葎草花粉cDNA表达文库构建成功
2005年3月17日，玉环县食品药品监管局执法人员对某村卫生室进行日常检查时，4支注射器上的橡皮膏引起了执法人员的注意。
该卫生室注射室操作台上的方盘内摆放着4支已拆除外包装的一次性使用无菌注射器，其中2支注射器的针筒上缠着橡皮膏，另2支注射器的针座上也缠有橡皮膏，方盘内还存有2支使用后留下的注射用头孢唑啉钠、注射用青霉素玻璃瓶。注射器上为何要缠橡皮膏？面对执法人员的询问，卫生室负责人的解释是：“我们在注射器上贴橡皮膏是用来区分先锋霉素和青霉素两种试液，虽然做皮试时没有更换针筒，但已经更换了一次性皮试针头，没有重复使用一次性医疗器械。”如是解释并没有消除执法人员心中的疑云。于是，执法人员试图从现场寻找答案。在现场，执法人员没有发现更换下来的一次性皮试针头，废弃桶中也没有使用后被废弃的皮试针头；查看《门诊日志》，当天做过青霉素、先锋霉素皮试的人有10多个。执法人员当即提出让卫生室工作人员按照其所描述的程序进行操作。在现场证据和执法人员的再三追问下，该卫生室工作人员不得不承认为图方便和省钱而重复使用一次性使用无菌注射器的违法事实。
在日常检查中，当场发现医疗机构重复使用一次性医疗器械的可能性比较小。这个案件告诉我们，如果在检查中能认真留意现场“蛛丝马迹”，耐心细致询问，隐藏在背后的违法事实总能水落石出。
浙江省玉环县食品药品监管局 洪克文 潘辉
本报陕西讯 葎草为多年生缠绕草本植物，全草可以入药，其花粉是西北主要的致敏原。西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科的刘昀博士等，日前采用Trizol试剂法抽提葎草花粉总RNA，在西北地区首次成功构建出一个含有5×105重组子的中药葎草花粉cDNA表达文库。
花粉致敏引起的变态反应病，是影响人类健康的主要因素之一。采用基因重组技术制备变应原疫苗，并用于变态反应性疾病的诊断和治疗，是目前国内外变态反应领域研究的热点。近年来，国外已构建了许多花粉的cDNA文库，一些主要变υ煞旨爸旅舻鞍鬃榉忠驯豢寺『痛炕玷胧骰ǚ邸㈦嗖莼ǚ邸⑸际骰ǚ?br>及樱桃花粉等。有研究表明，葎草花粉是西北地区最主要的气传致敏原之一，其空气中的花粉量计数仅次于篙属花粉。
为构建葎草花粉cDNA表达文库，深入研究葎草花粉主要变应原，刘昀等研究人员自2004年起，将采集的葎草花粉通过分样筛选，利用Trizol法抽提葎草花粉总RNA，纯化后用多重聚合酶链反应(PCR)法反转录合成cDNA，并进行cDNA片段与载体的连接及体外包装，包装物经孵育后，计算其蓝白斑比例、噬菌斑数、噬菌体滴度及库容量。在此基础上，再用PCR法进行文库重组率的测定及插入片段大小的鉴定，从而成功地构建出葎草花粉cDNA表达文库。
刘昀等研究人员认为，研究表明，葎草花粉变应原皮内试验阳性者达70%，血清过敏原特异性IgE阳性率达67%。该文库的成功构建，为临床对于葎草花粉过敏引起的变态反应性疾病的诊断和治疗，以及对葎草花粉致敏蛋白组分的研究和重组葎草花粉变应原疫苗的研制，奠定了坚实的基础。
(吴一福), 百拇医药
该卫生室注射室操作台上的方盘内摆放着4支已拆除外包装的一次性使用无菌注射器，其中2支注射器的针筒上缠着橡皮膏，另2支注射器的针座上也缠有橡皮膏，方盘内还存有2支使用后留下的注射用头孢唑啉钠、注射用青霉素玻璃瓶。注射器上为何要缠橡皮膏？面对执法人员的询问，卫生室负责人的解释是：“我们在注射器上贴橡皮膏是用来区分先锋霉素和青霉素两种试液，虽然做皮试时没有更换针筒，但已经更换了一次性皮试针头，没有重复使用一次性医疗器械。”如是解释并没有消除执法人员心中的疑云。于是，执法人员试图从现场寻找答案。在现场，执法人员没有发现更换下来的一次性皮试针头，废弃桶中也没有使用后被废弃的皮试针头；查看《门诊日志》，当天做过青霉素、先锋霉素皮试的人有10多个。执法人员当即提出让卫生室工作人员按照其所描述的程序进行操作。在现场证据和执法人员的再三追问下，该卫生室工作人员不得不承认为图方便和省钱而重复使用一次性使用无菌注射器的违法事实。
在日常检查中，当场发现医疗机构重复使用一次性医疗器械的可能性比较小。这个案件告诉我们，如果在检查中能认真留意现场“蛛丝马迹”，耐心细致询问，隐藏在背后的违法事实总能水落石出。
浙江省玉环县食品药品监管局 洪克文 潘辉
本报陕西讯 葎草为多年生缠绕草本植物，全草可以入药，其花粉是西北主要的致敏原。西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科的刘昀博士等，日前采用Trizol试剂法抽提葎草花粉总RNA，在西北地区首次成功构建出一个含有5×105重组子的中药葎草花粉cDNA表达文库。
花粉致敏引起的变态反应病，是影响人类健康的主要因素之一。采用基因重组技术制备变应原疫苗，并用于变态反应性疾病的诊断和治疗，是目前国内外变态反应领域研究的热点。近年来，国外已构建了许多花粉的cDNA文库，一些主要变υ煞旨爸旅舻鞍鬃榉忠驯豢寺『痛炕玷胧骰ǚ邸㈦嗖莼ǚ邸⑸际骰ǚ?br>及樱桃花粉等。有研究表明，葎草花粉是西北地区最主要的气传致敏原之一，其空气中的花粉量计数仅次于篙属花粉。
为构建葎草花粉cDNA表达文库，深入研究葎草花粉主要变应原，刘昀等研究人员自2004年起，将采集的葎草花粉通过分样筛选，利用Trizol法抽提葎草花粉总RNA，纯化后用多重聚合酶链反应(PCR)法反转录合成cDNA，并进行cDNA片段与载体的连接及体外包装，包装物经孵育后，计算其蓝白斑比例、噬菌斑数、噬菌体滴度及库容量。在此基础上，再用PCR法进行文库重组率的测定及插入片段大小的鉴定，从而成功地构建出葎草花粉cDNA表达文库。
刘昀等研究人员认为，研究表明，葎草花粉变应原皮内试验阳性者达70%，血清过敏原特异性IgE阳性率达67%。该文库的成功构建，为临床对于葎草花粉过敏引起的变态反应性疾病的诊断和治疗，以及对葎草花粉致敏蛋白组分的研究和重组葎草花粉变应原疫苗的研制，奠定了坚实的基础。
(吴一福), 百拇医药