间断连续切片检测胃癌淋巴结转移
作者：刘丽江 彭开勤 张应天
单位：430016 武汉市职工医学院病理学教研室(刘丽江)；武汉市职工医学院附属医院(彭开勤、张应天)
关键词：
中华医学杂志/980229 附表 胃癌淋巴结转移3种模式的比较 转移模式
例数
≥6SHES
IHS
u值
P值
例数
%
, http://www.100md.com
例数
%
边窦转移
144
123
22.8
21
23.6
0.16
>0.05
散在窦内转移
121
54
, 百拇医药
10.0
67
75.3
14.50
<0.01
转移灶>1/3*
363
362
67.2
1
1.1
11.67
<0.01
, http://www.100md.com
* 即淋巴结切面区域1/3以上
近30年来，对胃癌淋巴结转移(LNM)，要求在定量检查淋巴结的基础上，明确转移率、转移度及转移淋巴结的解剖部位。我们对所作的胃癌根治手术病例，每例平均剔得70枚淋巴结[1]，用间断连续切片≥6张，HE染色(≥6SHES)与细胞角蛋白免疫 组织化学染色(CK-IHS)确定LNM并进行比较，以选择既能较真实地反映LNM，又能提高判断准确性和降低阅片量的方法。
一、对象与方法
1.对象：收集我院外科1988～1996年胃癌根治性手术切除有完整淋巴结检查资料的标本35例，其中早期胃癌6例，进展期胃癌29例。35例肿瘤原发灶细胞角蛋白(cytokeratin 18)均为强阳性或阳性表达。
2.方法：共剔得区域淋巴结2 691个，平均每例77个。直径≤5mm淋巴结2 240个(83.3%)。其中506个淋巴结因直径为1mm左右经间断连续切片≥6张后，所剩无几弃去，共有1 783个淋巴结进行CK-IHS，其中包括≥6SHES检查无转移淋巴结1 644个和随机抽出有转移淋巴结137个。细胞角蛋白免疫组织化学染色：一抗CK18为美国Sigma公司产品，稀释度1：500。采用SABC法，试剂均由武汉博士德生物工程公司提供。细胞浆内及细胞膜上有棕色颗粒沉着判为阳性。
, 百拇医药
4.统计学处理：采用u检验及t检验。
二、结果
1.≥6张切片HE染色：(1) 共检出淋巴结2 691个，平均77±27个。早期胃癌6例，无1例转移。进展期胃癌29例，其中24例有LNM(82.8%)。共检查出539个LN有转移，总转移度20.0%。本组有淋巴结转移者个例最小转移度2.9%(2/70)，最大转移度88.1%(52/59)。(2) LNM的特点：癌细胞成片占据LN切面区域1/3以上者占67.2%。微转移(转移灶<0.5 mm或转移癌细胞数<50个)占6.7%(36/539)。
2.免疫组织化学染色(IHS)：(1) IHS共检查1 783个LN。有癌转移LN226个，其中≥6SHES LNM1 37个，CK-IHS皆阳性，单独被IHS检出LNM89个，HE染色漏检率5.4%。(2) LNM特点：有转移LN，直径≤5 mm占71.9%(64个)。属LN微转移占68.5%(61/89)，最小转移灶0.1 mm，最大转移灶1.9 mm，平均0.5±0.5 mm。(3) IHS发现跳跃转移2例，早期、进展期胃癌各1例。
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3.≥6SHES和IHS的比较：(1) 检出率：CK-IHS为12.7%，≥6SHES为7.9%，前者具有更高的LNM检出率(μ=4.95，P<0.01)。(2) IHS对于散在分布于淋巴窦内的少数转移癌细胞和小的转移灶的检出均明显优于≥6SHES(P<0.01，附表)。
4.原发灶大小、组织类型、癌肿浸润深度与IHS检出LNM个数之间无明显相关性(P>0.05)。
三、讨论
1.LNM的检测：近年来，多数文献报告，胃癌预后因素中最重要的是局部淋巴结转移程度和其解剖部位，与之并列的是原发灶的浸润深度。准确判定LNM程度、解剖部位及数量，其结果直接影响胃癌TNM分期，关系到推测生存期，是选择辅助治疗和辅加治疗方案的客观依据，也是判断手术规范的主要客观质控指标。(2) 我们对胃癌根治性切除标本的淋巴结检查已达平均76.9个/例，超过日本Soga的“金标准”，其中进展期胃癌的转移率为82.8%，高于日本(66.4%)。在此基础上确定的转移度，最低为0，最高为88.1%，差距幅度巨大。(3) 对每一个LN而言，确定LNM取决于检查方法。已证实单张切片HE染色判断LNM是造成漏检的最重要原因。在乳癌及结直肠癌LNM中均得到证明，日本在早期胃癌的研究中也已证实。我们对胃癌区域淋巴结采用间断连续切片≥6张HE染色的方法鉴定LNM，可获得较为准确的LNM数据，目前国内此方面的文献尚少有报告。
