微量尿一氧化氮检测诊断急性坏死性胰腺炎早期肠道细菌移位
作者：吴承堂 黎沾良 熊德鑫
单位：100037 北京，中国人民解放军第三○四医院创伤中心[吴承堂(现在广州第一军医大学南方医院普外科，510515)、黎沾良、熊德鑫]
关键词：
中华医学杂志980326 尿中一氧化氮(NO)水平的增高可作为细菌移位的诊断指标[1]，但有关急性坏死性胰腺炎(ANP)时血、尿NO水平变化及其与细菌移位的关系，极少报道。作者现将初步观察结果报道如下。
一、材料与方法
1.模型制作：杂种犬15只，体重15±2kg，雌雄不限。将犬随机分为：对照组(7只)和ANP组(8只)。对照组仅用手触及胰腺，ANP组以7.8kpa恒定压力经主胰管注入5%牛磺胆酸钠(0.5ml/kg)和胰蛋白酶(3 000U/kg)，复制ANP模型。
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2.检测指标：术后1，2，4，7天分别收集血、尿标本，取血浆0.5ml和尿10μl，参照Cortas等[2]法检测血、尿NO含量。术后每天抽血2ml作细菌培养。第七天活杀动物后，无菌剪取肝、胰、脾、肺、肾及肠系膜淋巴结，匀浆后作细菌培养，需氧菌37℃培养24小时，厌氧菌37℃厌氧箱中培养48小时后计数。取胰腺及回肠组织作光镜观察。数据作t检验，结果以
±s表示。
二、结果
1.病理观察:光镜下ANP组胰腺呈片状出血、坏死，证实为坏死性胰腺炎。回肠可见明显的粘膜出血、水肿，上皮变性，绒毛部分脱落。对照组胰腺及肠粘膜未见明显异常。
2.血浆、尿NO水平：ANP组血、尿NO明显高于对照组(P<0.05、P<0.01)，术后第1天即达到峰值，以后逐渐下降(附表)；ANP组各天尿中NO水平高于相应血浆水平，两者呈显著正相关(y=168.06±12.26x，r=0.9971，P<0.01)。
, 百拇医药
附表 血浆和尿中NO水平变化(nmol/ml，±s) 组别
犬数
术后时间(天)
1
2
4
7
对照组
7
血浆
39± 8
36± 6
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40± 6
34± 7
尿
383± 80
415± 77
390± 54
366± 75
ANP组
8
血浆
106± 30**
82± 17**
, 百拇医药
58± 8*
40± 5
尿
1491±232**
1131±183**
866±122**
681±148*
与对照组比较*P<0.05，**P<0.01 3.细菌移位:脏器细菌培养，胰腺炎犬全部发生细菌移位，肝和胰为7/8、脾4/8、肺和肾6/8及肠系膜淋巴结8/8；血培养全部阳性，发病后第1、2天分别为6/8和5/8。对照组只有两只犬在肠系膜淋巴结培养出细菌，其他脏器和血培养均为阴性。
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三、讨论
本研究发现ANP发病后24小时，血浆和尿中NO水平达到峰值，到术后第七天仍维持较高水平。同时血和脏器都发现有细菌易位。提示NO作为一种生物信息分子，参与ANP的病理过程。ANP时血、尿中NO含量的增加，可能是由于产生的内毒素和各种细胞因子通过刺激巨噬细胞等，使胞内iNOS的转录和翻译水平增加，从而诱生大量NO所致。NO一方面通过舒血管效应，可使组织血流增加；另一方面能改变微血管的通透性，减少白细胞渗出，并通过抑制白细胞聚集，阻止溶酶体酶从中性粒细胞释放，减轻白细胞对组织的损伤。使用NO合成酶抑制剂阻断NO的产生，可使内毒素(LPS)诱导的胃肠粘膜损伤加重[3]，这可能对宿主的防御功能是有益的。但ANP后，由于高水平和长时间iNOS的诱导生成，使毒性氧生成增加，更加损伤组织，降低机体免疫力，促进细菌移位的发生。尿中NO含量可作为反映肠道细菌移位的指标。这将对ANP时细菌移位的监测、早期诊断胰腺感染提供参考价值。
参考文献
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1 Oudenhoven IM, Klaasen HLBM, Lapre JA et al. Nitric oxide derived urinary ntriate as a marker of intestinal bacterial translocation in rats. Gastroenterology, 1994, 107：47-51.
2 Cortas NK, Wakid NW. Determination of inorganic Nitrate in serum and urine by a kinetic Cadmium-reduction method. Clin Chem, 1990, 36：1440-1444.
