基质金属蛋白酶；人肾系膜细胞；糖基化终产物；糖尿病肾病

糖基化终产物对人肾系膜细胞MMP2表达的影响

http://www.100md.com 《东南大学学报(医学版)》 2006年第5期

基质金属蛋白酶；人肾系膜细胞；糖基化终产物；糖尿病肾病,,],基质金属蛋白酶；人肾系膜细胞；糖基化终产物；糖尿病肾病,1材料与方法,2结果,3讨论

     [摘要]目的: 观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products, AGEs)对人肾系膜细胞(human renal mesangial cell，HRMC)基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase，MMP2)表达的影响。方法: 运用糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGEBSA)干预体外培养的HRMC，Western blot检测系膜细胞MMP2蛋白表达。结果: HRMC的MMP2蛋白表达水平随AGEBSA浓度增加和干预时间延长而降低(P<0.01)。结论: MMP2可能参与AGEs所致的糖尿病肾病的发生发展。

    [关键词] 基质金属蛋白酶；人肾系膜细胞；糖基化终产物；糖尿病肾病

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)特征性的病理改变为细胞外基质(extracellular matrix, ECM)积聚和基底膜增厚。系膜基质的成分与含量决定于基质合成与降解两者之间的平衡。基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase, MMP2)是重要的ECM降解酶，它定位于肾小球，由结缔组织细胞分泌，主要参与Ⅳ型胶原的降解，而后者是DN时肾小球基底膜增厚和系膜基质堆积的主要成分，因此与DN的关系非常密切。持续高血糖状态下体内蛋白质发生非酶糖基化反应和最后形成的糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGEs)在DN发生机制中具有重要意义，已有研究显示AGEs能降低大鼠肾小球系膜细胞MMP2表达和活性 [1]。本研究以体外培养的人肾系膜细胞(HRMC)为模型，进一步观察AGEs对MMP2蛋白表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂牛血清白蛋白(AMRESCO产品), DMEM培养基(GIBCO产品，低糖型),小牛血清(兰州民海生物) ,蛋白抽提试剂(上海申能博彩),SDSPAGE试剂(上海凯基生物),预染标准蛋白质Marker(北京天为时代),GAPDH(上海康成),MMP2单克隆抗体和兔抗鼠辣根过氧化酶抗体(美国Santa Cruz 公司),DAB显色试剂(上海申能博彩),其他试剂均为国产分析纯 ......

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