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2.淋巴结微转移(LNMM)灶的检测：LNMM在乳癌及结直肠癌中已证明有确定的预后价值[2]，目前关于胃癌LNMM较为细致的报道尚少，Meahara等[3]对一组早期胃癌的研究，证实LNMM的临床预后价值和HE染色漏检的问题。我们采用CK-IHS，从≥6SHES检查无LNM的1 644个LN中查出89个(5.4%)LNM，其中LNMM占68.5%；35例中LNMM2例(5.7%)皆属跳跃转移，无疑将会修改原有分期。另外，鉴于胃癌淋巴结微转移定义尚无统一意见，我们认为胃癌LNMM应符合以下2条标准：(1) 间断连续切片6张HE染色未发现癌转移而CK-IHS有散在微小转移；(2) CK-IHS多张切片检查有散在微小转移或转移灶<0.5 mm或转移癌细胞数<50个。
本课题为武汉市医学科学研究发展基金资助项目参考文献
1刘丽江，张应天.胃癌淋巴结转移的临床病理研究，中华实验外科杂志，1995，12：91-92.
, http://www.100md.com
2Ruffin W K, Stacey-Clear A, Younger J, et al. Rational for routine axillary dissection in carcinoma of the breast. J Am Coll Sury, 1995, 180：245-251.
3Meahara Y, Osbiro T, Endo K, et al. Clinical significance of occult micrometastasis lymph nodes from patients with early gastric cancer who died of recurrence. Surgery, 1996, 119：397-402. (收稿：1997-02-26 修回：1997-10-15), http://www.100md.com
单位：430016 武汉市职工医学院病理学教研室(刘丽江)；武汉市职工医学院附属医院(彭开勤、张应天)
关键词：
中华医学杂志/980229 附表 胃癌淋巴结转移3种模式的比较 转移模式
例数
≥6SHES
IHS
u值
P值
例数
%
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例数
%
边窦转移
144
123
22.8
21
23.6
0.16
>0.05
散在窦内转移
121
54
, 百拇医药
10.0
67
75.3
14.50
<0.01
转移灶>1/3*
363
362
67.2
1
1.1
11.67
<0.01
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* 即淋巴结切面区域1/3以上
近30年来，对胃癌淋巴结转移(LNM)，要求在定量检查淋巴结的基础上，明确转移率、转移度及转移淋巴结的解剖部位。我们对所作的胃癌根治手术病例，每例平均剔得70枚淋巴结[1]，用间断连续切片≥6张，HE染色(≥6SHES)与细胞角蛋白免疫 组织化学染色(CK-IHS)确定LNM并进行比较，以选择既能较真实地反映LNM，又能提高判断准确性和降低阅片量的方法。
一、对象与方法
1.对象：收集我院外科1988～1996年胃癌根治性手术切除有完整淋巴结检查资料的标本35例，其中早期胃癌6例，进展期胃癌29例。35例肿瘤原发灶细胞角蛋白(cytokeratin 18)均为强阳性或阳性表达。
2.方法：共剔得区域淋巴结2 691个，平均每例77个。直径≤5mm淋巴结2 240个(83.3%)。其中506个淋巴结因直径为1mm左右经间断连续切片≥6张后，所剩无几弃去，共有1 783个淋巴结进行CK-IHS，其中包括≥6SHES检查无转移淋巴结1 644个和随机抽出有转移淋巴结137个。细胞角蛋白免疫组织化学染色：一抗CK18为美国Sigma公司产品，稀释度1：500。采用SABC法，试剂均由武汉博士德生物工程公司提供。细胞浆内及细胞膜上有棕色颗粒沉着判为阳性。
, 百拇医药
4.统计学处理：采用u检验及t检验。
二、结果
