人脑脉络丛内砂粒体的免疫组织化学研究
作者：金晓明 冈田英吉 赵纲 金毅 黄淇 熊田时正
单位：金晓明 冈田英吉 赵纲 金毅 黄淇(哈尔滨医科大学病理学教研室，哈尔滨 150086)；熊田时正(The first department of pathology, Toyama Medicine and Phanaraceutical Ubniversity, Japan)
关键词：脉络丛；胶原；免疫组织化学；砂粒体
人脑脉络丛内砂粒体的免疫组织化学研究摘要 目的：证实人脑脉络丛内砂粒体的组成成分。方法：采用ABC法对1例尸检的脉络丛组织进行TypeⅠ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ胶原和vimentin免疫组织化学检测。结果：TypeⅢ胶原在大量增生的胶原纤维、砂粒体的外层，未形成砂粒体的部分以及透明变的毛细血管壁呈强阳性表达。Type Ⅵ胶原呈轻度阳性表达。TypeⅠ和Ⅴ胶原在少许部分呈弱阳性表达。Type Ⅳ胶原阴性。vimentin在间质的纤维母细胞，血管内皮细胞和血管壁平滑肌阳性表达，而在砂粒体和透明变的毛细血管壁呈阴性表达。结论：首次报道人脑脉络丛内砂粒体的形成是来自纤维性胶原(以TypeⅢ胶原为主)的增生，变性和坏死所致。
, 百拇医药
中国图书分类号 R322.81 文献标识 A 文章编号 1001-7399(1999)01-0044-03
Immunohistochemical studies on psammoma bodies in choroid piexus of human brain
1Jin Xiaoming, 2Eikitwo Okata,1 Zhao Gang et al
(1Dept of Pathol, Harbin Medical University, Harbin 150086; 2The First Dept of
Pathol, Toyama Medicine and Phanaraceutical University, Japan)
, 百拇医药
ABSTRACT Purpose To study the components of psammoma bodies (PB) in choroid plexus of human brain. Methods Immunohistochemistry of ABC method for typeⅠ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ, Ⅵ collagens and vimentin was carried out on the psammoma bodies in choroid plexus of human brain from one case of autopsy. Results The positive expression of typeⅢ collagen was found on the surface of the PB, interstitial tissues, and the capillary walls undergone hyaline degeneration. While the expression of type Ⅵ, Ⅰ, Ⅴ collagens were decreased. TypeⅣ collagen was negative. The positive expression of vimentin was found on the fibroblast mainly. Conclusion This is the first report that the histogenesis of the psammoma bodies in choroid plexus is the hyperplasia, degeneration and necrosis of fibrous collagen (type Ⅲ collagen mainly).
, 百拇医药
KEY WORDS choroid plexus; collagen; immunohistochemistry; psammoma bodies
砂粒体是由钙化的层状体和蛋白样物质所构成，多发生于人类脑膜瘤组织当中〔1〕。但也有人报道在腺癌(卵巢，肺)、皮肤黑色素瘤以及甲状腺乳头瘤中也有砂粒体形成〔2，3〕。Han等〔1〕对脑膜瘤组织中的砂粒体进行了免疫荧光检测，证实砂粒体是由Type Ⅵ胶原构成。Korzherskii〔4〕对人脑脉络丛内砂粒体进行了组织化学和免疫细胞化学研究，认为砂粒体来源于纤维母细胞或纤维细胞，因为砂粒体中含有大量的波形纤维蛋白(vimentin)。本研究的目的是为证实砂粒体的组成成分是来源于胶原纤维还是来源于纤维母细胞，以及如果是胶原纤维，是由几型胶原纤维所构成的。对含有砂粒体脉络丛组织进行了TypeⅠ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ胶原和vimentin等免疫组织化学的检测。
