1564例尿液干化学检测全阴性标本镜检分析
[摘要] 目的分析本实验室AX-4280全自动尿分析仪(尿液干化学法)检测的全阴性结果的尿液标本，为评价尿液干化学法全自动尿分析仪在临床尿液检测中的应用提供参考。方法对我院门诊尿液常规检测中的1564例全阴性标本进行尿沉渣检查，结果分成肾内科及泌尿科门诊组(A组，n=204)和非肾内科及泌尿科门诊组(B组，n=1360)两组进行统计分析。结果全阴性结果中白细胞假阴性(真阳性)的标本占4.54%，红细胞假阴性(真阳性)的标本占3.58%。其中肾内科、泌尿科204例病人中白细胞占6.86%、红细胞占6.37%。A组内男性白细胞假阴性率为3.63%，与女性细胞假阴性率为9.57%，两组比较，差异有统计学意义，(χ 2 =3.89，P<0.05)。A组红细胞假阴性率与B组红细胞假阴性率，两组比较，差异有统计学意义(χ 2 =5.30，P<0.05)。结论在使用干化学法尿液全自动分析仪做尿常规出现全阴性结果时，为了不漏诊，不误诊，有条件的实验室应全部进行尿沉渣分析仪或显微镜检查。
[关键词]全自动尿液分析仪;尿液;假阴性;尿沉渣;显微镜
Microscopic study on1564patients'negative results of urine test with dry-chemistry method
YANG Xufeng，XU Kaisheng，ZHANG Zhengliang，et al.
The Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou310009，China
【Abstract】Objective To analyze the false-negative results of urine test(dry-chemistry method)with AX-4280urine automatic analysis instrument.To give reference for clinical application of this instrument in urine test.Method1564all negative results samples have been centrifuged and every urine sediment has been examined by microscope.The microscope results were divided into two groups and analyzed with statistics software.A group(n=204)was patients from nephros internal medicine and urology department，and B group(n=1360)was patients from none nephros internal medicine and urology department.Results Among the1564microscopic results，false-negative rate of urine WBC was4.54%and urine RBC was3.58%.In group A，false-negative rate of urine WBC was6.86%，urine RBC was6.37%.In group B，false-negative rate of urine WBCwas4.19%，urine RBCwas3.16%.The false-negative rate of urine RBC in group Awas significantly higher than in group B(χ 2 =5.30，P<0.05).Conclusion Once all negative results appear in urinary routine examinations with dry chemistry automatic analyzer，urinary sediment examination should be processed.In advanced laboratory，all urine samples should be performed microscopic examination or examinationwith urine sediment analyzer in order to avoid clinical misdiagnosis.
【Key words】urine automatic analyzer;urine;false-negative;urine sediment;microscope
对于干化学法尿液检测全阴性标本是否应该进行尿沉渣检查一直成为尿液检查争议的论点 [1] 。在应用全自动尿液分析仪时，虽然其具有简便、快速之特点，但在实际应用中仍然存在假阴性标本是否应该进一步做尿沉渣检查的问题。本检验科对AX- 4280全自动尿液分析仪测定全为阴性的1564例尿液标本作沉渣镜检，报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料采用2006年1月至2006年6月来浙江大学医学院附属第二医院检查科室检验尿常规的门诊患者送检的随机中段小便标本，经干化学法检测结果为全阴性的尿液标本1564例，其中男性887例，女性677例，将全阴性标本由专业熟练的检验师负责检验，在60min之内完毕检测。
