经静脉移植骨髓间质干细胞治疗脑梗死
间质干细胞移植;,脑梗死;,疾病模型,动物,,间质干细胞移植;,脑梗死;,疾病模型,动物,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献：
摘要: 目的 观察经静脉移植骨髓间质干细胞(MSC)治疗脑梗死时神经功能缺损的恢复情况,以及MSC在脑梗死灶的分布、迁移与分化情况。 方法 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞(rMSC)或磷酸缓冲液(PBS)植入脑梗死鼠体内,于不同时程对动物神经功能状况进行评分。应用荧光标记及免疫组织化学方法检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况，细胞化学染色观察rMSC体外分化情况。 结果 与PBS组相比,rMSC组大鼠神经功能改善明显(P<0.001),在显微镜下可见脑移植细胞在梗死区及其周边区聚集并存活,有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物,而在体外同时程培养的rMSC未见类似分化表达。 结论 rMSC经静脉移植后能够在宿主脑内存活、迁移并分化表达神经细胞表型,有促进脑梗死后神经功能恢复的作用。经静脉路移植可以避免脑组织损伤,同时植入的rMSC能更均匀分布并聚集在脑梗死灶。关键词: 间质干细胞移植; 脑梗死; 疾病模型,动物
研究发现，骨髓间质干细胞(MSC)在体内外特定条件的诱导下可以分化表达神经细胞标志物,MSC脑移植对急性缺血性神经损伤的功能恢复有一定治疗作用[13]。在脑梗死的干细胞移植治疗过程中,如何移植干细胞到需要的病灶部位而又不对神经组织造成机械损伤,这个问题在国内的类似研究中显得较为突出,如采用脑立体定向注射的方法,本身就对脑组织结构造成损伤,而且植入细胞的分布不均匀[46]。笔者从静脉路移植MSC,观察MSC在脑梗死灶的分布、迁移与分化情况。
1 材料与方法
1.1 材料 清洁级雄性SD大鼠,2~3月龄,体质量280~320 g[福建医科大学实验动物中心,实验动物质量许可证号:SGXK(闽)20040002]。αMEM培养液(minimum essential medium,Alpha Modified,美国Gibco公司);胎牛血清(FBS,美国Hyclone公司);FicollPaque淋巴细胞分离液(美国Pharmacia公司);0.25%胰蛋白酶(Trypsin 1∶250,美国Amersco公司);荧光染料(cell tracker orange,CTO,美国Invitrogen公司);小鼠抗大鼠巢蛋白(Nestin)多克隆抗体、小鼠抗大鼠神经丝蛋白(NF200)多克隆抗体及兔抗大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)多克隆抗体(武汉BOSTER公司);SABCFITC免疫组织化学试剂盒(武汉BOSTER公司),PV6001/2试剂盒(北京中山试剂公司) ......
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