, 百拇医药
1 材料和方法
1例尸检病例，男，33岁，智力欠佳。因头部外伤，在颞部有3 cm左右的创口，约6 h后自述头痛，继而呕吐，口吐白沫，神志不清，9 h后未经抢救而死亡。尸检所见，双侧脑室扩大，双侧脉络丛体积增大，沿中脑部有轻度粘连，未见出血灶和脑疝。光学显微镜下，见脉络丛间质有大量胶原纤维增生，以及大量钙化的洋葱皮样砂粒体。为探讨砂粒体成分，将石蜡包埋的组织块切成4～5 μm厚薄片，采用ABC法，进行TypeⅠ胶原(日本Tanner株式会社，1∶100稀释)，TypeⅢ胶原(日本Tanner株式会社，1∶400稀释)，TypeⅣ胶原(日本东京Dako，1∶100稀释)，TypeⅤ胶原(日本Tanner株式会社，1∶300稀释)，TypeⅥ胶原(日本Tanner株式会社，1∶20稀释)和vimentin(Zymed公司，1∶50稀释)的免疫组织化学对比观察。(注：TypeⅠ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ胶原的免疫组织化学染色是在日本富山医科药科大学医学部病理学教研究室完成的；其中Ⅰ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ胶原仅为研究所用，尚未用于人类的临床诊断。)
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2 结果
不同类型胶原纤维和波形纤维蛋白的免疫组织化学检测结果详见表1。从HE染色的标本见脉络丛上皮细胞肿胀，毛细血管扩张、充血，间质大量的胶原纤维增生，增生的胶原纤维呈扇形走行，有的呈颗粒状，有的局部性深染。在增生变性的胶原纤维基础上，有片状、点状、旋涡状、层状或洋葱皮样钙化灶，即大量砂粒体的形成(图1)，其中可见大量的毛细血管壁增厚、透明变性(图2)。免疫组织化学TypeⅢ胶原检测结果，在含胶原纤维的正常组织，增生或变性的胶原纤维，透明变的血管壁，砂粒体表层以及不对称的未钙化砂粒体部分均呈强阳性染色，而正常血管壁平滑肌细胞及弹力纤维呈阴性染色(图3，4)。Type Ⅵ胶原，部分砂粒体的表层，未钙化的变性胶原纤维呈轻度阳性染色，部分透明变血管壁呈弱阳性染色。TypeⅠ和Ⅴ胶原，仅在增生或变性胶原纤维、正常胶原纤维以及砂粒体表层有少许的弱阳性反应。TypeⅣ胶原，仅血管基底膜和部分平滑肌纤维呈阳性反应。vimentin在间质纤维母细胞、纤维细胞、部分血管内皮细胞和血管壁平滑肌纤维呈阳性表达，而在砂粒体内和透明变的毛细血管壁则呈阴性表达。
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图1人脑脉络丛内大量砂粒体的形成。HE×110
图2砂粒体、血管外膜及间质，TypeⅢ胶原阳性表达。ABC×110
图3脉络丛内可见大量透明变性的毛细血管壁。HE×110
图4图3中的大量透明变性的毛细血管壁、砂粒体、血管外膜及间质中含有
, 百拇医药
大量的TypeⅢ胶原成分。ABC×110
表1 人脑脉络丛内砂粒体的免疫组织化学表达
种类
PB
surface of PB
CW of HD
outer of BV
IT
BM
SM
, http://www.100md.com
FB
CEC
TypeⅠ胶原
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±～+
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TypeⅢ胶原
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TypeⅣ胶原
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TypeⅤ胶原
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TypeⅥ胶原
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vimentin
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*PB：psammoma bodies(砂粒体); CW: capillary walls(毛细血管壁); HD: hyalin degeneration(透明变性); BV:blood vessel(血管); IT: interstitial tissue(间质); BM: basement membance(基底膜); SM: smooth muscle(平滑肌); FB: filbroblasts(纤维母细胞); CEC: capillary endothelial cells(毛细血管内皮细胞)
