EGFR在乳腺癌中的表达及意义
【摘要】 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学(SP)法检测EGFR在47例乳腺癌组织和19例乳腺腺病组织中的表达。结果：47例乳腺癌组织中EGFR阳性表达率为532%，显著高于乳腺腺病组织中的表达(263%)(P<005)。EGFR与乳腺癌的组织学类型及淋巴结转移无明显关系(P>005)。结论：EGFR与乳腺癌的发生密切相关，检测EGFR对乳腺癌的早期诊断有重要意义。
【关键词】 表皮生长因子受体；乳腺癌；免疫组织化学
Expression and Significance of EGFR in the Breast Carcinoma
LI Haifeng， ZHANG Xiaoli， BO Aihua， et al
Hebei North University, Zhangjiakou, 075000，Hebei China
【ABSTRACT】 Objective：To study clinical signicance and expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) in the breast carcinoma.Methods:Immunohistochemical methhod (SP) was used to detect the expression of the EGFR in 47 breast carcinoma tissues and 19 adenosis of breast tissues.Results:：The positive expression rates of EGFR were 532% and 263% in the breast carcinoma and adenosis of breast. Compared the two groups, the positive expression rates difference has statistic significance (P<005)The positive expression rate of EGFR wasnt related to the histological classification and lymph noge involvement(P>005).Conclusion：EGFR was related to pathogenesis of breast carcinoma. It has important significance for examining EGFR to early diagnose breast carcinoma.
【KEY WORDS】 Epidermal Growth Factor Receptor；Breast；Carcinoma；Immunohistochemical method
乳腺癌是危害女性健康的主要恶性肿瘤，发病率一直居高不下，呈低龄化和非肥胖人群高发趋势，因而愈来愈引起人们的关注。表皮生长因子受体是一种细胞膜表面糖蛋白，与细胞的增殖、死亡和分化有关，表皮生长因子受体酪氨酸激酶介导的细胞生长信号通路在癌症的形成和发展过程中起重要作用\[1\]。我们对47例乳腺癌和19例乳腺腺病组织中表皮生长因子受体进行检测，探讨表皮生长因子受体(EGFR)的表达与乳腺癌临床病理特征的关系。
1 资料和方法
11 一般资料
收集2004~2005年张家口地区乳腺癌手术切除标本47例，乳腺腺病19例；年龄从27~70岁，平均年龄5206岁。标本经10%中性甲醛固定，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续切片6张，切片厚度5μm。
12 免疫组织化学染色
采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶免疫组织化学染色方法(SP法)。鼠抗人EGFR单克隆抗体和SP试剂盒购自中山生物技术有限公司。操作在室温下进行。切片常规脱蜡至水，03%双氧水孵育，枸橼酸盐缓冲液高温抗原修复；正常山羊血清室温封闭10min，分别滴加鼠抗人EGFR单克隆抗体4℃过夜；滴加生物素标记Ⅱ抗30min；滴加辣根过氧化物酶标记的链酶卵白素Ⅲ抗30min；DAB显色，树胶封片。每批实验阳性对照片用已知阳性片作对照；阴性对照片用PBS代替第Ⅰ抗。
13 染色结果判定
光镜下EGFR阳性物质位于细胞核内呈棕黄色颗粒。每张切片随机观察6~10个高倍视野，阳性细胞数(取被观察视野的平均数)超过5%定为染色阳性病例(+)，否则，定为阴性病例(-)。
14 统计学处理 采用卡方检验对数据进行处理。
2 结果
21 EGFR在乳腺癌与乳腺腺病中的表达
EGFR在乳腺癌中阳性率是532%，乳腺腺病是263%，二者比较具有显著性差异(P<005)。表1 EGFR在乳腺癌与乳腺腺病中的表达
22 EGFR的表达与乳腺癌组织学类型、部位、年龄及淋巴结转移的关系：
EGFR在浸润型导管癌和典型髓样癌中阳性表达率比较无显著性差异(P>005)；EGFR的表达与乳腺癌的部位有密切关系(P<005)，与淋巴结转移情况无明显关系(P>005)。表2 EGFR的表达与乳腺癌组织学类型、部位、年龄及淋巴结转移的关系
3 讨论
