颅内肿瘤线粒体超氧化物歧化酶的测定
作者：郭彦 白云 浦佩玉 单书宝 李庆彬
单位：(天津市神经病学研究所，300052)郭彦 白云 浦佩玉 单书宝；(天津市环湖医院)李庆彬
关键词：
中华医学杂志920424
超氧化物歧化酶(SOD)是体内重要的抗氧化酶，已知肿瘤组织内SOD尤其是Mn-SOD(锰SOD)含量降低或缺失。鉴于Mn-SOD主要存在于线粒体，为进一步准确地反映Mn-SOD的变化，我们测定了脑瘤组织线粒体SOD水平。
一、材料与方法
1、材料来源：(1)正常脑组织10份，均为开颅减压手术中取出的远离肿瘤的正常灰白质混合成分。(2)脑瘤组织28份。由病理组织学检查确诊。包括脑膜瘤8份；胶质瘤20份，其中星形细胞瘤I、II级13份；星形细胞瘤III、IV级6份，髓母细胞瘤1份。(3)胎脑组织5份，来自水囊引产，胎龄20～24周的胎儿，出生后2小时内取其顶叶组织。(4)恶性胶质瘤体外细胞系3系，由我院神经肿瘤研究室提供。包括恶性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤各1系，均系长期传代单层培养细胞，已经特征鉴定。
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2、方法：(1)线粒体制备见参考文献[1]。(2)SOD含量测定见参考文献[2]。(3)蛋白测定采用Lowry法。(4)线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)的组化鉴定参照文献[3]。(5)电镜观察线粒体提纯情况。
二、结果
1、线粒体提纯结果：(1)光镜下可见沉淀部分为大量蓝紫色微小颗粒，表明所提纯的线粒体结构完整且有良好的酶活性。(2)电镜下可见布满双嵴的大小不等的线粒体，超声粉碎后绝大部分线粒体粉碎。
2、SOD测定结果：脑瘤组织线粒体Mn-SOD均显著低于正常脑(P<0.001)，CuZn-SOD差异无显著性。正常脑、良性及恶性脑瘤线粒体Mn-SOD含量依次递减(P<0.001)，胎脑线粒体Mn-SOD较正常明显低，其值介于良性及恶性脑瘤之间，且与恶性脑瘤差异有显著性(P<0.001)，各型之间CuZn-SOD差异均无显著性(P>0.05)。按不同病理类型分析，脑膜瘤、胶质瘤线粒体Mn-SOD均显著低于正常脑组织(P<0.001)；脑膜瘤，良性胶质瘤、恶性胶质瘤之间Mn-SOD差异无显著性(P>0.05)，但恶性胶质瘤Mn-SOD较脑膜瘤及良性胶质瘤明显低(P<0.05)，而脑膜瘤及良性胶质瘤之间CuZn-SOD差异无显著性(P>0.05)，恶性胶质瘤与体外细胞系线粒体的CuZn-SOD及Mn-SOD差异均不显著(P>0.05)。各型脑瘤均无Mn-SOD缺失(附表)
, 百拇医药
附表 不同组织SOD活性比较(μg/mg，
) 组 织
例数
总SOD
CuZn-SOD
Mn-SOD
正常脑
10
2.09±0.45
0.85±0.34
1.24±0.37
胎脑
, 百拇医药
5
1.59±0.07
1.09±0.05
0.50±0.04
脑肿瘤
28
1.18±0.34
0.72±0.31
0.49±0.19
脑膜瘤
8
1.48±0.15
, 百拇医药
0.92±0.23
0.56±0.17
良性胶质瘤
13
1.07±0.30
0.57±0.28
0.53±0.19
恶性胶质瘤
7
1.07±0.38
0.68±0.32
0.35±0.12
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恶性胶质瘤体外细胞系
3
0.79±0.08
0.45±0.08
0.34±0.02
三、讨论
本组实验表明，脑瘤组织线粒体CuZn-SOD变化不著而Mn-SOD含量明显降低，且与肿瘤分化程度有关，肿瘤分化程度越低Mn-SOD含量也越低，但未发现缺失，Oberley等[4，5]认为Mn-SOD的降低或缺失是肿瘤组织特有的性状，且在临床上也发现Mn-SOD含量低者如Down's综合征及Dubin-Johnson-Spring综合征患者易患肿瘤。至于Mn-SOD的变化是致癌的原因还是癌变造成的结果，目前尚无定论。根据本实验结果我们认为，至少Mn-SOD的降低是转化细胞的可靠生化指标之一，并可作用评估脑瘤分化程度的参考。