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3 讨论
一般认为砂粒体是一种过渡型和混合形脑膜瘤的典型病理特征〔1〕，在一些腺瘤组织中也曾见到〔2，3〕，在脉络丛里形成的砂粒体报道极少，对砂粒体的成分还不十分清楚。Korzherskii〔4〕利用人脑脉络丛所形成的砂粒体标本进行了vimentin检测，认为砂粒体的形成是来源于围绕结缔组织周围的纤维母细胞。vimentin是正常间叶细胞及其肿瘤的特异性标志物〔5〕，它主要存在于纤维细胞、纤维母细胞、肌纤维母细胞、血管内皮细胞和血管壁平滑肌细胞。我们的检测结果提示，钙化的砂粒体内和透明变的毛细血管壁不含vimentin，而在砂粒体的周围含有少许纤维母细胞。纤维母细胞是存在于胶原纤维之间。在致密的纤维胶原束内呈不规则走行时，仅含有少量的纤维母细胞，因此，砂粒体是在大量增生且不规则走行的胶原纤维变性、坏死的基础上，或在血管壁透明变性的基础上形成的。至于纤维母细胞与胶原纤维变化的关系，平滑肌细胞与胶原纤维变化的关系，有待进一步探讨。本研究结果证实，脉络丛内所形成的砂粒体主要是由TypeⅢ胶原构成，其中含有部分TypeⅥ胶原和少许TypeⅠ和Ⅴ胶原。早在70年代末和80年代初，Virtanen等〔7〕和Kubota等〔8〕分别用扫描电镜和透射电镜证明，形成砂粒体的这些纤细纤维是胶原纤维。胶原纤维是具有67 nm横纹周期的纤维，由Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅺ型胶原凝集而形成的。在生物体内，通常以Ⅰ～Ⅴ, Ⅲ～Ⅴ, Ⅱ～Ⅺ型胶原组合形成聚合体。目前已知其构造和机能的有14种主要胶原，分为①纤维性胶原：Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅺ型，②纤维性结合性胶原(FACIT)：Ⅸ，Ⅹ Ⅱ，Ⅹ Ⅳ型，③短锁胶原：Ⅷ，Ⅹ型，④基底膜胶原：Ⅳ型，⑤其它：Ⅵ，Ⅶ，Ⅹ Ⅲ型等〔6〕。我们的研究结果提示，脉络丛内所形成的砂粒体是纤维性胶原凝集和变性的结果，与脑膜瘤中所形成的砂粒体的组成成分不同。
, 百拇医药
Korzherskii〔4〕认为人脑脉络丛内砂粒体的形成，是从儿童时期开始的，早期无钙化形成(这点符合本例尸检的临床病理表现)是一种慢性炎症长期刺激、发展变化的结果。脑膜瘤中所形成的砂粒体，胶原纤维起着固着作用〔1〕，而脉络丛内所形成的砂粒体(以TypeⅢ胶原为主)，可能是由于长期慢性炎症的刺激，导致胶原纤维增生、变性、胶原化，或毛细血管扩张、壁增厚、透明变性等一系列退变改变的结果。
作者简介：金晓明，女，43岁，副教授，博士
参考文献
1，Han J, Daniel JC, Pappas GO. Expression of type Ⅵ collagen bodies. Immunofluoresence studies on tow fresh human meningiomas. Acta Cytologica, 1996;40:177～181
, 百拇医药
2，Aure JC, Hoeg K, Kolstad P. Psammoma bodies in serous carcinoma of the ovary: a prognostic study. Am J Obstet Gynecol, 1971;109:113～118
3，Leung CS, Harlwick RWJ, Bedard YC. Correlation of cytologic and histologic features in variants of papillary carcinoma of the thyroid. Acta Cytologica, 1993;37:645～650
4，Korzherskii DE. The formation of psammoma bodies in the choroid plexus of the human brain. Morfologiia, 1997;111:46～49
, 百拇医药
5，纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学.北京: 军事医学科学出版社，1996：102
6，池田康夫，觉道健一，加藤良平等.免疫组织、细胞化学检查.临床检查，1995；39(增刊)：113～116