1.2 仪器及试纸 AX-4280全自动尿液分析仪(由日本京都第一科学株式会社生产)及配套试纸条(Aution Sticks，由日本京都第一科学株式会社生产)，使用原装清洗液冲洗管道，质控品为两项本科室自制尿液质控，分别为甲液(批号:06022521)和乙液(批号:06022522)，每日第1、2号标本分别为甲液和乙液。检验信息系统室内质控图监控每日质控，均在受控范围内。
1.3检测方法 按照全国临床检验操作规程操作 [2] 及尿沉渣标准检测方法 [3] ，嘱病人留取新鲜中段随机小便约30ml，取10ml新鲜尿液在AX-4280全自动尿液分析仪上干化学检测，再在1500rpm/5min(相 对离心力400g)离心，弃去上清液，留取0.2ml沉渣混匀后取20ul充入尿沉渣定量分析板计数红细胞、白细胞、上皮细胞、管型，用“个/μL”报告。
将检测结果全阴性标本用尿沉渣定量分析板进行显微镜镜检计数。以门诊病人来源分成肾内科及泌尿外科门诊组和非肾内科及泌尿外科门诊两组，分别编号为A组和B组，计数结果超出参考范围者定为假阴性标本 [4] 。
1.4统计学方法 应用SPSS11.0统计软件统计数据，组内、组间的假阴性率的差异比较用 χ 2 检验，设P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1 1564例尿液试纸测定全阴性标本尿沉渣镜检结果见表1、表2
表2 两组白细胞、红细胞假阴性率比较(略)
由表1可见，A组内男性白细胞假阴性率与女性细胞假阴性率比较，差异有统计学意义(χ 2 =3.89，P<0.05在此1564例全阴性尿液检测结果中，尿沉渣检查未检到管型及结晶。
由表2可见，A组红细胞假阴性率与B组红细胞假阴性率比较，差异有统计学意义(χ 2 =5.30，P<0.05)。
3讨论
尿液干化学法分析出现白细胞假阴性的原因有:酸性尿液、高比重尿、尿蛋白、尿糖、胆红素等。尿液pH值及比重在干化学法全自动尿液分析仪中对白细胞的干扰及解决办法有待进一步研究。根据AX-4280全自动尿分析仪配套试纸条(Aution Sticks)说明该试纸条在尿葡萄糖>500mg/dl、白蛋白>300mg/dl时，检测白细胞的尿试条的脂酶反应减低或受抑制，使白细胞检测结果出现假阴性。此 外，由于该全自动分析仪试纸条只能测中性粒细胞中的脂酶，淋巴细胞和单核细胞的脂酶含量少，故以淋巴、单核细胞为主的疾病(如肾移植病人发生排斥反应)，会产生阴性结果或出现与临床不符的情况。此外，尿中含大剂量头孢霉素或庆大霉素等药物时，亦可使结果出现假阴性。高比重尿、高蛋白尿中因红细胞破坏少，其血红蛋白浓度低于试纸条检出限，也可引起隐血假阴性;其它还原性物质如大量的维生素C也干扰隐血测定出现假阴性。
本次研究的1564例AX-4280全自动尿分析仪检测的假阴性结果中，设白细胞以<12个/μl为参考范围，红细胞以<12个/μl为参考范围 [4] 。从两组白细胞、红细胞假阴性率比较可见，肾内科及泌尿外科门诊组和非肾内科及泌尿外科门诊组的红细胞假阴性率的差异有统计学意义(P<0.05)。在肾内科及泌尿外科门诊组，男性与女性白细胞假阴性率差异有统计学意义(P<0.05)。而非肾内科及泌尿外科门 诊组白细胞、红细胞假阴性率差异无统计学意义 (P>0.05)。与相关报道相似 [1，5] 。
表11564例尿液试纸测定全阴性标本尿沉渣镜检结果(略)
液检查较为争议的论点，有学者提出，尿白细胞、亚硝酸盐、尿蛋白、红细胞结果为阴性者，可以认为尿液中红细胞、白细胞、管型数量在参考值范围内，可不进行尿液沉渣显微镜检查 [1] 。通过本次研究发现，使用AX-4280全自动尿分析仪在临床尿液检测中，对于肾内科、泌尿外科门诊病人的尿液检测为全阴性结果的白细胞阳性率达到6.86%(14/204)，红细胞阳性率达到6.37%(13/204);另外，研究表明尿沉渣镜检仍然是对尿有形成仿检出最好的一种方法 [5] ，因此建议在使用不同型号的尿液全自动分析仪时，对于不同病种的病人(如:肾内科及泌尿外科病人)应根据实验室评价选择性进行尿沉渣镜检，以免漏检。
干化学法尿液分析仪除假阴性问题外，由于方法学干扰因素多，其假阳性问题也不可忽视。有研究发现，干化学法尿液分析仪红细胞、白细胞假阳性率分别达到23.1%和5.7% [7] ，因此在尿液检验工作中，应特别重视尿液沉渣显微镜检查的重要性。
随着全自动尿沉渣分析系统、尿沉渣流式沉渣分析仪、荧光染色流式细胞分析方法的诞生和应用，以显微镜为基础的形态学检验法和以流式细胞术为原理的流式细胞计数法已经成为尿有形成分定量法测定的两种主要方法 [6] ，尿液常规沉渣检测也将更 准确、更快捷，检验报告也将由简单数字变为直观的细胞学图像分析。但实验室应用这些新方法、新仪器时的质量控制和标准化操作仍需大量的实验评价和论证的。
参考文献
1丛玉隆，马骏龙，邓新立.尿液常规分析质量控制及临床应用研究体会[J].临床检验杂志，2001，l9(4):241-241.
2叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程[M].第2版，南京:东南出版社，1997.109.
3丛玉隆，马骏龙.当代尿液分析技术与临床[M].北京:中国科学技术出版社，1998.83-89.
4戚其学，陈燕，李迎旭.实用尿沉渣图谱[M].沈阳:沈阳出版社，2001.36-37.
