不同生化分析仪不同方法测定尿素氮葡萄糖的结果比较
[摘要] 目的：通过对同一检验项目在同一临床实验室内三台不同生化分析仪上的对比分析，探讨不同生化仪检测同一项目检测结果的可比性。方法：按照EP9A文件要求，实验中以Beckman Coulter Synchron LX20为对比仪器，以Bayer 1650，DADE RXL两台仪器为评价仪器，用患者新鲜血清对三台全自动生化分析仪上的尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)两项检验项目进行检测，计算相关系数、直线回归方程及预期偏差。结果：三台仪器检测定同一项目相关性良好，LX20与Bayer 1650之间GLU为正偏倚，BUN为负偏倚，在LX20与DADE RXL之间GLU和BUN均为负偏倚，GLU和BUN的偏倚均在可接受范围。结论：同一实验室中的不同仪器、不同测定方法测定同一检测项目时，要进行对比分析，以保证检验结果的准确、一致。
[关键词] BUN；GLU；比对；相关；偏差
21世纪的临床实验室已经装有了性能先进的分析仪器。同一实验室配备不同品牌、不同型号的生化分析仪也是目前大多数实验室的现状，因而同一测定项目在采用不同型号生化分析仪、不同厂家试剂、不同校准品和质控品的前提下，其测定结果的可比性显得愈发重要。美国CAP实验室认证条款中明确提出同一实验室不同分析仪的检测结果比对至少每半年进行一次，因此我们以美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)批准的《用患者样本进行方法学对比及偏差估计》的EP9A文件[1]，对朝阳医院检验科的Beckman Coulter Synchron LX20，Bayer 1650和DADE RXL三台全自动生化分析仪上的尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)的测定结果进行了对比分析。实验中以Beckman Coulter Synchron LX20为对比仪器，以Bayer 1650，DADE RXL两台仪器为评价仪器。
1 材料和方法
1.1 仪器
Beckman Coulter Synchron LX20全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)、Bayerl650全自动生化分析仪(德国拜尔公司)、DADE RXL全自动生化分析仪(美国德灵公司)。
1.2 试剂及标准品
德灵公司的标准品(批号：5AD092)，德灵公司的GLU(批号：EM6147)和BUN(批号：FB6158)试剂。贝克曼公司的标准品(批号：0602074)，贝克曼公司的GLU(批号：T505033)和BUN(批号：T504043)试剂。拜尔公司的标准品(批号：188047)，拜尔公司的GLU(批号：026331)和BUN(批号：038284)试剂。
1.3 患者样本
收集朝阳医院检验科当日的新鲜血清标本。标本在2 h内分离血清，分装成3份，每份500 μl分装在eppendor管中，在4 h内测定。
1.4 患者样本的测定及分析方法
在Beckman Coulter Synchron LX20上，测定GLU采用氧消耗速率法，BUN采用酶电导速率法。在Bayerl650上测定GLU为葡萄糖氧化酶法，BUN为尿素酶法；在DADERXL上测定GLU为葡萄糖氧化酶法，BUN为尿素酶法。在试剂校准有效期内，每天室内质控在控的前提下选择8份患者样本，每一项目都用三台全自动生化分析仪进行双份测定，测定时先对标本排序，先按顺序18测定第一次，再按顺序81测定第2次。至少连续测定5 d，共40份标本。以X表示在Beckman Coulter Synchron LX20上测定的结果，以Y表示在Bayer 1650上测定的结果，以Z表示在DADE RXL上测定的结果，记录测定结果(Xij、Yij、Zij)，计算每个样本两次测定结果的均值(Xi、Yi、Zi)，每个样本两次重复测定所得两个结果的差值的绝对值(DXi、DYi、DZi)，及在三台仪器上海个样本两次测定结果的均值之间的差值的绝对值(DXYi、DXZi)。以Yi对Xi、Zi对Xi作散点图。以(YiXi)对Xi、(ZiXi)对Xi作偏差图。目测离群点。检查批内离群点：计算样本重复测定值之间的差值绝对值DXi、DYi、DZi的平均数DX、DY、DZ，超出上述平均数4倍为无效，判断为批内离群点。检查批间离群点：计算在三台仪器上每个样本两次测定结果的均值之间差值的绝对值DXYi和DXZi的平均数DXY和DXZ，超出上述平均数4倍为无效，判断为批间离群点。
2 结果
2.1 患者标本检验结果处理
