自然杀伤细胞的独立刺激信号——CD45分子交联
作者：沈 锋 王 皓 谢天培 郭亚军 吴孟超 陈 汉 钱
单位：
关键词：杀伤细胞；天然；粘附分子；信号传递
第二军医大学学报980403 摘要 目的： 探讨表面分子在自然杀伤(NK)细胞活化中的信号分子作用及其机制。方法： 采用多种粘附分子单抗及配体刺激NK细胞，ELISA法定量检测刺激后NK细胞释放的γ干扰素(IFN-γ)作为NK细胞活化指标，观察各种粘附分子在NK细胞释放IFN-γ中的信号作用。结果： 单一CD45单抗刺激即可使NK细胞活化；两种分别为IgG1,IgG2a亚类的CD45单抗及IgG2a亚类CD45单抗的F(ab)2均体现对NK细胞的独立刺激作用。结论： CD45分子介导的NK细胞活化与CD16-Fc段间相互作用无关，CD45分子交联是NK细胞活化的独立刺激信号。
中国图书资料分类法分类号 R392.11
, http://www.100md.com
CD45 cross-linking is the independent stimulatory signal in natural killer cells activation
Shen Feng, Wang Hao, Xie Tianpei, Guo Yajun, Wu Mengchao, Chen Han, Qian Weizhu (Eastern Hospital of Hepatobiliary Surgery, Second Military Medical University, Shanghai, 200438)
Abstract Objective： To determine the identity of molecules and mechanism that mediate signal transduction and NK cell activation. Methods: We quantitated IFN-γ concentration produced by NK cells that were stimulated with a panel of purified ligands and monoclonal antibodies specific for adhesion molecules. Results: Anti-CD45 mAbs could specifically and independently stimulated IFN-γ production in NK cells. The ability of CD45 mAbs to stimulate NK cells appears not to be dependent on CD16-Fc partition interaction, as CD45 mAbs of both IgGl and IgG2a isotypes，both whole antibodies and its F(ab')2,were equally stimulatory. Conclusion: These observations suggest that CD45 cross-linking is the independent and unique stimuli for NK cell activation.
, 百拇医药
Key words killer cells, natural; adhesion molecules; signal transduction
自然杀伤(NK)细胞表面何种分子介导其接受刺激信号、 传递并导致细胞激活及其机制尚不清楚[1] 。 以往对T细胞激活机制的研究均证实， 在TCR-CD3复合物交联的状态下， 一系列粘附分子起着重要的共刺激作用[2，3] ， 这些分子可能在NK细胞激活中亦有重要作用。 本实验采用单克隆抗体及纯化配体刺激NK细胞， 定量检测NK细胞释放γ干扰素(IFN-γ)作为NK细胞活化的指标， 探讨了一系列粘附分子在NK细胞激活中的作用。
1 材料和方法
1.1 人NK细胞的纯化 健康人外周血，经Ficoll-Hypaque法分离出单个核细胞，过尼龙毛柱，收集细胞后，调整细胞密度为1×107个/ml，以抗CD3和抗CD20单抗(各为2 μg/ml)在4℃孵育30 min，含1% BSA的PBS洗涤后，加入羊抗鼠IgG磁性微粒(0.5 ml/107)，4℃轻微震荡孵育30 min，用磁板吸附结合微粒的细胞，收集未吸附细胞。常规再重复上述纯化过程10次，获得纯化的NK细胞，直接法荧光染色后，流式细胞仪检测其CD56+为65%～85%。NK细胞以含10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养液及IL-2(100 U/ml)培养。
, 百拇医药
