金属蛋白酶抑制剂Batimastat对肝癌生长和侵袭转移的抑制作用
作者：卜 文 汤钊猷 孙舫宪 薛 琼 陈 军 高冬梅
单位：200032 上海医科大学中山医院肝癌研究所
关键词：
中华医学杂志970919 Batimastat(BB-94)是新近研制的一种人工合成的基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂，其化学结构类似于MMPs胶原底物酶切位点附近的三个氨基酸的基本结构，因此，对MMPs起到竞争抑制作用。BB-94已被证实可对多种肿瘤的生长和侵袭转移有抑制作用[1～5]。我们通过本所建立的原位移植的转移性人肝癌裸鼠模型LCI-D20，就BB-94对肝细胞癌(HCC)生长和侵袭转移的影响进行研究，为HCC治疗寻找新的途径。
一、材料和方法
1.Batimastat(BB-94)：BB-94由英国生物技术药品公司提供。
, http://www.100md.com
2.原位移植的转移性人肝癌裸鼠模型LCI-D20：LCI-D20为上海医科大学肝癌研究所用原位移植方法建立的裸鼠人肝癌高转移模型[6]。
3.用药方法：参照Wang等[2]方法，每日30 mg/kg体重腹腔注射。
4.统计方法：两组间均数比较用t检验，两组间率的比较用Fisher's精确检验。
二、结果
1.BB-94对LCI-D20肿瘤生长的影响：接种30天后，治疗组与对照组接种部位肿瘤重量分别为2.27±1.17 g和3.13±0.84 g，两组间差异有显著意义(t=2.137，P<0.05)。
2.BB-94对 LCI-D20局部侵袭的影响：接种30天后，治疗组与对照组邻近肿瘤接种 部位的腹壁遭肿瘤侵袭性生长的发生率分别为22%(2/9)和80%(8/10)，两组差异有显著意义(χ2=2.137，P<0.05)。
, 百拇医药
3.BB-94对LCI-D20肝内和肺转移的影响：模型接种30天后处死，解剖观察整个肝表面是否出现肉眼可见的转移结节，治疗组与对照组出现率分别为33%(3/9)和80%(8/10)，治疗组低于对照组，P=0.055。每只动物完整的肺包埋于同一石蜡块中，随机切一张进行HE染色，显微镜下观察是否有转移灶形成，治疗组与对照组肺转移灶出现率分别为44%(4/9)和100%(10/10)，两组间差异有显著意义(χ2=7.540，P<0.05)。
4.BB-94对LCI-D20生存期的影响：治疗组生存期长于对照组(分别为61±11天和52±13天)，但两组差异无显著意义(P=0.151)。然而，于接种45天刚停止用药时，治疗组与对照组生存率分别为100%和56%，两组间差异有显著意义(χ2=7.540，P<0.05)。45天以后因停止用药，两组间生存率差异有所减少。
5.BB-94对LCI-D20体重、切口愈合等的影响：BB-94治疗组动物未见明显消瘦，治疗组与对照组切口均在接种后4天左右基本愈合，未见明显差异。整个实验过程中也未见治疗组动物有明显异常。
, 百拇医药
三、讨论
肿瘤生长时必须破坏周围正常组织来为其生长提供空间，肿瘤生长到一定大小后又必须有肿瘤血管形成来为其提供营养，而肿瘤细胞对周围正常组织的破坏以及肿瘤血管形成过程中内皮细胞的移行均需要基质金属蛋白酶的参与，因此，基质金属蛋白酶抑制剂可以间接地抑制肿瘤生长。
肿瘤侵袭过程中需基质金属蛋白酶对细胞外基质进行酶解。肿瘤细胞在转移过程中要先 后经过进出毛细血管两个过程，在这两个过程中，肿瘤细胞必须穿过内皮细胞基底膜，而这一过程又必须依赖MMPs对基底膜成分的酶解，因此，对MMPs的抑制将产生对肿瘤细胞侵袭转移的抑制。
BB-94对LCI-D20模型生存期的延长与BB-94对肿瘤生长、侵袭和转移抑制的综合效应有关，这进一步说明BB-94有潜在的治疗HCC的价值。
志谢：本研究课题所用BB-94由英国生物技术药品公司(British Biotech Pharmaceuticals Limited)提供，并得到该公司Peter D. Brown, Alan Drummond和Pam McHale博士的友好合作，谨致谢意。
, 百拇医药
本课题为上海市医学领先学科基金及美国纽约中华医学基金会基金资助项目
参考文献
1 Kohn EC and Liotta LA. Molecular insights into cancer invasion: strategies for prevention and intervention. Cancer Res, 1995,55：1856.
2 Wang X, Fu X, Brown PD, et al. Matrix metalloproteinase inhibitor BB-94 (Batimastat) inhibits Human colon tumor growth and spread in a patient-like orthotopic model in nude mice. Cancer Res, 1994,54：4726.
, 百拇医药
3 Watson SA, Morris TM, Robinson G, et al. Inhibition of organ invasion by the matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat (BB-94) in two human colon carcinoma metastasis models. Cancer Res, 1995,55：3629.
4 Sledge GW, Qulali M, Goulet R, et al. Effect of matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat on breast cancer regrowth and metastasis in athymic mice. J Nat Cancer Ins, 1995,87：1546.
5 Eccles SA, Box GM, Court WJ, et al. Control of lymphatic and hematogenous metastasis of a rat mammary carcinoma by the matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat (BB-94). Cancer Res, 1996,56：2815.
6 Sun FS, Tang ZY, Liu KD, et al. Establishment of a metastatic model of human hepatocellular carcinoma in nude mice via orthotopic implantation of histologically intact tissues. Int J Cancer, 1996,66：239.