根据EP9A进行数据处理、计算[1]，在Beckman Coulter Synchron LX20上的允许范围4DX：GLU为0.56，BUN为0.48。在Bayer 1650上的允许范围4DY：GLU为0.68，BUN为0.8。在DADERXL上的允许范围4DZ：GLU为0.24，BUN为0.82。Beckman Coulter Synchron LX20与Bayerl650间的4DXY:GLU为1.12，BUN为1.4。Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL4DXZ：GLU为0.92，BUN为1.32。
2.2 判断离群点
经判断对于Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间GLU有一个批间离群点，Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL无离群点。对于Beckman CoulterSynchron LX20与Bayer 1650间BUN有一个既是批间又是批内离群点的离群点，Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间有一个批间离群点。均在EP9A的允许范围之内。
2.3 GLU Yi对Xi的均值散点图，见图1。
2.4 GLU(YiXi)对Xi的偏差图，见图2。
2.5 BUN Yi对Xi的均值散点图，见图3。
2.6 BUN(YiXi)对Xi的偏差图，见图4。
2.7 GLU Zi对Xi的均值散点图，见图5。
2.8 GLU(ZiXi)对Xi的偏差图，见图6。
2.9 BUN Zi对Xi的均值散点图，见图7。
2.10 BUN(ZiXi)对Xi的偏差图，见图8。
2.11 计算回归方程
Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间GLU的回归方程为Y=I.0151X0.173 6，r2=0.996 7，r=0.998 3。BUN的回归方程为Y=0.973 7X+0.079，r2=0.996 8，r=0.998 4。Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间GLU的回归方程为Y=0.973 8X0.006 4，r2=0.999 2，r=0.999 6。BUN的回归方程为Y=0.983 5X0.118 9，r2=0.998 7，r=0.999 3。
2.12 根据上述线性回归方程，对测定的结果进行预期偏倚估计，结果见表1，表2。表1 Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间测定GLU、BUN时结果的预期偏倚估计(略)表2 Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间测定GLU、BUN时结果的预期偏倚估计(略)
3 讨论
为了分析在Beckman Coulter Synchron LX20、Bayer 1650、DADE RXL上测定GLU、BUN是否在允许范围内得到相关性好的结果，我们依据NCCLS的标准化文件EP9A进行了比对试验及偏倚估计。通过在LX20、Bayer 1650、DADERXL上对40例随机血清标本的GLU、BUN进行测定，我们发现GLU、BUN在三台仪器上的线性关系良好，LX20与Bayer 1650上GLU和BUN的相关系数分别为r2=0.996 7和r2=0.996 8。LX20与DADERXL上GLU和BUN的相关系数分别为r2=0.999 2和r2=0.998 7。根据EP9A文件，判断能满足评价试验的要求。从表1、表2可以看出在LX20与Bayer 1650之间GLU为正偏倚，BUN为负偏倚，在LX20与DADERXL之间GLU和BUN均为负偏倚。按照美国CLIA’88的要求，GLU的偏倚为靶值±0.33mmol/L(6 mg/dL)或±10%(取大者)，BUN的偏倚为靶值±0.71 mmol/L尿素(2 mg/dL尿素)或±9%(取大者)，从而可以判定GLU和BUN的偏倚均在可接受范围内。经过对GLU和BUN的结果进行比对分析，我们发现在Beckman Coulter Synchron LX20、Bayer 1650、DADE RXL上进行测定时，这三台不同生化分析仪上这两项指标均具有很好的可比性。通过本次试验表明，用EP9A文件不仅可以对候选的检验方法进行评价，也可对同一实验室不同型号的仪器间同一检验项目进行对比分析，判断其预期偏差是否在可接受范围之内，从而保证患者样本检测结果的准确、稳定。所以当在同一实验室内具有不同品牌、不同型号的生化分析仪的情况时，用不同仪器、不同测定方法测定同一检测项目时，必须要进行对比分析，以保证检验结果的准确、一致。
参考文献：
[1]Nmional Committee for Laboratory Standards.Mefhod Comparison and bias estimation using patient samples；Approved Guideline Guideline[J].EP9A,Pennsylvania，1995，15(7)：12.
