大黄对非胰岛素依赖型糖尿病大鼠胰岛素受体的作用
作者：刘永玉 毛良 莫启忠 方军 陈坤华
单位：(苏州医学院生化教研室，215007)刘永玉；(上海中医学院)毛良 莫启忠 方军 陈坤华
关键词：
中华医学杂志910623
我们在小剂量链脲霉素与高热量饲料诱发的非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠中，观察了胰岛素抗性与胰岛素受体作用的关系，并观察了中药大黄及通瘀灵丸对此的影响。
一、材料和方法
1、材料：体重约250g Wistar雌性大鼠，经尾静脉注入25mg/kg链脲霉素(STZ，美国Sigma公司产品)，喂以高热量饲料(20.083J/g)造成NIDDM大鼠模型[1]。动物随机分为正常对照组、NIDDM大黄治疗组(ROB组)及通瘀灵丸治疗(TYL组)，实验进行12周。实验第8周开始ROB组喂以 7.5%大黄(购自上海药材公司)高热量饲料，TYL组喂7.5%通瘀灵丸(主要成分为大黄、水蛭，由上海龙华医院提供)高热量饲料。
, 百拇医药
2、分析方法：葡萄糖及胆固醇用酶法测定。载脂蛋白(apoB)用免疫火箭电泳法，胰岛素及cAMP用双抗体放射免疫分析。胰岛素受体结合力用放射配基法，根据文献[2]方法加以修改。采用EDTA抗凝，淋巴细胞分离液分离红细胞，显微镜计数并调成105/ml的红细胞悬液，加入过量的125I-胰岛素孵育，聚乙二醇(MW*12000)分离后测定与红细胞受体结合的125I-胰岛素放射强度，以特异性结合的cpm/105红细胞表示胰岛素受体最大结合力(IRMB)。
二、结果
1、葡萄糖耐量试验结果，见表1。
2、体重、甘油三酯(TG)、胆固醇(Ch)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Ch)、高密度脂蛋白胆固醇/胆固醇比值(HDL-Ch/Ch)及apoB结果，见表2。
, 百拇医药
3、血胰岛素及胰岛素受体结合力，见表3。
表1 各组葡萄糖耐量试验的比较(mmol/L，
) 组 别
例数
血 糖
0
30
60
120(min)
正常对照组
11
5.06±0.51
, 百拇医药
12.87±2.78
8.84±2.05
6.33±0.72
NIDDM
13
5.92±1.09*
15.07±2.19*
14.58±1.94△
14.04±3.11△
ROB
12
, 百拇医药 5.79±0.81
18.11±1.77
16.76±2.84
10.25±2.32△
TYL
12
6.00±1.44
16.87±2.06
14.81±4.10
9.88±2.79△
注：NIDDM组与正常对照组比较，ROB组及TYL组与NIDDM组比较，* P<0.05，△ P<0.001表2 各组血清TG、Ch、LDL-Ch、HDL-Ch/Ch及apoB的比较() 组别
, 百拇医药
例数
体重(g)
TG mmol/L
Ch mmol/L
LDL-Ch mmol/L
HDL-Ch/Ch
apoB(cm)
正常对照
9
268±14
0.58±0.10
1.64±0.19
, 百拇医药
0.47±0.13
0.56±0.06
14.8±0.8
NIDDM
11
301±21*
2.15±0.66*
2.82±0.44*
0.84±0.17*
0.35±0.07*
22.7±2.0*
ROB
, 百拇医药
10
242±18*
0.79±0.21*
1.72±0.31*
0.60±0.16*
0.45±0.11*
16.9±0.53*
TYL
10
268±29*
0.84±0.19*
1.82±0.49*
, http://www.100md.com
0.60±0.13*
0.46±0.08*
17.4±0.7*
* P<0.001表3 各组血清胰岛素、红细胞胰岛素受体最大结合力(IRMB)，cAMP比较() 组别
例数
胰岛素(mU/L)
IRMB(cmp/10红细胞)
cAMP(fmol/104红细胞)
正常对照
, 百拇医药
9
16±4
1004±174
2.18±0.08
NIDDM
11
25±8*
694±150*
1.63±0.21*
ROB
10
14±5*
1150±304*
, http://www.100md.com
2.11±0.32*
TYL
10
16±4*
821±285
1.73±0.33
* P<0.001
三、讨论