(收稿：1996-11-13 修回：1997-06-11), 百拇医药
单位：200032 上海医科大学中山医院肝癌研究所
关键词：
中华医学杂志970919 Batimastat(BB-94)是新近研制的一种人工合成的基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂，其化学结构类似于MMPs胶原底物酶切位点附近的三个氨基酸的基本结构，因此，对MMPs起到竞争抑制作用。BB-94已被证实可对多种肿瘤的生长和侵袭转移有抑制作用[1～5]。我们通过本所建立的原位移植的转移性人肝癌裸鼠模型LCI-D20，就BB-94对肝细胞癌(HCC)生长和侵袭转移的影响进行研究，为HCC治疗寻找新的途径。
一、材料和方法
1.Batimastat(BB-94)：BB-94由英国生物技术药品公司提供。
, http://www.100md.com
2.原位移植的转移性人肝癌裸鼠模型LCI-D20：LCI-D20为上海医科大学肝癌研究所用原位移植方法建立的裸鼠人肝癌高转移模型[6]。
3.用药方法：参照Wang等[2]方法，每日30 mg/kg体重腹腔注射。
4.统计方法：两组间均数比较用t检验，两组间率的比较用Fisher's精确检验。
二、结果
1.BB-94对LCI-D20肿瘤生长的影响：接种30天后，治疗组与对照组接种部位肿瘤重量分别为2.27±1.17 g和3.13±0.84 g，两组间差异有显著意义(t=2.137，P<0.05)。
2.BB-94对 LCI-D20局部侵袭的影响：接种30天后，治疗组与对照组邻近肿瘤接种 部位的腹壁遭肿瘤侵袭性生长的发生率分别为22%(2/9)和80%(8/10)，两组差异有显著意义(χ2=2.137，P<0.05)。
, 百拇医药
3.BB-94对LCI-D20肝内和肺转移的影响：模型接种30天后处死，解剖观察整个肝表面是否出现肉眼可见的转移结节，治疗组与对照组出现率分别为33%(3/9)和80%(8/10)，治疗组低于对照组，P=0.055。每只动物完整的肺包埋于同一石蜡块中，随机切一张进行HE染色，显微镜下观察是否有转移灶形成，治疗组与对照组肺转移灶出现率分别为44%(4/9)和100%(10/10)，两组间差异有显著意义(χ2=7.540，P<0.05)。
4.BB-94对LCI-D20生存期的影响：治疗组生存期长于对照组(分别为61±11天和52±13天)，但两组差异无显著意义(P=0.151)。然而，于接种45天刚停止用药时，治疗组与对照组生存率分别为100%和56%，两组间差异有显著意义(χ2=7.540，P<0.05)。45天以后因停止用药，两组间生存率差异有所减少。
5.BB-94对LCI-D20体重、切口愈合等的影响：BB-94治疗组动物未见明显消瘦，治疗组与对照组切口均在接种后4天左右基本愈合，未见明显差异。整个实验过程中也未见治疗组动物有明显异常。
, 百拇医药
三、讨论
肿瘤生长时必须破坏周围正常组织来为其生长提供空间，肿瘤生长到一定大小后又必须有肿瘤血管形成来为其提供营养，而肿瘤细胞对周围正常组织的破坏以及肿瘤血管形成过程中内皮细胞的移行均需要基质金属蛋白酶的参与，因此，基质金属蛋白酶抑制剂可以间接地抑制肿瘤生长。
肿瘤侵袭过程中需基质金属蛋白酶对细胞外基质进行酶解。肿瘤细胞在转移过程中要先 后经过进出毛细血管两个过程，在这两个过程中，肿瘤细胞必须穿过内皮细胞基底膜，而这一过程又必须依赖MMPs对基底膜成分的酶解，因此，对MMPs的抑制将产生对肿瘤细胞侵袭转移的抑制。
BB-94对LCI-D20模型生存期的延长与BB-94对肿瘤生长、侵袭和转移抑制的综合效应有关，这进一步说明BB-94有潜在的治疗HCC的价值。
志谢：本研究课题所用BB-94由英国生物技术药品公司(British Biotech Pharmaceuticals Limited)提供，并得到该公司Peter D. Brown, Alan Drummond和Pam McHale博士的友好合作，谨致谢意。
, 百拇医药
本课题为上海市医学领先学科基金及美国纽约中华医学基金会基金资助项目
参考文献
1 Kohn EC and Liotta LA. Molecular insights into cancer invasion: strategies for prevention and intervention. Cancer Res, 1995,55：1856.
2 Wang X, Fu X, Brown PD, et al. Matrix metalloproteinase inhibitor BB-94 (Batimastat) inhibits Human colon tumor growth and spread in a patient-like orthotopic model in nude mice. Cancer Res, 1994,54：4726.
, 百拇医药
3 Watson SA, Morris TM, Robinson G, et al. Inhibition of organ invasion by the matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat (BB-94) in two human colon carcinoma metastasis models. Cancer Res, 1995,55：3629.
4 Sledge GW, Qulali M, Goulet R, et al. Effect of matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat on breast cancer regrowth and metastasis in athymic mice. J Nat Cancer Ins, 1995,87：1546.
5 Eccles SA, Box GM, Court WJ, et al. Control of lymphatic and hematogenous metastasis of a rat mammary carcinoma by the matrix metalloproteinase inhibitor Batimastat (BB-94). Cancer Res, 1996,56：2815.
6 Sun FS, Tang ZY, Liu KD, et al. Establishment of a metastatic model of human hepatocellular carcinoma in nude mice via orthotopic implantation of histologically intact tissues. Int J Cancer, 1996,66：239.
(收稿：1996-11-13 修回：1997-06-11), 百拇医药