1.北京平谷区医院，北京 101200；
2.北京朝阳医院，北京 101200, 百拇医药(李德新，贾慧敏，王清涛)
[关键词] BUN；GLU；比对；相关；偏差
21世纪的临床实验室已经装有了性能先进的分析仪器。同一实验室配备不同品牌、不同型号的生化分析仪也是目前大多数实验室的现状，因而同一测定项目在采用不同型号生化分析仪、不同厂家试剂、不同校准品和质控品的前提下，其测定结果的可比性显得愈发重要。美国CAP实验室认证条款中明确提出同一实验室不同分析仪的检测结果比对至少每半年进行一次，因此我们以美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)批准的《用患者样本进行方法学对比及偏差估计》的EP9A文件[1]，对朝阳医院检验科的Beckman Coulter Synchron LX20，Bayer 1650和DADE RXL三台全自动生化分析仪上的尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)的测定结果进行了对比分析。实验中以Beckman Coulter Synchron LX20为对比仪器，以Bayer 1650，DADE RXL两台仪器为评价仪器。
1 材料和方法
1.1 仪器
Beckman Coulter Synchron LX20全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)、Bayerl650全自动生化分析仪(德国拜尔公司)、DADE RXL全自动生化分析仪(美国德灵公司)。
1.2 试剂及标准品
德灵公司的标准品(批号：5AD092)，德灵公司的GLU(批号：EM6147)和BUN(批号：FB6158)试剂。贝克曼公司的标准品(批号：0602074)，贝克曼公司的GLU(批号：T505033)和BUN(批号：T504043)试剂。拜尔公司的标准品(批号：188047)，拜尔公司的GLU(批号：026331)和BUN(批号：038284)试剂。
1.3 患者样本
收集朝阳医院检验科当日的新鲜血清标本。标本在2 h内分离血清，分装成3份，每份500 μl分装在eppendor管中，在4 h内测定。
1.4 患者样本的测定及分析方法
在Beckman Coulter Synchron LX20上，测定GLU采用氧消耗速率法，BUN采用酶电导速率法。在Bayerl650上测定GLU为葡萄糖氧化酶法，BUN为尿素酶法；在DADERXL上测定GLU为葡萄糖氧化酶法，BUN为尿素酶法。在试剂校准有效期内，每天室内质控在控的前提下选择8份患者样本，每一项目都用三台全自动生化分析仪进行双份测定，测定时先对标本排序，先按顺序18测定第一次，再按顺序81测定第2次。至少连续测定5 d，共40份标本。以X表示在Beckman Coulter Synchron LX20上测定的结果，以Y表示在Bayer 1650上测定的结果，以Z表示在DADE RXL上测定的结果，记录测定结果(Xij、Yij、Zij)，计算每个样本两次测定结果的均值(Xi、Yi、Zi)，每个样本两次重复测定所得两个结果的差值的绝对值(DXi、DYi、DZi)，及在三台仪器上海个样本两次测定结果的均值之间的差值的绝对值(DXYi、DXZi)。以Yi对Xi、Zi对Xi作散点图。以(YiXi)对Xi、(ZiXi)对Xi作偏差图。目测离群点。检查批内离群点：计算样本重复测定值之间的差值绝对值DXi、DYi、DZi的平均数DX、DY、DZ，超出上述平均数4倍为无效，判断为批内离群点。检查批间离群点：计算在三台仪器上每个样本两次测定结果的均值之间差值的绝对值DXYi和DXZi的平均数DXY和DXZ，超出上述平均数4倍为无效，判断为批间离群点。
2 结果
2.1 患者标本检验结果处理
根据EP9A进行数据处理、计算[1]，在Beckman Coulter Synchron LX20上的允许范围4DX：GLU为0.56，BUN为0.48。在Bayer 1650上的允许范围4DY：GLU为0.68，BUN为0.8。在DADERXL上的允许范围4DZ：GLU为0.24，BUN为0.82。Beckman Coulter Synchron LX20与Bayerl650间的4DXY:GLU为1.12，BUN为1.4。Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL4DXZ：GLU为0.92，BUN为1.32。
2.2 判断离群点