胰岛素抗性是NIDDM患者普遍存在的现象[3～5]。在实验中观察到小剂量链脲霉素与高热量饲料诱发的NIDDM大鼠血胰岛素是对照线的160%，并有明显的肥胖、糖耐量减低，高TG、Ch及apoB。表明NIDD岩石鼠具有明显的胰岛素抗性。还观察到NIDDM大鼠红细胞胰岛素受体最大结合力降低，红细胞中cAMP水平下降。NIDDM大鼠cAMP下降与以往的结论一致，但与胰岛素受体结合力降低相悖。提示影响cAMP降解的磷酸二酯酶等在NIDDM中并没有缺损。NIDDM胰岛素受体后的缺失可能仍主要是酷氨酸激酶活力降低[5]。高胰岛素血症所致的下降调节使胰岛素受体数目减少，对NIDDM大鼠胰岛素抗性的产生也有一定作用。
, 百拇医药
大黄通过提高胰岛素受体结合力，改善了糖、脂代谢障碍及高胰岛素血症，而通瘀灵丸中仍主要是大黄在起作用。这不仅说明受体结合力降低及其信息传导障碍是胰岛素抗性的基础，而且表明大黄是在受体水平治疗NIDDM，是预防糖尿病动脉粥样硬化的理想药物。
参考文献
1 刘永玉等，实验性NIDDM大鼠模型，中华内分泌代谢杂志 1990；6：115。
2 王德利等，人红细胞胰岛素受体放射配体测定法，中华医学检验杂志 1987；10：148。
3 Swislocki AL, et al. Can insulin resistance exist as a primary defect in noninsulin-dependent diabetes mellitus? J Clin Endocrino! Metab 1987;64:778.
4 Kolterman OG, et al. Receptor and postreceptor defects contribute to the insulin resistance in non-insulin-depedent diabetes mellitus J Clin Invest 1981;68:957.
5 Freidenberg GR, et al. Decreased kinase activity of insulin receptors from adipocytes of noninsulin-dependent diabetic subjects J Clin Invest 1987;79:240., http://www.100md.com
单位：(苏州医学院生化教研室，215007)刘永玉；(上海中医学院)毛良 莫启忠 方军 陈坤华
关键词：
中华医学杂志910623
我们在小剂量链脲霉素与高热量饲料诱发的非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠中，观察了胰岛素抗性与胰岛素受体作用的关系，并观察了中药大黄及通瘀灵丸对此的影响。
一、材料和方法
1、材料：体重约250g Wistar雌性大鼠，经尾静脉注入25mg/kg链脲霉素(STZ，美国Sigma公司产品)，喂以高热量饲料(20.083J/g)造成NIDDM大鼠模型[1]。动物随机分为正常对照组、NIDDM大黄治疗组(ROB组)及通瘀灵丸治疗(TYL组)，实验进行12周。实验第8周开始ROB组喂以 7.5%大黄(购自上海药材公司)高热量饲料，TYL组喂7.5%通瘀灵丸(主要成分为大黄、水蛭，由上海龙华医院提供)高热量饲料。
, 百拇医药
2、分析方法：葡萄糖及胆固醇用酶法测定。载脂蛋白(apoB)用免疫火箭电泳法，胰岛素及cAMP用双抗体放射免疫分析。胰岛素受体结合力用放射配基法，根据文献[2]方法加以修改。采用EDTA抗凝，淋巴细胞分离液分离红细胞，显微镜计数并调成105/ml的红细胞悬液，加入过量的125I-胰岛素孵育，聚乙二醇(MW*12000)分离后测定与红细胞受体结合的125I-胰岛素放射强度，以特异性结合的cpm/105红细胞表示胰岛素受体最大结合力(IRMB)。
二、结果
1、葡萄糖耐量试验结果，见表1。
2、体重、甘油三酯(TG)、胆固醇(Ch)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Ch)、高密度脂蛋白胆固醇/胆固醇比值(HDL-Ch/Ch)及apoB结果，见表2。
, 百拇医药
3、血胰岛素及胰岛素受体结合力，见表3。
表1 各组葡萄糖耐量试验的比较(mmol/L，
) 组 别例数
血 糖
0
30
60
120(min)
正常对照组
11
5.06±0.51
, 百拇医药
12.87±2.78
8.84±2.05
6.33±0.72
NIDDM
13
5.92±1.09*