EGFR是170kD大小具有酪氨酸激酶活性的膜受体，与之结合的配体有表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGFα)、双调蛋白(amphiregulin，AR)等,它们结合配体后，形成同源或异源二聚体，激活内在的酪氨酸激酶活性，使自身酪氨酸残基发生磷酸化，与下游含SH2和PTB区域的蛋白结合，激发信号级联反应，促进细胞从G1期过渡到S期，EGFR在细胞增殖中发挥着重要作用。相关研究证明，EGFR在多种不同的实体瘤患者中过度表达，如非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、大肠癌、膀胱癌、前列腺癌等，常与预后不良、肿瘤血管形成和肿瘤的转移有关\[2~5\]。本研究发现乳腺癌中EGFR的阳性表达率明显高于乳腺腺病(P<005)，说明EGFR的过度表达与乳腺癌的发生、发展内有密切关系，在乳腺癌细胞中存在着表皮生长因子(EGF)的自分泌环，分泌EGF并表达其相应的受体EGFR，当EGFR与配体结合后，促进受体酪氨酸激活，使自身磷酸化，提供持续分裂信号到细胞内膜，引起细胞过度增殖。
表皮生长因子受体在癌症的发生发展及预后中发挥着重要作用，因此以EGFR为作用靶点的肿瘤治疗取得了令人瞩目的进展，并为癌症的治疗提供了一个新思路。目前认为是最有前途的两种治疗手段，一种是以EGFR胞外区为靶点的单克隆抗体；另一种是可特异性地抑制EGFR激酶活性的小分子酪氨酸酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor，TKI)。研究发现EGFR抗体如IMCC225可使EGFR在细胞膜表面的数量减少，同时IMCC225通过诱导细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白P27含量的升高，使细胞停留于G1期，IMCC225还可抑制bcl2的表达，使肿瘤细胞发生凋亡\[6\]。放、化疗药物与EGFR靶向药物的联用将是一种前景广阔的治疗方案。
参考文献
1 李哲，袁守军.表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在肿瘤治疗中的应用\[J\].中国临床药理学与治疗学，2004，9(4)：361364
2 徐晓辉，霍建民.非小细胞肺癌中MMP9和EGFR的表达及预后的意义[J].哈尔滨医科大学学报，2004，38(5)：432434
3 侍立志，王兆春.EGF、EGFR和PCNA表达与大肠癌临床病理学特征及关系[J].中国普通外科杂志，2004，13(4)；253256
4 南林，刘存.EGFR、TGF1、P21WAF1/CIP1在胃癌中的表达及意义[J].新疆医科大学学报，2003，26(3)：246248
5 Yarden Y，Sliwkowski MX.Untangling the erbB signaling network[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2001，2(2)：127137
6 张宇春，杨纯正.针对EGFR靶点的肿瘤治疗[J].国外医学分册，2004，31(50)：359361
(河北北方学院实验中心，河北 张家口 075000)
(责任编辑：李蓟龙), 百拇医药(李海峰 张晓丽 薄爱华 邢立强)
【关键词】 表皮生长因子受体；乳腺癌；免疫组织化学
Expression and Significance of EGFR in the Breast Carcinoma
LI Haifeng， ZHANG Xiaoli， BO Aihua， et al
Hebei North University, Zhangjiakou, 075000，Hebei China
【ABSTRACT】 Objective：To study clinical signicance and expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) in the breast carcinoma.Methods:Immunohistochemical methhod (SP) was used to detect the expression of the EGFR in 47 breast carcinoma tissues and 19 adenosis of breast tissues.Results:：The positive expression rates of EGFR were 532% and 263% in the breast carcinoma and adenosis of breast. Compared the two groups, the positive expression rates difference has statistic significance (P<005)The positive expression rate of EGFR wasnt related to the histological classification and lymph noge involvement(P>005).Conclusion：EGFR was related to pathogenesis of breast carcinoma. It has important significance for examining EGFR to early diagnose breast carcinoma.
