P63标记角膜缘干细胞的可行性研究
P63蛋白；,角膜缘；,细胞移植；,干细胞；,免疫组织化学；,可行性研究,,P63蛋白；,角膜缘；,细胞移植；,干细胞；,免疫组织化学；,可行性研究,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献：
摘要: 目的 探讨p63蛋白(P63)作为角膜缘干细胞阳性标记物的可行性和意义，为研究和鉴定角膜缘干细胞存活、增殖和分化情况提供依据。 方法 取正常新西兰兔角膜全层标本5份(包括角膜缘和结膜)，同时取角膜缘干细胞移植后3个月上皮生长良好的角膜全层标本和角膜失代偿标本各5份。免疫组织化学SP三步法检测P63在不同组标本供体干细胞的表达情况。 结果 P63在角膜缘干细胞核内呈高表达，而短暂扩充细胞虽然也具备一定的增殖和分化能力，但是P63表达较少。角膜中央和结膜呈阴性表达。 结论 P63可以特异性地标记角膜缘干细胞，对角膜缘干细胞的研究和鉴定及其在眼表重建的应用具有一定的价值。关键词: P63蛋白； 角膜缘； 细胞移植； 干细胞； 免疫组织化学； 可行性研究
角膜缘干细胞被认为是具有极大的分裂潜力的永久细胞，但是一般情况下它的细胞周期比较长、分裂能力低下，只是在某些特殊情况下如外伤、肿瘤等作用和刺激下，其分裂和增殖能力才会明显增强，迁徙并修复缺损的角膜上皮。角膜缘干细胞的传统标记物是K3蛋白，特异性标记是阴性；但有学者指出，K3蛋白并不具有特异性，除了在角膜缘有表达外，在角膜上皮其余部分也都有表达[1]。笔者拟通过免疫组织化学SP三步法，检测p63蛋白(P63)在正常新西兰白兔及不同移植组角膜缘干细胞内的表达情况，探讨P63对角膜缘干细胞的鉴定意义。
1 材料与方法
11 动物和主要试剂 见文献[2]。
12 主要仪器 隔水式电热恒温培养箱(PYXDHS35X40S，上海跃进医疗仪器厂)；漂烘处理仪(ZYM6802，浙江常洲华利电子有限公司)；切片机(RM2245，德国Leica公司)；成像系统(BX41，日本Olympus公司)。
13 方法
131 分组及模型制备 15只健康、平均体质量2 kg的新西兰白兔(雌雄错配 ......
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