【关键词】 神经干细胞；培养鉴定；移植

     0引言

    神经干细胞(neural stem cells, NSCs)在临床应用中有广阔的前景，对它的研究一直是近年来的热点,现对NSCs的生物学特性,培养鉴定以及在中枢神经系统退行性疾病，缺血损伤和肿瘤治疗等方面的研究进展做一概述.

    1NSCs的存在部位和生物学特性

    1.1存在部位在哺乳类动物胚胎期的纹状体、海马、脑皮层、视网膜、脊髓、嗅球、侧脑室的脑室区、室下区均发现有NSCs存在，成年后，NSCs主要存在于嗅球、皮层、侧脑室及脊髓的室管膜、部分室管膜下区和海马齿状回等部位. 目前已明确，成年哺乳动物脑内的侧脑室脑室下区(svz)和海马结构的颗粒下区(SGz) 可产生大量的神经元[1].

    1.2生物学特性NSCs具有无限的增殖分裂能力，它的主要生物学特征包括：具有多向分化潜能，能分化成本系大部分类型的细胞即神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞；具有自我更新和自我维持的能力. NSCs通过两种细胞分裂方式，即不对称分裂和对称分裂. 不对称分裂时由于启动了某种细胞机制，使细胞质中调节分化的蛋白质不均匀地分配而分裂产生一个新的干细胞和一个祖细胞，通过这种分裂方式产生一系列分化程度不同的子代细胞，以满足神经细胞多样性的需求. 一次对称分裂产生两个干细胞或两个祖细胞. 祖细胞仅具有单向或双向分化能力或其干细胞特性只能维持较短的时间[2]. 在多数情况下，成体干细胞分化为与其组织来源一致的细胞，但是在某些情况下，成体干细胞的分化并不遵循该规律，表现出很强的跨系或跨胚层分化潜能. Galli等[3]将从人胚胎和成年小鼠分离的NSCs与骨骼肌的成肌细胞共培养，发现NSCs可分化为骨骼肌细胞,用胚胎和成年的NSCs以及体外克隆的NSCs移植给亚致死剂量照射的小鼠，结果证明NSCs可转化为造血细胞.

     2NSCs的培养和鉴定

    2.1NSCs的培养目前的NSCs多采用无血清细胞培养和细胞克隆技术分离. 培养液在使用合成培养基的基础上添加谷酰胺、胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和具有丝裂原作用的生长因子(如EGF, bFGF等). 待原代克隆形成后挑选单个克隆机械分离继续进行亚克隆培养，也可采用单细胞克隆分离. 干细胞在无血清培养液中生长时呈悬浮球形，不贴壁也不生长突起，改变培养液(有血清培养液)后贴壁分化为成熟神经细胞. 有研究表明，在琼脂糖抗贴壁培养瓶中培养神经干细胞有利于神经干细胞持续增殖并保持未分化状态 ......