摘要:目的 构建表达mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗，并探讨其免疫保护作用。 方法 在Sj31基因上游引物与mIFN-γ下游引物的5'分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点，在mIFN-γ上游引物与Sj31基因下游引物的5'设计相同的酶切位点。分别进行PCR扩增，再通过引物的5'端相同的酶切位点进行2个PCR产物的酶切与连接，以连接产物为模板，应用Sj31的上游引物和mIFN-γ下游引物进行PCR扩增，将此次PCR产物经常规方法克隆入载体pcDNA3.0(简称为pc)，构建成多价DNA疫苗pc-Sj31-mIFN-γ。对重组质粒鉴定后，大量制备纯化质粒免疫昆明小鼠，48只小鼠分为A、B、C、D4组，对照组的小鼠于股四头肌注射质粒pcDNA3.0100μg，3个免疫组的小鼠分别注射pc-Sj31、pc-mIFN-γ和pc-Sj31-mIFN-γ质粒DNA各100μg。在0、2、6周免疫共3次，第3次免疫后2周，每只小鼠经腹部贴片感染尾蚴40±1条，感染后第42天剖杀，计数各小鼠检获成虫数及肝卵数。 结果 pc-Sj31-mIFN-γ(D组)免疫组的减虫率和肝组织减卵率分别为28.56%和60.20%，但是表达鼠mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗并未明显优于单纯表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)DNA疫苗的免疫保护作用。 结论 pc-Sj31-mIFN-γ多价DNA疫苗构建成功，但其诱导小鼠抗血吸虫病免疫保护效果不明显优于pc-Sj31。

    关键词:日本血吸虫;组织蛋白酶B，mIFN-γ，多价DNA疫苗

    Studies on the protective immunity of DNA vaccine of rat IFN-γinfused with Schistosoma japaonicum tissue protein B.

    LUO Yong-hui，YI Xin-yuan，ZENG Xian-fang.

    (Laboratory Department of Jiangxi Provincial Maternal Hospital，Nanchang330008，Jiangxi，P.R.China)

    Abstract:Objective To construct a fusion expression vector for DNA vaccine including murine interferon gamma(mIFN-γ)and antigen Sj31to enhance the protective immunity of the Schistosoma japonicum cathepsin B(Sj31) ......