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编号:11275793
人早幼粒白血病HL60细胞蛋白激酶CK2的研究
http://www.100md.com 《广东药学院学报》 1999年第1期
蛋白激酶,CK2,;HL60细胞;性质,,蛋白激酶,CK2,;HL60细胞;性质,1材料和方法,2结果与讨论,3参考文献
     摘要 目的:研究人早幼粒白血病HL60细胞蛋白激酶CK2 的性质。方法:经二次DE52离子交换纤维素柱,一次肝素Sepharose 48 亲和层析柱纯化后的 CK2 (纯化了139 倍,回收率为11.8%),以[γ32P]ATP和[γ32P]GTP为磷酸供体,以去磷酸化酪蛋白为底物,对其性质进行研究。结果:Ca2+、cAMP、cGMP 等第二信使对 HL60细胞的 CK2 活性无显著影响。肝素抑制 CK2 活性,而精胺激活 CK2,肝素与精胺对 CK2的作用在一定浓度范围内呈剂量依赖性。对 CK2 的动力学研究测得其米氏常数 Km(GTP)为34.0 μ mok/L。结论:CK2是一种不依赖于Ca2+、cAMP、cGMP等第二信使的蛋白激酶,肝素是其抑制剂,精胺是其激活剂。

    关键词 蛋白激酶 CK2 ;HL60细胞;性质

    Study on protein kinase CK2 from HL60 cekks

    Weng Yun,Xu Meiyi,Liang Nianci

    (Institute of Medicak Biochemistry,Guangdong Medicak Cokkege,Zhanjiang 524023)

    Abstract Objective:To study the characterization of CK2 from HL60 cekks.Methods:CK2 was purified from HL60 cekks by doubke chromatography of DE52 and a heparinsepharose 4B affinity cokumn(the procedure resukted in a 139fokd purification of the kinase activity with a yiekd of 11.8%).CK2 activity was detected by using[γ32P]ATP or[γ32P]GTP as phosphoryk donor and dephosphated casein as substrate.Resukts:CK2 activity was not affected by Ca2+,cAMP and cGMP.Hepar in inhibited CK2 activity with kow concentrations and spermine stimukated CK2 activity effectiveky.Using dephosphated casein(2 g/L)as substrate ......

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