5姜文玲，夏运成，许向青，等.尿液自动分析、尿沉渣及尿常规镜检对尿中有形成份的对比分析[J].中国现代医学杂志，2002，12(10):49-53.
6Lakatos J，Bodor T，Zidaries Z，et a1.Data processing of digital recording of microscopic examination of urinary sediment[J].Clin Chem Acta，2000，297(1-2):225-237.
7继林.尿液分析仪与沉渣镜检法对尿中红细胞和白细胞的对比分析[J].实用医技杂志，2006，13(9):1496-1497.
作者单位:310006浙江杭州，浙江大学医学院附属第二医院检验科
(本文编辑蔡华波), 百拇医药(杨旭峰 许凯声 张振良 黄洪 陈勤 薛聪)
[关键词]全自动尿液分析仪;尿液;假阴性;尿沉渣;显微镜
Microscopic study on1564patients'negative results of urine test with dry-chemistry method
YANG Xufeng，XU Kaisheng，ZHANG Zhengliang，et al.
The Second Affiliated Hospital of Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou310009，China
【Abstract】Objective To analyze the false-negative results of urine test(dry-chemistry method)with AX-4280urine automatic analysis instrument.To give reference for clinical application of this instrument in urine test.Method1564all negative results samples have been centrifuged and every urine sediment has been examined by microscope.The microscope results were divided into two groups and analyzed with statistics software.A group(n=204)was patients from nephros internal medicine and urology department，and B group(n=1360)was patients from none nephros internal medicine and urology department.Results Among the1564microscopic results，false-negative rate of urine WBC was4.54%and urine RBC was3.58%.In group A，false-negative rate of urine WBC was6.86%，urine RBC was6.37%.In group B，false-negative rate of urine WBCwas4.19%，urine RBCwas3.16%.The false-negative rate of urine RBC in group Awas significantly higher than in group B(χ 2 =5.30，P<0.05).Conclusion Once all negative results appear in urinary routine examinations with dry chemistry automatic analyzer，urinary sediment examination should be processed.In advanced laboratory，all urine samples should be performed microscopic examination or examinationwith urine sediment analyzer in order to avoid clinical misdiagnosis.
【Key words】urine automatic analyzer;urine;false-negative;urine sediment;microscope
对于干化学法尿液检测全阴性标本是否应该进行尿沉渣检查一直成为尿液检查争议的论点 [1] 。在应用全自动尿液分析仪时，虽然其具有简便、快速之特点，但在实际应用中仍然存在假阴性标本是否应该进一步做尿沉渣检查的问题。本检验科对AX- 4280全自动尿液分析仪测定全为阴性的1564例尿液标本作沉渣镜检，报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料采用2006年1月至2006年6月来浙江大学医学院附属第二医院检查科室检验尿常规的门诊患者送检的随机中段小便标本，经干化学法检测结果为全阴性的尿液标本1564例，其中男性887例，女性677例，将全阴性标本由专业熟练的检验师负责检验，在60min之内完毕检测。
1.2 仪器及试纸 AX-4280全自动尿液分析仪(由日本京都第一科学株式会社生产)及配套试纸条(Aution Sticks，由日本京都第一科学株式会社生产)，使用原装清洗液冲洗管道，质控品为两项本科室自制尿液质控，分别为甲液(批号:06022521)和乙液(批号:06022522)，每日第1、2号标本分别为甲液和乙液。检验信息系统室内质控图监控每日质控，均在受控范围内。