【KEY WORDS】 Epidermal Growth Factor Receptor；Breast；Carcinoma；Immunohistochemical method
乳腺癌是危害女性健康的主要恶性肿瘤，发病率一直居高不下，呈低龄化和非肥胖人群高发趋势，因而愈来愈引起人们的关注。表皮生长因子受体是一种细胞膜表面糖蛋白，与细胞的增殖、死亡和分化有关，表皮生长因子受体酪氨酸激酶介导的细胞生长信号通路在癌症的形成和发展过程中起重要作用\[1\]。我们对47例乳腺癌和19例乳腺腺病组织中表皮生长因子受体进行检测，探讨表皮生长因子受体(EGFR)的表达与乳腺癌临床病理特征的关系。
1 资料和方法
11 一般资料
收集2004~2005年张家口地区乳腺癌手术切除标本47例，乳腺腺病19例；年龄从27~70岁，平均年龄5206岁。标本经10%中性甲醛固定，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续切片6张，切片厚度5μm。
12 免疫组织化学染色
采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶免疫组织化学染色方法(SP法)。鼠抗人EGFR单克隆抗体和SP试剂盒购自中山生物技术有限公司。操作在室温下进行。切片常规脱蜡至水，03%双氧水孵育，枸橼酸盐缓冲液高温抗原修复；正常山羊血清室温封闭10min，分别滴加鼠抗人EGFR单克隆抗体4℃过夜；滴加生物素标记Ⅱ抗30min；滴加辣根过氧化物酶标记的链酶卵白素Ⅲ抗30min；DAB显色，树胶封片。每批实验阳性对照片用已知阳性片作对照；阴性对照片用PBS代替第Ⅰ抗。
13 染色结果判定
光镜下EGFR阳性物质位于细胞核内呈棕黄色颗粒。每张切片随机观察6~10个高倍视野，阳性细胞数(取被观察视野的平均数)超过5%定为染色阳性病例(+)，否则，定为阴性病例(-)。
14 统计学处理 采用卡方检验对数据进行处理。
2 结果
21 EGFR在乳腺癌与乳腺腺病中的表达
EGFR在乳腺癌中阳性率是532%，乳腺腺病是263%，二者比较具有显著性差异(P<005)。表1 EGFR在乳腺癌与乳腺腺病中的表达
22 EGFR的表达与乳腺癌组织学类型、部位、年龄及淋巴结转移的关系：
EGFR在浸润型导管癌和典型髓样癌中阳性表达率比较无显著性差异(P>005)；EGFR的表达与乳腺癌的部位有密切关系(P<005)，与淋巴结转移情况无明显关系(P>005)。表2 EGFR的表达与乳腺癌组织学类型、部位、年龄及淋巴结转移的关系
3 讨论
EGFR是170kD大小具有酪氨酸激酶活性的膜受体，与之结合的配体有表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGFα)、双调蛋白(amphiregulin，AR)等,它们结合配体后，形成同源或异源二聚体，激活内在的酪氨酸激酶活性，使自身酪氨酸残基发生磷酸化，与下游含SH2和PTB区域的蛋白结合，激发信号级联反应，促进细胞从G1期过渡到S期，EGFR在细胞增殖中发挥着重要作用。相关研究证明，EGFR在多种不同的实体瘤患者中过度表达，如非小细胞肺癌(NSCLC)、胃癌、大肠癌、膀胱癌、前列腺癌等，常与预后不良、肿瘤血管形成和肿瘤的转移有关\[2~5\]。本研究发现乳腺癌中EGFR的阳性表达率明显高于乳腺腺病(P<005)，说明EGFR的过度表达与乳腺癌的发生、发展内有密切关系，在乳腺癌细胞中存在着表皮生长因子(EGF)的自分泌环，分泌EGF并表达其相应的受体EGFR，当EGFR与配体结合后，促进受体酪氨酸激活，使自身磷酸化，提供持续分裂信号到细胞内膜，引起细胞过度增殖。
表皮生长因子受体在癌症的发生发展及预后中发挥着重要作用，因此以EGFR为作用靶点的肿瘤治疗取得了令人瞩目的进展，并为癌症的治疗提供了一个新思路。目前认为是最有前途的两种治疗手段，一种是以EGFR胞外区为靶点的单克隆抗体；另一种是可特异性地抑制EGFR激酶活性的小分子酪氨酸酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor，TKI)。研究发现EGFR抗体如IMCC225可使EGFR在细胞膜表面的数量减少，同时IMCC225通过诱导细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白P27含量的升高，使细胞停留于G1期，IMCC225还可抑制bcl2的表达，使肿瘤细胞发生凋亡\[6\]。放、化疗药物与EGFR靶向药物的联用将是一种前景广阔的治疗方案。
参考文献
1 李哲，袁守军.表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在肿瘤治疗中的应用\[J\].中国临床药理学与治疗学，2004，9(4)：361364
2 徐晓辉，霍建民.非小细胞肺癌中MMP9和EGFR的表达及预后的意义[J].哈尔滨医科大学学报，2004，38(5)：432434
3 侍立志，王兆春.EGF、EGFR和PCNA表达与大肠癌临床病理学特征及关系[J].中国普通外科杂志，2004，13(4)；253256
4 南林，刘存.EGFR、TGF1、P21WAF1/CIP1在胃癌中的表达及意义[J].新疆医科大学学报，2003，26(3)：246248
5 Yarden Y，Sliwkowski MX.Untangling the erbB signaling network[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2001，2(2)：127137
6 张宇春，杨纯正.针对EGFR靶点的肿瘤治疗[J].国外医学分册，2004，31(50)：359361
(河北北方学院实验中心，河北 张家口 075000)
(责任编辑：李蓟龙), 百拇医药(李海峰 张晓丽 薄爱华 邢立强)