450arom 和MIS mRNA的表达，也进一步验证原位杂交获得的结果。在18℃对照组全部雌鱼和BPA组一条雌鱼的生殖腺中P450arom mRNA有显著表达，但这些生殖腺中MIS mRNA几乎没有表达；然而在27℃模型组全部雄鱼和BPA组的两条雄鱼的生殖腺中P450arom mRNA没有表达而MIS mRNA有显著的表达。

    3 讨论

    本研究中发现，雌二醇组雌性占到100%，剂量为1μg/g，只有BPA剂量100μg/g的1/100 。BPA雌性占57.1%