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编号:11446877
黑色素生物合成抑制剂产生菌95-F 23 -2代谢产物A组分的获得
http://www.100md.com 《福建医科大学学报》 2005年第3期
黑色素,放线菌目;提取法;色谱法,高效液相,,黑色素,放线菌目;提取法;色谱法,高效液相,黑色素生物合成抑制剂产生菌95-F23-2代谢产物A组分的获得,关键词:黑色素,放线菌目;提取法;色谱法,高效液相,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献:
     摘要: 目的 从黑色素生物合成抑制剂产生菌95-F 23 -2的代谢产物中获得活性组分。 方法 采用二级发酵方法进行产生菌发酵,产生菌代谢产物采用大孔树脂CAD-40提取,用硅胶干柱层析方法分离粗提物,用制备性薄层层析方法和半制备性高效液相色谱方法进行纯化。 结果 产生菌的代谢产物对光敏感,易失活,对酸、碱、热均不稳定,其粗提物含有十几个组分,经分离纯化,得到其中一个活性组分———A组分,A组分紫外吸收峰为232,320nm,相对分子质量840。 结论 产生菌代谢产物的活性A组分具有对黑色素的抑制作用。

    关键词: 黑色素,放线菌目;提取法;色谱法,高效液相

    随着人们生活水平的提高,雀斑、痣及炎症后皮肤色变或妊娠黑斑等黑色素沉着疾病已引起重视,筛选黑色素生物合成抑制剂以防治黑色素沉着疾病显得越来越有必要。据报道,国外从1970年代末开始从微生物的代谢产物中寻找黑色素生物合成抑制剂,1980-1990年代有学者从链霉菌属中分离到一些黑色素生物合成抑制剂产生菌,并得到几种低分子量的黑色素生物合成抑制剂 [1-5] 。本研究室在研究微生物来源的黑色素生物合成抑制剂中,从土壤中筛选到一株放线菌95-F 23 -2,其代谢产物对黑色素有抑制作用。本文主要研究放线菌95-F23-2的发酵条件,代谢产物的提取、分离和纯化的方法及结果。

    1 材料与方法

    1.1 材料 黑色素生物合成抑制剂产生菌———放线菌95-F 23 -2(来源于福建土壤);旋转蒸发器(ZFQ85A,上海医械专机厂);自动部分收集器(BSZ-100,上海沪西仪器厂);高效液相色谱仪(SYSTEM GOLD,美国Beckman公司),半制备柱(ULTRASPHERE ODS5μm,10mm×250mm,美国Beckman公司);旋转真空浓缩仪(CHRIST RVC2-18,德国Bmh公司);高效液相色谱仪(LC-10ADVP,日本岛津公司),分析柱(Kromasil ODS5μm,4.6mm×250mm,中科院大连化学物理研究所);液质联用仪(1100LC/MSD,美国Agilent公司);色谱纯甲醇和乙腈(德国Merck公司);色谱用水为超纯水(本实验室制备)。

    1.2 方法

    1.2.1 发酵

    1.2.1.1 斜面培养 放线菌95-F 23 -2斜面培养基为马铃薯浸汁-葡萄糖培养基(马铃薯浸汁100mL,1%葡萄糖,2%琼脂,pH7.2~7.4)。马铃薯浸汁制备:取去皮土豆20~25g,切小块 ......

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