1.2 单克隆抗体和粘附分子配体 抗CDlla(TS1/22)，抗CD18(TS2/22)，抗LFA-3(TS2/9)，抗CD2(TS2/18)，抗CD3(OKT3)，抗CD7(3A1)和抗CD45(9.4，IgG2a)单抗的杂交瘤细胞系均购自ATCC公司，其培养上清用Protein G plus柱纯化获得纯化抗体;抗CD45单抗(NIH45)纯化抗体购自ATCC公司。抗ICAM-1(RR1/1)单抗由Rothlein博士(Boehringern Mannheim)惠赠，抗CD16(B73.1.1)由Linda博士(Chicago Medical School)惠赠。抗CD31，CD44和CD28单抗购自PharMingen公司。对照的抗体亚类购自Southern Biologicals公司。纤粘蛋白、透明质酸酶、Ⅰ型胶原购自Sigma公司，层粘素购自Telios Pharmaceuticals公司。ICAM-1为裂解红细胞及亲合层析法纯化获得。
1.3 抗体F(ab)2的制备 单抗9.4(IgG2a)F(ab)2的制备采用胃蛋白酶消化试剂盒(Pierce公司)。按产品说明书进行单抗浓缩，调节pH值，消化，纯化和SDS-PAGE电泳检测。ELISA法检测后示Fc段掺杂率<5%。
, 百拇医药
1.4 刺激IFN-γ产生实验和ELISA法定量检测 纯化单抗均以10 μg/ml(CD28单抗以纯化单抗的1∶5 000稀释)，纯化配体均以1 μg/ml稀释于PBS后包被平底96孔板(Dynatech公司)，50 μl/孔，4℃过夜，PBS洗涤3遍，再用含2.5% BSA的PBS室温下孵育15 min，PBS洗涤1遍后每孔加入50 μl NK细胞悬液(2×105个/ml)。基因重组人IL-2 10 U/ml(Cetus公司)，37℃孵育20 h，吸上清后应用ELISA法定量检测[2，3]IFN-γ。单一刺激为仅包被一种单抗或配体,共刺激则为两种单抗或一种单抗与一种配体各以上述浓度包被于同一实验孔。
2 结 果
2.1 粘附分子单抗及配体刺激对NK细胞产生IFN-γ的影响 用多种粘附分子和CD45的单抗及配体刺激培养12 d的NK细胞，结果如表1所示。仅有抗CD16和抗CD45(9.4)能独立刺激NK细胞释放IFN-γ，以抗CD45单抗的刺激作用显著。在NK细胞表面CD16分子交联状态下，抗CD45单抗亦具有明显的刺激作用，但刺激活性并无叠加作用。
, 百拇医药
表 1 粘附分子配体、单抗对NK细胞产生IFN-γ的影响a
Tab 1 IFN-γ production in NK cells (2×105/ml)
stimulated by adhesion molecules ligands and McAbs(ρB/ng*ml-1) Stimuli
Costimulating
None
CD16 McAb
Ligands (1 μg/ml)
BSA
, 百拇医药
3.80
34.2
Fibronection
2.90
37.1
Laminin
3.00
13.8
Collagen-1
2.40
13.0
CD54/ICAM-1
, 百拇医药 3.10
13.0
Hycluronic acid
3.20
28.5
McAbs (10 μg/ml)
IgG1
5.64
33.1
IgG2a
5.45
38.8
CD7
, 百拇医药
4.48
24.9
CD31
6.34
16.4
CD28
2.29
11.2
CD2
0.82
11.7
CD54/ICAM-1
2.58
, http://www.100md.com
12.3
CD58/LFA-3
2.37
18.5
CD16
18.50
ND
CDlla/LFA-1a
3.40
11.1
CD18/LFA-1
2.60
11.3
, 百拇医药
CD44
5.10
39.0
CD45(9.4)
57.20
35.7
CD45(NIH45)
49.60
45.2
CD45F(ab)2b
31.70
33.3
, 百拇医药
aResult of one of four to eight experiments are presented;
bFrom 9.4(IgG2a)McAbs
2.2 不同亚类CD45单抗及单抗9.4的F(ab)2对NK细胞产生IFN-γ的刺激作用 表2示两种单抗即NIH45(IgG1)和9.4(IgG2a)均具有刺激作用，表 2 不同亚类CD45单抗对NK细胞产生IFN-γ的影响
Tab 2 IFN-γ production in NK cells stimulated by CD45 with different
isotypes(
±s, ρB/ng*ml-1) McAb
, http://www.100md.com
Dose of McAb (ρB/μg*ml-1)
0
1.25
2.50
5.00
10.00
20.00
IgG1
6.4±2.2
ND
6.8±2.7
ND