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参考文献
1 Lichtor T, Dohrmann GJ, Oxidative metabolism and glycolysis in benign brain tumor J Neurosurg 1987:67:336.
2 白云等，颅内肿瘤组织超氧化物歧化酶的观察，中华医学会第二届神经外科学术会议资料汇编，北京：中华医学会，1990：54。
3 杜卓民，实用细胞学技术，北京：人民卫生出版社，1982：322。
4 Oberley L W, Buettner GR, Role of superoxide dismutase in cancer: a review Cancer Res 1979;39:1141.
5 Oberley L W. Superoxide dismutase activity of normal murine liver，regeneration liver, and Hθ hepatoma. J Natl Cancer Inst 1979;61:375., 百拇医药
单位：(天津市神经病学研究所，300052)郭彦 白云 浦佩玉 单书宝；(天津市环湖医院)李庆彬
关键词：
中华医学杂志920424
超氧化物歧化酶(SOD)是体内重要的抗氧化酶，已知肿瘤组织内SOD尤其是Mn-SOD(锰SOD)含量降低或缺失。鉴于Mn-SOD主要存在于线粒体，为进一步准确地反映Mn-SOD的变化，我们测定了脑瘤组织线粒体SOD水平。
一、材料与方法
1、材料来源：(1)正常脑组织10份，均为开颅减压手术中取出的远离肿瘤的正常灰白质混合成分。(2)脑瘤组织28份。由病理组织学检查确诊。包括脑膜瘤8份；胶质瘤20份，其中星形细胞瘤I、II级13份；星形细胞瘤III、IV级6份，髓母细胞瘤1份。(3)胎脑组织5份，来自水囊引产，胎龄20～24周的胎儿，出生后2小时内取其顶叶组织。(4)恶性胶质瘤体外细胞系3系，由我院神经肿瘤研究室提供。包括恶性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤各1系，均系长期传代单层培养细胞，已经特征鉴定。
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2、方法：(1)线粒体制备见参考文献[1]。(2)SOD含量测定见参考文献[2]。(3)蛋白测定采用Lowry法。(4)线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)的组化鉴定参照文献[3]。(5)电镜观察线粒体提纯情况。
二、结果
1、线粒体提纯结果：(1)光镜下可见沉淀部分为大量蓝紫色微小颗粒，表明所提纯的线粒体结构完整且有良好的酶活性。(2)电镜下可见布满双嵴的大小不等的线粒体，超声粉碎后绝大部分线粒体粉碎。
2、SOD测定结果：脑瘤组织线粒体Mn-SOD均显著低于正常脑(P<0.001)，CuZn-SOD差异无显著性。正常脑、良性及恶性脑瘤线粒体Mn-SOD含量依次递减(P<0.001)，胎脑线粒体Mn-SOD较正常明显低，其值介于良性及恶性脑瘤之间，且与恶性脑瘤差异有显著性(P<0.001)，各型之间CuZn-SOD差异均无显著性(P>0.05)。按不同病理类型分析，脑膜瘤、胶质瘤线粒体Mn-SOD均显著低于正常脑组织(P<0.001)；脑膜瘤，良性胶质瘤、恶性胶质瘤之间Mn-SOD差异无显著性(P>0.05)，但恶性胶质瘤Mn-SOD较脑膜瘤及良性胶质瘤明显低(P<0.05)，而脑膜瘤及良性胶质瘤之间CuZn-SOD差异无显著性(P>0.05)，恶性胶质瘤与体外细胞系线粒体的CuZn-SOD及Mn-SOD差异均不显著(P>0.05)。各型脑瘤均无Mn-SOD缺失(附表)
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附表 不同组织SOD活性比较(μg/mg，
) 组 织例数
总SOD
CuZn-SOD
Mn-SOD
正常脑
10
2.09±0.45
0.85±0.34
1.24±0.37
胎脑
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5
1.59±0.07
1.09±0.05
0.50±0.04
脑肿瘤
28
1.18±0.34
0.72±0.31
0.49±0.19
脑膜瘤
8
1.48±0.15
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0.92±0.23
0.56±0.17
良性胶质瘤
13
1.07±0.30
0.57±0.28
0.53±0.19
恶性胶质瘤
7
1.07±0.38
0.68±0.32
0.35±0.12
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恶性胶质瘤体外细胞系
3
0.79±0.08
0.45±0.08
0.34±0.02
三、讨论
本组实验表明，脑瘤组织线粒体CuZn-SOD变化不著而Mn-SOD含量明显降低，且与肿瘤分化程度有关，肿瘤分化程度越低Mn-SOD含量也越低，但未发现缺失，Oberley等[4，5]认为Mn-SOD的降低或缺失是肿瘤组织特有的性状，且在临床上也发现Mn-SOD含量低者如Down's综合征及Dubin-Johnson-Spring综合征患者易患肿瘤。至于Mn-SOD的变化是致癌的原因还是癌变造成的结果，目前尚无定论。根据本实验结果我们认为，至少Mn-SOD的降低是转化细胞的可靠生化指标之一，并可作用评估脑瘤分化程度的参考。
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参考文献
1 Lichtor T, Dohrmann GJ, Oxidative metabolism and glycolysis in benign brain tumor J Neurosurg 1987:67:336.
2 白云等，颅内肿瘤组织超氧化物歧化酶的观察，中华医学会第二届神经外科学术会议资料汇编，北京：中华医学会，1990：54。
3 杜卓民，实用细胞学技术，北京：人民卫生出版社，1982：322。
4 Oberley L W, Buettner GR, Role of superoxide dismutase in cancer: a review Cancer Res 1979;39:1141.
5 Oberley L W. Superoxide dismutase activity of normal murine liver，regeneration liver, and Hθ hepatoma. J Natl Cancer Inst 1979;61:375., 百拇医药