3 Miller MJS, Zhang XJ, Sadowska-Krowicka H, et al. Nitric oxide release in response to gut injury. Scand J Gastroenterol, 1993, 28：149-151.(收稿：1997-03-19 修回：1997-12-09)
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单位：100037 北京，中国人民解放军第三○四医院创伤中心[吴承堂(现在广州第一军医大学南方医院普外科，510515)、黎沾良、熊德鑫]
关键词：
中华医学杂志980326 尿中一氧化氮(NO)水平的增高可作为细菌移位的诊断指标[1]，但有关急性坏死性胰腺炎(ANP)时血、尿NO水平变化及其与细菌移位的关系，极少报道。作者现将初步观察结果报道如下。
一、材料与方法
1.模型制作：杂种犬15只，体重15±2kg，雌雄不限。将犬随机分为：对照组(7只)和ANP组(8只)。对照组仅用手触及胰腺，ANP组以7.8kpa恒定压力经主胰管注入5%牛磺胆酸钠(0.5ml/kg)和胰蛋白酶(3 000U/kg)，复制ANP模型。
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2.检测指标：术后1，2，4，7天分别收集血、尿标本，取血浆0.5ml和尿10μl，参照Cortas等[2]法检测血、尿NO含量。术后每天抽血2ml作细菌培养。第七天活杀动物后，无菌剪取肝、胰、脾、肺、肾及肠系膜淋巴结，匀浆后作细菌培养，需氧菌37℃培养24小时，厌氧菌37℃厌氧箱中培养48小时后计数。取胰腺及回肠组织作光镜观察。数据作t检验，结果以
±s表示。二、结果
1.病理观察:光镜下ANP组胰腺呈片状出血、坏死，证实为坏死性胰腺炎。回肠可见明显的粘膜出血、水肿，上皮变性，绒毛部分脱落。对照组胰腺及肠粘膜未见明显异常。
2.血浆、尿NO水平：ANP组血、尿NO明显高于对照组(P<0.05、P<0.01)，术后第1天即达到峰值，以后逐渐下降(附表)；ANP组各天尿中NO水平高于相应血浆水平，两者呈显著正相关(y=168.06±12.26x，r=0.9971，P<0.01)。
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附表 血浆和尿中NO水平变化(nmol/ml，
±s) 组别犬数
术后时间(天)
1
2
4
7
对照组
7
血浆
39± 8
36± 6
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40± 6
34± 7
尿
383± 80
415± 77
390± 54
366± 75
ANP组
8
血浆
106± 30**
82± 17**
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58± 8*
40± 5
尿
1491±232**
1131±183**
866±122**
681±148*
与对照组比较*P<0.05，**P<0.01 3.细菌移位:脏器细菌培养，胰腺炎犬全部发生细菌移位，肝和胰为7/8、脾4/8、肺和肾6/8及肠系膜淋巴结8/8；血培养全部阳性，发病后第1、2天分别为6/8和5/8。对照组只有两只犬在肠系膜淋巴结培养出细菌，其他脏器和血培养均为阴性。
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三、讨论
本研究发现ANP发病后24小时，血浆和尿中NO水平达到峰值，到术后第七天仍维持较高水平。同时血和脏器都发现有细菌易位。提示NO作为一种生物信息分子，参与ANP的病理过程。ANP时血、尿中NO含量的增加，可能是由于产生的内毒素和各种细胞因子通过刺激巨噬细胞等，使胞内iNOS的转录和翻译水平增加，从而诱生大量NO所致。NO一方面通过舒血管效应，可使组织血流增加；另一方面能改变微血管的通透性，减少白细胞渗出，并通过抑制白细胞聚集，阻止溶酶体酶从中性粒细胞释放，减轻白细胞对组织的损伤。使用NO合成酶抑制剂阻断NO的产生，可使内毒素(LPS)诱导的胃肠粘膜损伤加重[3]，这可能对宿主的防御功能是有益的。但ANP后，由于高水平和长时间iNOS的诱导生成，使毒性氧生成增加，更加损伤组织，降低机体免疫力，促进细菌移位的发生。尿中NO含量可作为反映肠道细菌移位的指标。这将对ANP时细菌移位的监测、早期诊断胰腺感染提供参考价值。
参考文献
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1 Oudenhoven IM, Klaasen HLBM, Lapre JA et al. Nitric oxide derived urinary ntriate as a marker of intestinal bacterial translocation in rats. Gastroenterology, 1994, 107：47-51.
2 Cortas NK, Wakid NW. Determination of inorganic Nitrate in serum and urine by a kinetic Cadmium-reduction method. Clin Chem, 1990, 36：1440-1444.
3 Miller MJS, Zhang XJ, Sadowska-Krowicka H, et al. Nitric oxide release in response to gut injury. Scand J Gastroenterol, 1993, 28：149-151.(收稿：1997-03-19 修回：1997-12-09)
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