, http://www.100md.com
8.5±3.2
ND
IgG2a
5.1±2.0
ND
6.5±3.1
ND
5.8±2.0
ND
9.4
8.0±3.6
38.5± 9.9
48.4±12.6
, 百拇医药
52.5±16.3
53.7±15.6
50.1±15.3
NIH45
8.1±3.4
30.0±11.1
50.2±19.7
55.5±19.4
66.3±20.7
55.8±21.5
CD16
8.8±3.4
, 百拇医药
31.3±13.7
35.5±16.5
39.2±12.3
42.5±17.7
47.3±15.8
9.4完整抗体与其F(ab)2同样刺激NK细胞释放IFN-γ(图1)。
图 1 CD45单抗9.4及其F(ab')2对NK细胞的刺激作用
Fig 1 Stimulation of NK cells by CD45
McAb 9.4 and its F(ab)2
, 百拇医药
○: 9.4; ●: F(ab)2
3 讨 论
NK细胞获得刺激信号激活后可产生细胞因子[4], 介导这一作用的NK细胞表面分子至今尚未得到鉴定。尽管CD16作为一种Fc受体, 在仅肿瘤细胞和NK细胞存在的共培养环境中, CD16分子并不起重要的识别和信号分子作用[5]。由于NK细胞表面一系列粘附分子的存在, 我们推测某些或某种分子在NK细胞活化中起重要作用。为了证实这一现象和鉴定这些分子, 本实验采用包括β1整合素家族的配体纤粘蛋白, 层粘素, 胶原蛋白, β2整合素家族的配体ICAM-1及CD44分子配体透明质酸刺激NK细胞, 上述配体均不能独立刺激NK细胞产生IFN-γ, 也不体现与CD16单抗的共刺激作用。用一系列包被的针对免疫球蛋白超基因家族, 整合素家族粘附分子和CD44, CD45分子的单抗刺激NK细胞, 则发现了一个尚未见报道的现象, 即在所有被检测的粘附分子单抗中, 只有CD45单抗能独立刺激NK细胞产生IFN-γ。CD45, 或称白细胞共同抗原, 广泛表达于造血系统来源的有核细胞表面[6], 由于CD45基因的不同mRNA剪切方式以及CD45分子细胞外区的不同糖基化, 使其具有多种异构体(isoforms)[7]。对CD45功能研究的结果表明, 表达于T细胞表面的CD45分子, 其细胞内区具有酪氨酸磷酸酯酶活性, 在T细胞激活和信号传递中起着重要作用[8]。但是, T细胞表达的CD45分子并非独立作用的信号分子, T细胞的激活仍依赖于TCR/CD3复合物的交联, CD45分子仅是一种重要的共刺激分子和刺激信号传递分子[9]。本实验发现的CD45分子在NK细胞激活中的独特作用, 与其在T细胞激活中的共刺激作用相异。
, 百拇医药
本研究发现的CD45分子是独立，而非共刺激性的NK细胞信号分子，其依据在于：(1)CD45单抗可单独刺激NK细胞释放IFN-γ，与CD16单抗无协同作用；(2)NIH45(IgG1)和9.4(IgG2a),均可独立刺激NK细胞，而CD16(FcγRⅡ)仅可结合IgG2a，不结合IgG1，同时，IgG1和IgG2a的亚类对照抗体并不体现对NK的刺激活性;(3)单抗9.4(IgG2a)的F(ab')2 与 9.4完整抗体具有相同的刺激活性。因此，NK细胞表面CD45分子交联引起的刺激信号与FC段-CD16介导的信号传递无关。本研究结果表明，CD45分子是NK细胞激活的独特途径。
参 考 文 献
1 Chong AS, Boussy IA, Jiang XL, et al. CD54/ICAM-1 is a costimulator of NK cell-mediated cytotoxicity. Cell Immunol, 1994,157(1):92
, 百拇医药
2 Shen F, Wu MC, Guo YJ, et al. Costimulation signals of LFA-1,LFA-2,CD44 and CD45 molecules in T cell activation. J Med Coll PLA, 1995,10(1):25
3 沈 锋，郭亚军，吴孟超，等. LFA-1，LFA-2，CD44和CD45分子对T细胞的共刺激作用. 第二军医大学学报, 1995，16(3)：218
4 Rabinowich H, Vitolo D, Altarac S, et al. Role of cytokines in the adoptive immunotherapy of an experimental model of human head and neck cancer by human IL-2-activated natural killer cells. J Immunol, 1992,149(1):340
, 百拇医药