7，Virtanen I, Lehtnonen E, Wartiovaara J. Structure of psammoma bodies of a meningioma in scanning electron microscopy. Cancer, 1976;38:824～829
8，Kubota T, Hirano A, Yamamoto S et al. The fine structure of psammoma bodies in meningiocytic whorls. J Neuropathol Exp Neurol, 1984;43:37～44
(图片见插页第8页)
收稿日期：1998-05-18, http://www.100md.com
单位：金晓明 冈田英吉 赵纲 金毅 黄淇(哈尔滨医科大学病理学教研室，哈尔滨 150086)；熊田时正(The first department of pathology, Toyama Medicine and Phanaraceutical Ubniversity, Japan)
关键词：脉络丛；胶原；免疫组织化学；砂粒体
人脑脉络丛内砂粒体的免疫组织化学研究摘要 目的：证实人脑脉络丛内砂粒体的组成成分。方法：采用ABC法对1例尸检的脉络丛组织进行TypeⅠ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ胶原和vimentin免疫组织化学检测。结果：TypeⅢ胶原在大量增生的胶原纤维、砂粒体的外层，未形成砂粒体的部分以及透明变的毛细血管壁呈强阳性表达。Type Ⅵ胶原呈轻度阳性表达。TypeⅠ和Ⅴ胶原在少许部分呈弱阳性表达。Type Ⅳ胶原阴性。vimentin在间质的纤维母细胞，血管内皮细胞和血管壁平滑肌阳性表达，而在砂粒体和透明变的毛细血管壁呈阴性表达。结论：首次报道人脑脉络丛内砂粒体的形成是来自纤维性胶原(以TypeⅢ胶原为主)的增生，变性和坏死所致。
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中国图书分类号 R322.81 文献标识 A 文章编号 1001-7399(1999)01-0044-03
Immunohistochemical studies on psammoma bodies in choroid piexus of human brain
1Jin Xiaoming, 2Eikitwo Okata,1 Zhao Gang et al
(1Dept of Pathol, Harbin Medical University, Harbin 150086; 2The First Dept of
Pathol, Toyama Medicine and Phanaraceutical University, Japan)
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ABSTRACT Purpose To study the components of psammoma bodies (PB) in choroid plexus of human brain. Methods Immunohistochemistry of ABC method for typeⅠ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ, Ⅵ collagens and vimentin was carried out on the psammoma bodies in choroid plexus of human brain from one case of autopsy. Results The positive expression of typeⅢ collagen was found on the surface of the PB, interstitial tissues, and the capillary walls undergone hyaline degeneration. While the expression of type Ⅵ, Ⅰ, Ⅴ collagens were decreased. TypeⅣ collagen was negative. The positive expression of vimentin was found on the fibroblast mainly. Conclusion This is the first report that the histogenesis of the psammoma bodies in choroid plexus is the hyperplasia, degeneration and necrosis of fibrous collagen (type Ⅲ collagen mainly).
