双向电泳在大鼠脊髓蛋白质组分析中的应用 (pdf)

    “人类基因组计划”测定DNA序列工作的完成，宣告“后基因组时代”的开始。人体内蛋白质分子结构和功能异常是疾病发生和发展的主要原因。蛋白质科学与技术进步成为本世纪生命科学领域争夺最激烈的前沿。蛋白质组学被视为分子生物学的大规模筛选技术，目前双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术依然是大多数蛋白质组研究中分离复杂蛋白混合物的首选技术之一。所谓双向电泳，第一向根据蛋白质的等电点不同，分离蛋白质；第二向将等电点相同的蛋白质，根据分子量不同再次得到分离。与通常的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相比，能获得更多的信息。

     1 双向电泳中蛋白样品的制备是关键环节

    SD大鼠用2%的戊巴比妥钠进行腹腔麻醉，活体状态下取出脊髓，加入裂解液,用玻璃匀浆器研磨至无肉眼可见沉淀物为止。加RNA酶和DNA酶，静置15min,离心 ......