5 Anderson CL. Structural and functional polymorphism of human Fc receptor for IgG. In: Fridman W H ed. Structures and functions of low affinity Fc receptor. Kargerm Basel Switzerland, 1989.20～30
6 Thomas ML. The leukocyte common antigen family. Annu Rev Immunol,1989,7:339
7 Bell GM, Dethloff GM, Imboden JB. CD45-negative mutants of a rat natural killer cell line fail to lyse tumor target cells. J Immunol, 1993,151(7):3646
, 百拇医药
8 Volarevic S, Niklinska BB, Burns C, et al. Regulation of TCR signaling by CD45 lacking transmembrane and extracellular domains. Science, 1993,260(5107):541
9 Shen F, Xu XL, Graf LH, et al. CD45-cross-linking stimulates IFN-gamma production in NK cells. J Immunol, 1995,154(2):644
(1997-12-04收稿, 1998-04-22修回)
, http://www.100md.com
单位：
关键词：杀伤细胞；天然；粘附分子；信号传递
第二军医大学学报980403 摘要 目的： 探讨表面分子在自然杀伤(NK)细胞活化中的信号分子作用及其机制。方法： 采用多种粘附分子单抗及配体刺激NK细胞，ELISA法定量检测刺激后NK细胞释放的γ干扰素(IFN-γ)作为NK细胞活化指标，观察各种粘附分子在NK细胞释放IFN-γ中的信号作用。结果： 单一CD45单抗刺激即可使NK细胞活化；两种分别为IgG1,IgG2a亚类的CD45单抗及IgG2a亚类CD45单抗的F(ab)2均体现对NK细胞的独立刺激作用。结论： CD45分子介导的NK细胞活化与CD16-Fc段间相互作用无关，CD45分子交联是NK细胞活化的独立刺激信号。
中国图书资料分类法分类号 R392.11
, http://www.100md.com
CD45 cross-linking is the independent stimulatory signal in natural killer cells activation
Shen Feng, Wang Hao, Xie Tianpei, Guo Yajun, Wu Mengchao, Chen Han, Qian Weizhu (Eastern Hospital of Hepatobiliary Surgery, Second Military Medical University, Shanghai, 200438)
Abstract Objective： To determine the identity of molecules and mechanism that mediate signal transduction and NK cell activation. Methods: We quantitated IFN-γ concentration produced by NK cells that were stimulated with a panel of purified ligands and monoclonal antibodies specific for adhesion molecules. Results: Anti-CD45 mAbs could specifically and independently stimulated IFN-γ production in NK cells. The ability of CD45 mAbs to stimulate NK cells appears not to be dependent on CD16-Fc partition interaction, as CD45 mAbs of both IgGl and IgG2a isotypes，both whole antibodies and its F(ab')2,were equally stimulatory. Conclusion: These observations suggest that CD45 cross-linking is the independent and unique stimuli for NK cell activation.