1.3检测方法 按照全国临床检验操作规程操作 [2] 及尿沉渣标准检测方法 [3] ，嘱病人留取新鲜中段随机小便约30ml，取10ml新鲜尿液在AX-4280全自动尿液分析仪上干化学检测，再在1500rpm/5min(相 对离心力400g)离心，弃去上清液，留取0.2ml沉渣混匀后取20ul充入尿沉渣定量分析板计数红细胞、白细胞、上皮细胞、管型，用“个/μL”报告。
将检测结果全阴性标本用尿沉渣定量分析板进行显微镜镜检计数。以门诊病人来源分成肾内科及泌尿外科门诊组和非肾内科及泌尿外科门诊两组，分别编号为A组和B组，计数结果超出参考范围者定为假阴性标本 [4] 。
1.4统计学方法 应用SPSS11.0统计软件统计数据，组内、组间的假阴性率的差异比较用 χ 2 检验，设P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1 1564例尿液试纸测定全阴性标本尿沉渣镜检结果见表1、表2
表2 两组白细胞、红细胞假阴性率比较(略)
由表1可见，A组内男性白细胞假阴性率与女性细胞假阴性率比较，差异有统计学意义(χ 2 =3.89，P<0.05在此1564例全阴性尿液检测结果中，尿沉渣检查未检到管型及结晶。
由表2可见，A组红细胞假阴性率与B组红细胞假阴性率比较，差异有统计学意义(χ 2 =5.30，P<0.05)。
3讨论
尿液干化学法分析出现白细胞假阴性的原因有:酸性尿液、高比重尿、尿蛋白、尿糖、胆红素等。尿液pH值及比重在干化学法全自动尿液分析仪中对白细胞的干扰及解决办法有待进一步研究。根据AX-4280全自动尿分析仪配套试纸条(Aution Sticks)说明该试纸条在尿葡萄糖>500mg/dl、白蛋白>300mg/dl时，检测白细胞的尿试条的脂酶反应减低或受抑制，使白细胞检测结果出现假阴性。此 外，由于该全自动分析仪试纸条只能测中性粒细胞中的脂酶，淋巴细胞和单核细胞的脂酶含量少，故以淋巴、单核细胞为主的疾病(如肾移植病人发生排斥反应)，会产生阴性结果或出现与临床不符的情况。此外，尿中含大剂量头孢霉素或庆大霉素等药物时，亦可使结果出现假阴性。高比重尿、高蛋白尿中因红细胞破坏少，其血红蛋白浓度低于试纸条检出限，也可引起隐血假阴性;其它还原性物质如大量的维生素C也干扰隐血测定出现假阴性。
本次研究的1564例AX-4280全自动尿分析仪检测的假阴性结果中，设白细胞以<12个/μl为参考范围，红细胞以<12个/μl为参考范围 [4] 。从两组白细胞、红细胞假阴性率比较可见，肾内科及泌尿外科门诊组和非肾内科及泌尿外科门诊组的红细胞假阴性率的差异有统计学意义(P<0.05)。在肾内科及泌尿外科门诊组，男性与女性白细胞假阴性率差异有统计学意义(P<0.05)。而非肾内科及泌尿外科门 诊组白细胞、红细胞假阴性率差异无统计学意义 (P>0.05)。与相关报道相似 [1，5] 。
表11564例尿液试纸测定全阴性标本尿沉渣镜检结果(略)
液检查较为争议的论点，有学者提出，尿白细胞、亚硝酸盐、尿蛋白、红细胞结果为阴性者，可以认为尿液中红细胞、白细胞、管型数量在参考值范围内，可不进行尿液沉渣显微镜检查 [1] 。通过本次研究发现，使用AX-4280全自动尿分析仪在临床尿液检测中，对于肾内科、泌尿外科门诊病人的尿液检测为全阴性结果的白细胞阳性率达到6.86%(14/204)，红细胞阳性率达到6.37%(13/204);另外，研究表明尿沉渣镜检仍然是对尿有形成仿检出最好的一种方法 [5] ，因此建议在使用不同型号的尿液全自动分析仪时，对于不同病种的病人(如:肾内科及泌尿外科病人)应根据实验室评价选择性进行尿沉渣镜检，以免漏检。
干化学法尿液分析仪除假阴性问题外，由于方法学干扰因素多，其假阳性问题也不可忽视。有研究发现，干化学法尿液分析仪红细胞、白细胞假阳性率分别达到23.1%和5.7% [7] ，因此在尿液检验工作中，应特别重视尿液沉渣显微镜检查的重要性。
随着全自动尿沉渣分析系统、尿沉渣流式沉渣分析仪、荧光染色流式细胞分析方法的诞生和应用，以显微镜为基础的形态学检验法和以流式细胞术为原理的流式细胞计数法已经成为尿有形成分定量法测定的两种主要方法 [6] ，尿液常规沉渣检测也将更 准确、更快捷，检验报告也将由简单数字变为直观的细胞学图像分析。但实验室应用这些新方法、新仪器时的质量控制和标准化操作仍需大量的实验评价和论证的。
参考文献
1丛玉隆，马骏龙，邓新立.尿液常规分析质量控制及临床应用研究体会[J].临床检验杂志，2001，l9(4):241-241.
2叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程[M].第2版，南京:东南出版社，1997.109.
3丛玉隆，马骏龙.当代尿液分析技术与临床[M].北京:中国科学技术出版社，1998.83-89.
4戚其学，陈燕，李迎旭.实用尿沉渣图谱[M].沈阳:沈阳出版社，2001.36-37.
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6Lakatos J，Bodor T，Zidaries Z，et a1.Data processing of digital recording of microscopic examination of urinary sediment[J].Clin Chem Acta，2000，297(1-2):225-237.
7继林.尿液分析仪与沉渣镜检法对尿中红细胞和白细胞的对比分析[J].实用医技杂志，2006，13(9):1496-1497.
作者单位:310006浙江杭州，浙江大学医学院附属第二医院检验科
(本文编辑蔡华波), 百拇医药(杨旭峰 许凯声 张振良 黄洪 陈勤 薛聪)