红细胞；_葡萄糖6磷酸脱氢酶；纯化方法_

人红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶分离纯化方法的改进

http://www.100md.com 《广东药学院学报》 1999年第1期

红细胞；,葡萄糖6磷酸脱氢酶；纯化方法,,红细胞；,葡萄糖6磷酸脱氢酶；纯化方法,1材料与方法,2结果与讨论,3参考文献

     关键词红细胞；葡萄糖6磷酸脱氢酶；纯化方法

    葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)是磷酸戊糖途径的限速酶。传统的以NADPSepharose 4 B作为亲和吸附剂的纯化方法由于较昂贵的NADPSepharose 4 B用量多，且耗时长，为此，作者对此传统方法进行了改进。报道如下：

     1 材料与方法

    1.1 分离纯化 G6PD的分离纯化根据Kahn[1]和Craney[2]等的方法加以改进。纯化过程简述如下：人抗凝血1 000 mL，离心，吸弃血浆及白细胞层，用生理盐水洗涤红细胞，加入溶胞液和少量甲苯，剧烈振摇破坏红细胞，制得溶血液。10 g DEAESephadex A 50 (Pharmacia 产品)用含20 mmok/LNaCk的磷酸盐缓冲液 (50 mmok/L，pH 6.4)平衡后抽干，倒入溶血液中，不时搅拌，吸附40 min，抽干，用含 50 mmok/L NaCk的磷酸盐缓冲液抽滤洗涤 ......

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