15.07±2.19*
14.58±1.94△
14.04±3.11△
ROB
12
, 百拇医药 5.79±0.81
18.11±1.77
16.76±2.84
10.25±2.32△
TYL
12
6.00±1.44
16.87±2.06
14.81±4.10
9.88±2.79△
注：NIDDM组与正常对照组比较，ROB组及TYL组与NIDDM组比较，* P<0.05，△ P<0.001表2 各组血清TG、Ch、LDL-Ch、HDL-Ch/Ch及apoB的比较(
) 组别, 百拇医药
例数
体重(g)
TG mmol/L
Ch mmol/L
LDL-Ch mmol/L
HDL-Ch/Ch
apoB(cm)
正常对照
9
268±14
0.58±0.10
1.64±0.19
, 百拇医药
0.47±0.13
0.56±0.06
14.8±0.8
NIDDM
11
301±21*
2.15±0.66*
2.82±0.44*
0.84±0.17*
0.35±0.07*
22.7±2.0*
ROB
, 百拇医药
10
242±18*
0.79±0.21*
1.72±0.31*
0.60±0.16*
0.45±0.11*
16.9±0.53*
TYL
10
268±29*
0.84±0.19*
1.82±0.49*
, http://www.100md.com
0.60±0.13*
0.46±0.08*
17.4±0.7*
* P<0.001表3 各组血清胰岛素、红细胞胰岛素受体最大结合力(IRMB)，cAMP比较(
) 组别例数
胰岛素(mU/L)
IRMB(cmp/10红细胞)
cAMP(fmol/104红细胞)
正常对照
, 百拇医药
9
16±4
1004±174
2.18±0.08
NIDDM
11
25±8*
694±150*
1.63±0.21*
ROB
10
14±5*
1150±304*
, http://www.100md.com
2.11±0.32*
TYL
10
16±4*
821±285
1.73±0.33
* P<0.001
三、讨论
胰岛素抗性是NIDDM患者普遍存在的现象[3～5]。在实验中观察到小剂量链脲霉素与高热量饲料诱发的NIDDM大鼠血胰岛素是对照线的160%，并有明显的肥胖、糖耐量减低，高TG、Ch及apoB。表明NIDD岩石鼠具有明显的胰岛素抗性。还观察到NIDDM大鼠红细胞胰岛素受体最大结合力降低，红细胞中cAMP水平下降。NIDDM大鼠cAMP下降与以往的结论一致，但与胰岛素受体结合力降低相悖。提示影响cAMP降解的磷酸二酯酶等在NIDDM中并没有缺损。NIDDM胰岛素受体后的缺失可能仍主要是酷氨酸激酶活力降低[5]。高胰岛素血症所致的下降调节使胰岛素受体数目减少，对NIDDM大鼠胰岛素抗性的产生也有一定作用。
, 百拇医药
大黄通过提高胰岛素受体结合力，改善了糖、脂代谢障碍及高胰岛素血症，而通瘀灵丸中仍主要是大黄在起作用。这不仅说明受体结合力降低及其信息传导障碍是胰岛素抗性的基础，而且表明大黄是在受体水平治疗NIDDM，是预防糖尿病动脉粥样硬化的理想药物。
参考文献
1 刘永玉等，实验性NIDDM大鼠模型，中华内分泌代谢杂志 1990；6：115。
2 王德利等，人红细胞胰岛素受体放射配体测定法，中华医学检验杂志 1987；10：148。
3 Swislocki AL, et al. Can insulin resistance exist as a primary defect in noninsulin-dependent diabetes mellitus? J Clin Endocrino! Metab 1987;64:778.
4 Kolterman OG, et al. Receptor and postreceptor defects contribute to the insulin resistance in non-insulin-depedent diabetes mellitus J Clin Invest 1981;68:957.
5 Freidenberg GR, et al. Decreased kinase activity of insulin receptors from adipocytes of noninsulin-dependent diabetic subjects J Clin Invest 1987;79:240., http://www.100md.com