摘要: 目的 观察高表达热休克蛋白70(HSP70)鼠脑胶质瘤细胞(C6细胞)瘤苗在体内的抗瘤效应。 方法 以SD大鼠为动物模型，采用热休克、β榄香烯、丝裂霉素单独或联合诱导制备不同高表达HSP70表达率的细胞瘤苗。各实验组注射不同HSP70蛋白表达率的瘤苗进行免疫，对照组注射1640培养液;C6细胞皮下注射，观察皮下胶质瘤成瘤率及成瘤大鼠的生存期，分析HSP70蛋白表达率与抗瘤效应间的关系。 结果 经C6细胞瘤苗免疫大鼠较对照组皮下胶质瘤成瘤率下降，成瘤大鼠平均生存期明显延长，平均生存期与瘤苗的HSP70表达率呈正相关，应用单克隆抗体封闭瘤苗的HSP70表达则此作用消失。 结论 应用高表达HSP70的C6细胞瘤苗明显延长载瘤大鼠生存期。瘤苗免疫大鼠的抗瘤作用是由HSP70介导的。

    关键词: 热休克蛋白质类，70;神经胶质瘤;热休克反应;细胞，培养的

    热休克蛋白(HSP)广泛存在于正常细胞和肿瘤细胞的细胞质、高尔基体、内质网、核及核仁中，起着多种分子伴侣的作用，参与多种细胞内蛋白的折叠、装配及转运，行使“看家”功能 [1-2] 。近年来发现，HSP70与肿瘤免疫有关。HSP70在的细胞内具有很强的多肽结合能力，通过结合某些肿瘤多肽，起到提呈肿瘤抗原的作用。这种HSP70多肽复合物能诱导机体产生特异性的抗肿瘤免疫，具有肿瘤疫苗作用 [3-7] ，因而具有开发应用价值，成为肿瘤疫苗研制的一个重要方向。为此，笔者通过诱导大鼠C6细胞膜上HSP70蛋白的高表达，并将其制备成细胞瘤苗，观察其抗瘤作用。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料 试剂:RPMI-1640(Gibicol公司)，小牛血清(Sino-Americanbio)，胰蛋白酶(Trypsin1∶250，Amresco)，MTT(上海生物工程技术有限公司)，榄香烯(β-elemene，大连金港制药有限公司产品)，丝裂霉素(日本东京Kyowa Hakko Kogyo Co.)，鼠HSP70单克隆抗体(Santa Cruz Bio-Tech)。动物:SD大鼠由福建医科大学动物中心提供;雌性，4～6周龄，体质量200g左右(180～220g)。细胞株:大鼠C6细胞株(中科院上海细胞库)。

    1.2 方法

    1.2.1 分组 72只大鼠随机分为9组，每组8只。

    A组:空白对照;B组:细胞直接灭活对照组;C组:丝裂霉素组;D组:热休克2h组;E组:榄香烯+丝裂霉素组;F组:榄香烯组;G组:热休克12h组;H组:榄香烯+热休克2h组;I组:榄香烯+热休克2h+抗体组 ......