致病性大肠杆菌有不同的血清型，这些不同的血清型在致病性上差异较大，如产毒性大肠杆菌常引发毒素性食物中毒，而O157可以引起严重的出血性结肠炎[1]。在临床诊断治疗和流行病调查中，要对致病性大肠杆菌菌株进行快速分离鉴定。常规分离培养及血清学鉴定往往需要3～5天的时间，延误疾病的治疗和疫情的控制。从生物学特性上进行亚种的鉴定往往比较困难，也很难追踪菌株的流行态势。从基因水平进行属种乃至亚种的鉴定不但可以快速鉴定病原菌的种属，还可以进一步追踪病原菌的亚种、血清型及遗传上的亲缘关系。建立在PCR基础上的RFLP和SSCP技术，就是通过扩增病原菌的特异性基因片段，然后通过酶切分析法、单链构象多态性分析进行属[2]的鉴定、甚至属内种的鉴定[3]。即使是同种细菌的不同亚种、血清型，由于其时间、地点来源的不同，在基因水平上会出现一定的变异，这些变异为追踪菌株的来源和进化关系提供了方便。SSCP技术甚至可以检测出基因片段中单个碱基的改变。本文旨在探讨选取GroEL基因片段，运用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术，进行大肠杆菌不同血清型别的鉴定，以期为临床快速鉴别诊断及流行病学调查提供方法依据。

    1 材料和方法

    1.1 菌株的来源 标准菌株选取6株5种不同血清型大肠杆菌。另选取葡萄球菌属种的金黄色葡萄球菌1株作为研究中的对照菌株。以上所有菌株均为本室保存的标准菌株。将菌株复苏后接种于相应的增菌培养基培养24h后转种至相应的选择培养基养24～36h ......