, 百拇医药
Key words killer cells, natural; adhesion molecules; signal transduction
自然杀伤(NK)细胞表面何种分子介导其接受刺激信号、 传递并导致细胞激活及其机制尚不清楚[1] 。 以往对T细胞激活机制的研究均证实， 在TCR-CD3复合物交联的状态下， 一系列粘附分子起着重要的共刺激作用[2，3] ， 这些分子可能在NK细胞激活中亦有重要作用。 本实验采用单克隆抗体及纯化配体刺激NK细胞， 定量检测NK细胞释放γ干扰素(IFN-γ)作为NK细胞活化的指标， 探讨了一系列粘附分子在NK细胞激活中的作用。
1 材料和方法
1.1 人NK细胞的纯化 健康人外周血，经Ficoll-Hypaque法分离出单个核细胞，过尼龙毛柱，收集细胞后，调整细胞密度为1×107个/ml，以抗CD3和抗CD20单抗(各为2 μg/ml)在4℃孵育30 min，含1% BSA的PBS洗涤后，加入羊抗鼠IgG磁性微粒(0.5 ml/107)，4℃轻微震荡孵育30 min，用磁板吸附结合微粒的细胞，收集未吸附细胞。常规再重复上述纯化过程10次，获得纯化的NK细胞，直接法荧光染色后，流式细胞仪检测其CD56+为65%～85%。NK细胞以含10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养液及IL-2(100 U/ml)培养。
, 百拇医药
1.2 单克隆抗体和粘附分子配体 抗CDlla(TS1/22)，抗CD18(TS2/22)，抗LFA-3(TS2/9)，抗CD2(TS2/18)，抗CD3(OKT3)，抗CD7(3A1)和抗CD45(9.4，IgG2a)单抗的杂交瘤细胞系均购自ATCC公司，其培养上清用Protein G plus柱纯化获得纯化抗体;抗CD45单抗(NIH45)纯化抗体购自ATCC公司。抗ICAM-1(RR1/1)单抗由Rothlein博士(Boehringern Mannheim)惠赠，抗CD16(B73.1.1)由Linda博士(Chicago Medical School)惠赠。抗CD31，CD44和CD28单抗购自PharMingen公司。对照的抗体亚类购自Southern Biologicals公司。纤粘蛋白、透明质酸酶、Ⅰ型胶原购自Sigma公司，层粘素购自Telios Pharmaceuticals公司。ICAM-1为裂解红细胞及亲合层析法纯化获得。
1.3 抗体F(ab)2的制备 单抗9.4(IgG2a)F(ab)2的制备采用胃蛋白酶消化试剂盒(Pierce公司)。按产品说明书进行单抗浓缩，调节pH值，消化，纯化和SDS-PAGE电泳检测。ELISA法检测后示Fc段掺杂率<5%。
, 百拇医药
1.4 刺激IFN-γ产生实验和ELISA法定量检测 纯化单抗均以10 μg/ml(CD28单抗以纯化单抗的1∶5 000稀释)，纯化配体均以1 μg/ml稀释于PBS后包被平底96孔板(Dynatech公司)，50 μl/孔，4℃过夜，PBS洗涤3遍，再用含2.5% BSA的PBS室温下孵育15 min，PBS洗涤1遍后每孔加入50 μl NK细胞悬液(2×105个/ml)。基因重组人IL-2 10 U/ml(Cetus公司)，37℃孵育20 h，吸上清后应用ELISA法定量检测[2，3]IFN-γ。单一刺激为仅包被一种单抗或配体,共刺激则为两种单抗或一种单抗与一种配体各以上述浓度包被于同一实验孔。
2 结 果
2.1 粘附分子单抗及配体刺激对NK细胞产生IFN-γ的影响 用多种粘附分子和CD45的单抗及配体刺激培养12 d的NK细胞，结果如表1所示。仅有抗CD16和抗CD45(9.4)能独立刺激NK细胞释放IFN-γ，以抗CD45单抗的刺激作用显著。在NK细胞表面CD16分子交联状态下，抗CD45单抗亦具有明显的刺激作用，但刺激活性并无叠加作用。
, 百拇医药
表 1 粘附分子配体、单抗对NK细胞产生IFN-γ的影响a
Tab 1 IFN-γ production in NK cells (2×105/ml)
stimulated by adhesion molecules ligands and McAbs(ρB/ng*ml-1) Stimuli
Costimulating
None