1.≥6张切片HE染色：(1) 共检出淋巴结2 691个，平均77±27个。早期胃癌6例，无1例转移。进展期胃癌29例，其中24例有LNM(82.8%)。共检查出539个LN有转移，总转移度20.0%。本组有淋巴结转移者个例最小转移度2.9%(2/70)，最大转移度88.1%(52/59)。(2) LNM的特点：癌细胞成片占据LN切面区域1/3以上者占67.2%。微转移(转移灶<0.5 mm或转移癌细胞数<50个)占6.7%(36/539)。
2.免疫组织化学染色(IHS)：(1) IHS共检查1 783个LN。有癌转移LN226个，其中≥6SHES LNM1 37个，CK-IHS皆阳性，单独被IHS检出LNM89个，HE染色漏检率5.4%。(2) LNM特点：有转移LN，直径≤5 mm占71.9%(64个)。属LN微转移占68.5%(61/89)，最小转移灶0.1 mm，最大转移灶1.9 mm，平均0.5±0.5 mm。(3) IHS发现跳跃转移2例，早期、进展期胃癌各1例。
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3.≥6SHES和IHS的比较：(1) 检出率：CK-IHS为12.7%，≥6SHES为7.9%，前者具有更高的LNM检出率(μ=4.95，P<0.01)。(2) IHS对于散在分布于淋巴窦内的少数转移癌细胞和小的转移灶的检出均明显优于≥6SHES(P<0.01，附表)。
4.原发灶大小、组织类型、癌肿浸润深度与IHS检出LNM个数之间无明显相关性(P>0.05)。
三、讨论
1.LNM的检测：近年来，多数文献报告，胃癌预后因素中最重要的是局部淋巴结转移程度和其解剖部位，与之并列的是原发灶的浸润深度。准确判定LNM程度、解剖部位及数量，其结果直接影响胃癌TNM分期，关系到推测生存期，是选择辅助治疗和辅加治疗方案的客观依据，也是判断手术规范的主要客观质控指标。(2) 我们对胃癌根治性切除标本的淋巴结检查已达平均76.9个/例，超过日本Soga的“金标准”，其中进展期胃癌的转移率为82.8%，高于日本(66.4%)。在此基础上确定的转移度，最低为0，最高为88.1%，差距幅度巨大。(3) 对每一个LN而言，确定LNM取决于检查方法。已证实单张切片HE染色判断LNM是造成漏检的最重要原因。在乳癌及结直肠癌LNM中均得到证明，日本在早期胃癌的研究中也已证实。我们对胃癌区域淋巴结采用间断连续切片≥6张HE染色的方法鉴定LNM，可获得较为准确的LNM数据，目前国内此方面的文献尚少有报告。
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2.淋巴结微转移(LNMM)灶的检测：LNMM在乳癌及结直肠癌中已证明有确定的预后价值[2]，目前关于胃癌LNMM较为细致的报道尚少，Meahara等[3]对一组早期胃癌的研究，证实LNMM的临床预后价值和HE染色漏检的问题。我们采用CK-IHS，从≥6SHES检查无LNM的1 644个LN中查出89个(5.4%)LNM，其中LNMM占68.5%；35例中LNMM2例(5.7%)皆属跳跃转移，无疑将会修改原有分期。另外，鉴于胃癌淋巴结微转移定义尚无统一意见，我们认为胃癌LNMM应符合以下2条标准：(1) 间断连续切片6张HE染色未发现癌转移而CK-IHS有散在微小转移；(2) CK-IHS多张切片检查有散在微小转移或转移灶<0.5 mm或转移癌细胞数<50个。
本课题为武汉市医学科学研究发展基金资助项目参考文献
1刘丽江，张应天.胃癌淋巴结转移的临床病理研究，中华实验外科杂志，1995，12：91-92.
, http://www.100md.com
2Ruffin W K, Stacey-Clear A, Younger J, et al. Rational for routine axillary dissection in carcinoma of the breast. J Am Coll Sury, 1995, 180：245-251.
3Meahara Y, Osbiro T, Endo K, et al. Clinical significance of occult micrometastasis lymph nodes from patients with early gastric cancer who died of recurrence. Surgery, 1996, 119：397-402. (收稿：1997-02-26 修回：1997-10-15), http://www.100md.com