摘要: 目的 了解骨髓基质细胞(MSC)在体外对抗氧化剂和生长因子等的反应及其脑内移植后的情况。 方法 体外培养成年大鼠MSC，用β-巯基乙醇、BDNF、GDNF、CNTF、forskolin诱导分化，并将MSC植入成鼠大脑皮质，观察MSC在体内外环境中是否能够分化为神经细胞。采用流式细胞术鉴定MSC，免疫荧光染色法鉴定神经细胞。 结果 在本实验条件下，MSC未见被诱导成神经细胞，植入脑内的MSC能够存活并迁移，但也未见分化为神经细胞。 结论 MSC横向分化为神经细胞可能是多因素作用的结果，需要更多的实验对其横向分化和定向分化进行探索。

    关键词: 骨髓基质细胞，诱导分化;神经细胞;移植

    骨髓中除了造血干细胞外，还含有干细胞样的非造血组织前体细胞，又称为骨髓基质细胞(MSC)。MSC被认为是具有多潜能的干细胞，在特定的实验条件下可分化为成骨、软骨、肌肉、肌腱、脂肪细胞以及其他间充质细胞 [1-2] 。近年来，一些国内外研究者纷纷报道，MSC具有发育为神经系统细胞如神经元和神经胶质细胞的潜能 [3-4] ，似能利用它来治疗某些中枢神经系统(CNS)损伤和疾病。用细胞移植的方法修复CNS损伤是一个充满活力的研究领域，例如可采用神经干细胞、分化的胚胎干细胞、Schwann细胞、室管膜细胞等进行，但由于MSC容易获取、在体外易于扩增、可来源于患者自身，使其成为CNS细胞移植疗法最令人关注的细胞之一。虽然，目前关于MSC的研究结果相当鼓舞人心，但也有不少研究者对MSC诱导分化成神经细胞有不同的意见，甚至质疑，干细胞之间的横向分化仍然存在很大的争议。因此，是否能够、以及如何将MSC诱导定向分化为所需的神经元或神经胶质细胞，已成为目前该领域研究的热点。

     1 材料与方法

    1.1 材料 250～300g雄性SD大鼠，由福建医科大学动物中心提供。胎牛血清购自美国Hyclone公司，α-MEM、Ficoll、β-巯基乙醇、Forskolin和谷胺酰胺均购自美国Sigma公司，细胞表面抗体CD 11b 、CD 34 、CD 45 、CD 90 、CD 44 、CD 71 为美国Sterotec公司产品。抗MAP2抗体、抗GFAP抗体和荧光标记的二抗均为美国Chemicon公司产品。抗β-tubulinⅢ抗体购自美国Covance公司。神经营养因子BDNF、GDNF、CNTF、NGF和PDGF均购自美国Invitro-gen公司。BrdU和抗BrdU抗体购自武汉博士德生物工程有限公司。

    1.2 方法 ......