CD16 McAb
Ligands (1 μg/ml)
BSA
, 百拇医药
3.80
34.2
Fibronection
2.90
37.1
Laminin
3.00
13.8
Collagen-1
2.40
13.0
CD54/ICAM-1
, 百拇医药 3.10
13.0
Hycluronic acid
3.20
28.5
McAbs (10 μg/ml)
IgG1
5.64
33.1
IgG2a
5.45
38.8
CD7
, 百拇医药
4.48
24.9
CD31
6.34
16.4
CD28
2.29
11.2
CD2
0.82
11.7
CD54/ICAM-1
2.58
, http://www.100md.com
12.3
CD58/LFA-3
2.37
18.5
CD16
18.50
ND
CDlla/LFA-1a
3.40
11.1
CD18/LFA-1
2.60
11.3
, 百拇医药
CD44
5.10
39.0
CD45(9.4)
57.20
35.7
CD45(NIH45)
49.60
45.2
CD45F(ab)2b
31.70
33.3
, 百拇医药
aResult of one of four to eight experiments are presented;
bFrom 9.4(IgG2a)McAbs
2.2 不同亚类CD45单抗及单抗9.4的F(ab)2对NK细胞产生IFN-γ的刺激作用 表2示两种单抗即NIH45(IgG1)和9.4(IgG2a)均具有刺激作用，表 2 不同亚类CD45单抗对NK细胞产生IFN-γ的影响
Tab 2 IFN-γ production in NK cells stimulated by CD45 with different
isotypes(
±s, ρB/ng*ml-1) McAb, http://www.100md.com
Dose of McAb (ρB/μg*ml-1)
0
1.25
2.50
5.00
10.00
20.00
IgG1
6.4±2.2
ND
6.8±2.7
ND
, http://www.100md.com
8.5±3.2
ND
IgG2a
5.1±2.0
ND
6.5±3.1
ND
5.8±2.0
ND
9.4
8.0±3.6
38.5± 9.9
48.4±12.6
, 百拇医药
52.5±16.3
53.7±15.6
50.1±15.3
NIH45
8.1±3.4
30.0±11.1
50.2±19.7
55.5±19.4
66.3±20.7
55.8±21.5
CD16
8.8±3.4
, 百拇医药
31.3±13.7
35.5±16.5
39.2±12.3
42.5±17.7
47.3±15.8
9.4完整抗体与其F(ab)2同样刺激NK细胞释放IFN-γ(图1)。
图 1 CD45单抗9.4及其F(ab')2对NK细胞的刺激作用
Fig 1 Stimulation of NK cells by CD45
McAb 9.4 and its F(ab)2
, 百拇医药
○: 9.4; ●: F(ab)2
3 讨 论
NK细胞获得刺激信号激活后可产生细胞因子[4], 介导这一作用的NK细胞表面分子至今尚未得到鉴定。尽管CD16作为一种Fc受体, 在仅肿瘤细胞和NK细胞存在的共培养环境中, CD16分子并不起重要的识别和信号分子作用[5]。由于NK细胞表面一系列粘附分子的存在, 我们推测某些或某种分子在NK细胞活化中起重要作用。为了证实这一现象和鉴定这些分子, 本实验采用包括β1整合素家族的配体纤粘蛋白, 层粘素, 胶原蛋白, β2整合素家族的配体ICAM-1及CD44分子配体透明质酸刺激NK细胞, 上述配体均不能独立刺激NK细胞产生IFN-γ, 也不体现与CD16单抗的共刺激作用。用一系列包被的针对免疫球蛋白超基因家族, 整合素家族粘附分子和CD44, CD45分子的单抗刺激NK细胞, 则发现了一个尚未见报道的现象, 即在所有被检测的粘附分子单抗中, 只有CD45单抗能独立刺激NK细胞产生IFN-γ。CD45, 或称白细胞共同抗原, 广泛表达于造血系统来源的有核细胞表面[6], 由于CD45基因的不同mRNA剪切方式以及CD45分子细胞外区的不同糖基化, 使其具有多种异构体(isoforms)[7]。对CD45功能研究的结果表明, 表达于T细胞表面的CD45分子, 其细胞内区具有酪氨酸磷酸酯酶活性, 在T细胞激活和信号传递中起着重要作用[8]。但是, T细胞表达的CD45分子并非独立作用的信号分子, T细胞的激活仍依赖于TCR/CD3复合物的交联, CD45分子仅是一种重要的共刺激分子和刺激信号传递分子[9]。本实验发现的CD45分子在NK细胞激活中的独特作用, 与其在T细胞激活中的共刺激作用相异。