经判断对于Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间GLU有一个批间离群点，Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL无离群点。对于Beckman CoulterSynchron LX20与Bayer 1650间BUN有一个既是批间又是批内离群点的离群点，Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间有一个批间离群点。均在EP9A的允许范围之内。
2.3 GLU Yi对Xi的均值散点图，见图1。
2.4 GLU(YiXi)对Xi的偏差图，见图2。
2.5 BUN Yi对Xi的均值散点图，见图3。
2.6 BUN(YiXi)对Xi的偏差图，见图4。
2.7 GLU Zi对Xi的均值散点图，见图5。
2.8 GLU(ZiXi)对Xi的偏差图，见图6。
2.9 BUN Zi对Xi的均值散点图，见图7。
2.10 BUN(ZiXi)对Xi的偏差图，见图8。
2.11 计算回归方程
Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间GLU的回归方程为Y=I.0151X0.173 6，r2=0.996 7，r=0.998 3。BUN的回归方程为Y=0.973 7X+0.079，r2=0.996 8，r=0.998 4。Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间GLU的回归方程为Y=0.973 8X0.006 4，r2=0.999 2，r=0.999 6。BUN的回归方程为Y=0.983 5X0.118 9，r2=0.998 7，r=0.999 3。
2.12 根据上述线性回归方程，对测定的结果进行预期偏倚估计，结果见表1，表2。表1 Beckman Coulter Synchron LX20与Bayer 1650间测定GLU、BUN时结果的预期偏倚估计(略)表2 Beckman Coulter Synchron LX20与DADE RXL间测定GLU、BUN时结果的预期偏倚估计(略)
3 讨论
为了分析在Beckman Coulter Synchron LX20、Bayer 1650、DADE RXL上测定GLU、BUN是否在允许范围内得到相关性好的结果，我们依据NCCLS的标准化文件EP9A进行了比对试验及偏倚估计。通过在LX20、Bayer 1650、DADERXL上对40例随机血清标本的GLU、BUN进行测定，我们发现GLU、BUN在三台仪器上的线性关系良好，LX20与Bayer 1650上GLU和BUN的相关系数分别为r2=0.996 7和r2=0.996 8。LX20与DADERXL上GLU和BUN的相关系数分别为r2=0.999 2和r2=0.998 7。根据EP9A文件，判断能满足评价试验的要求。从表1、表2可以看出在LX20与Bayer 1650之间GLU为正偏倚，BUN为负偏倚，在LX20与DADERXL之间GLU和BUN均为负偏倚。按照美国CLIA’88的要求，GLU的偏倚为靶值±0.33mmol/L(6 mg/dL)或±10%(取大者)，BUN的偏倚为靶值±0.71 mmol/L尿素(2 mg/dL尿素)或±9%(取大者)，从而可以判定GLU和BUN的偏倚均在可接受范围内。经过对GLU和BUN的结果进行比对分析，我们发现在Beckman Coulter Synchron LX20、Bayer 1650、DADE RXL上进行测定时，这三台不同生化分析仪上这两项指标均具有很好的可比性。通过本次试验表明，用EP9A文件不仅可以对候选的检验方法进行评价，也可对同一实验室不同型号的仪器间同一检验项目进行对比分析，判断其预期偏差是否在可接受范围之内，从而保证患者样本检测结果的准确、稳定。所以当在同一实验室内具有不同品牌、不同型号的生化分析仪的情况时，用不同仪器、不同测定方法测定同一检测项目时，必须要进行对比分析，以保证检验结果的准确、一致。
参考文献：
[1]Nmional Committee for Laboratory Standards.Mefhod Comparison and bias estimation using patient samples；Approved Guideline Guideline[J].EP9A,Pennsylvania，1995，15(7)：12.
1.北京平谷区医院，北京 101200；
2.北京朝阳医院，北京 101200, 百拇医药(李德新，贾慧敏，王清涛)