, 百拇医药
本研究发现的CD45分子是独立，而非共刺激性的NK细胞信号分子，其依据在于：(1)CD45单抗可单独刺激NK细胞释放IFN-γ，与CD16单抗无协同作用；(2)NIH45(IgG1)和9.4(IgG2a),均可独立刺激NK细胞，而CD16(FcγRⅡ)仅可结合IgG2a，不结合IgG1，同时，IgG1和IgG2a的亚类对照抗体并不体现对NK的刺激活性;(3)单抗9.4(IgG2a)的F(ab')2 与 9.4完整抗体具有相同的刺激活性。因此，NK细胞表面CD45分子交联引起的刺激信号与FC段-CD16介导的信号传递无关。本研究结果表明，CD45分子是NK细胞激活的独特途径。
参 考 文 献
1 Chong AS, Boussy IA, Jiang XL, et al. CD54/ICAM-1 is a costimulator of NK cell-mediated cytotoxicity. Cell Immunol, 1994,157(1):92
, 百拇医药
2 Shen F, Wu MC, Guo YJ, et al. Costimulation signals of LFA-1,LFA-2,CD44 and CD45 molecules in T cell activation. J Med Coll PLA, 1995,10(1):25
3 沈 锋，郭亚军，吴孟超，等. LFA-1，LFA-2，CD44和CD45分子对T细胞的共刺激作用. 第二军医大学学报, 1995，16(3)：218
4 Rabinowich H, Vitolo D, Altarac S, et al. Role of cytokines in the adoptive immunotherapy of an experimental model of human head and neck cancer by human IL-2-activated natural killer cells. J Immunol, 1992,149(1):340
, 百拇医药
5 Anderson CL. Structural and functional polymorphism of human Fc receptor for IgG. In: Fridman W H ed. Structures and functions of low affinity Fc receptor. Kargerm Basel Switzerland, 1989.20～30
6 Thomas ML. The leukocyte common antigen family. Annu Rev Immunol,1989,7:339
7 Bell GM, Dethloff GM, Imboden JB. CD45-negative mutants of a rat natural killer cell line fail to lyse tumor target cells. J Immunol, 1993,151(7):3646
, 百拇医药
8 Volarevic S, Niklinska BB, Burns C, et al. Regulation of TCR signaling by CD45 lacking transmembrane and extracellular domains. Science, 1993,260(5107):541
9 Shen F, Xu XL, Graf LH, et al. CD45-cross-linking stimulates IFN-gamma production in NK cells. J Immunol, 1995,154(2):644
(1997-12-04收稿, 1998-04-22修回)
, http://www.100md.com