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KEY WORDS choroid plexus; collagen; immunohistochemistry; psammoma bodies
砂粒体是由钙化的层状体和蛋白样物质所构成，多发生于人类脑膜瘤组织当中〔1〕。但也有人报道在腺癌(卵巢，肺)、皮肤黑色素瘤以及甲状腺乳头瘤中也有砂粒体形成〔2，3〕。Han等〔1〕对脑膜瘤组织中的砂粒体进行了免疫荧光检测，证实砂粒体是由Type Ⅵ胶原构成。Korzherskii〔4〕对人脑脉络丛内砂粒体进行了组织化学和免疫细胞化学研究，认为砂粒体来源于纤维母细胞或纤维细胞，因为砂粒体中含有大量的波形纤维蛋白(vimentin)。本研究的目的是为证实砂粒体的组成成分是来源于胶原纤维还是来源于纤维母细胞，以及如果是胶原纤维，是由几型胶原纤维所构成的。对含有砂粒体脉络丛组织进行了TypeⅠ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ胶原和vimentin等免疫组织化学的检测。
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1 材料和方法
1例尸检病例，男，33岁，智力欠佳。因头部外伤，在颞部有3 cm左右的创口，约6 h后自述头痛，继而呕吐，口吐白沫，神志不清，9 h后未经抢救而死亡。尸检所见，双侧脑室扩大，双侧脉络丛体积增大，沿中脑部有轻度粘连，未见出血灶和脑疝。光学显微镜下，见脉络丛间质有大量胶原纤维增生，以及大量钙化的洋葱皮样砂粒体。为探讨砂粒体成分，将石蜡包埋的组织块切成4～5 μm厚薄片，采用ABC法，进行TypeⅠ胶原(日本Tanner株式会社，1∶100稀释)，TypeⅢ胶原(日本Tanner株式会社，1∶400稀释)，TypeⅣ胶原(日本东京Dako，1∶100稀释)，TypeⅤ胶原(日本Tanner株式会社，1∶300稀释)，TypeⅥ胶原(日本Tanner株式会社，1∶20稀释)和vimentin(Zymed公司，1∶50稀释)的免疫组织化学对比观察。(注：TypeⅠ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ胶原的免疫组织化学染色是在日本富山医科药科大学医学部病理学教研究室完成的；其中Ⅰ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ胶原仅为研究所用，尚未用于人类的临床诊断。)
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2 结果
不同类型胶原纤维和波形纤维蛋白的免疫组织化学检测结果详见表1。从HE染色的标本见脉络丛上皮细胞肿胀，毛细血管扩张、充血，间质大量的胶原纤维增生，增生的胶原纤维呈扇形走行，有的呈颗粒状，有的局部性深染。在增生变性的胶原纤维基础上，有片状、点状、旋涡状、层状或洋葱皮样钙化灶，即大量砂粒体的形成(图1)，其中可见大量的毛细血管壁增厚、透明变性(图2)。免疫组织化学TypeⅢ胶原检测结果，在含胶原纤维的正常组织，增生或变性的胶原纤维，透明变的血管壁，砂粒体表层以及不对称的未钙化砂粒体部分均呈强阳性染色，而正常血管壁平滑肌细胞及弹力纤维呈阴性染色(图3，4)。Type Ⅵ胶原，部分砂粒体的表层，未钙化的变性胶原纤维呈轻度阳性染色，部分透明变血管壁呈弱阳性染色。TypeⅠ和Ⅴ胶原，仅在增生或变性胶原纤维、正常胶原纤维以及砂粒体表层有少许的弱阳性反应。TypeⅣ胶原，仅血管基底膜和部分平滑肌纤维呈阳性反应。vimentin在间质纤维母细胞、纤维细胞、部分血管内皮细胞和血管壁平滑肌纤维呈阳性表达，而在砂粒体内和透明变的毛细血管壁则呈阴性表达。
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图1人脑脉络丛内大量砂粒体的形成。HE×110
图2砂粒体、血管外膜及间质，TypeⅢ胶原阳性表达。ABC×110
图3脉络丛内可见大量透明变性的毛细血管壁。HE×110
图4图3中的大量透明变性的毛细血管壁、砂粒体、血管外膜及间质中含有
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大量的TypeⅢ胶原成分。ABC×110
表1 人脑脉络丛内砂粒体的免疫组织化学表达
种类
PB
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CW of HD
outer of BV
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TypeⅠ胶原
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TypeⅢ胶原
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TypeⅣ胶原
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TypeⅤ胶原
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*PB：psammoma bodies(砂粒体); CW: capillary walls(毛细血管壁); HD: hyalin degeneration(透明变性); BV:blood vessel(血管); IT: interstitial tissue(间质); BM: basement membance(基底膜); SM: smooth muscle(平滑肌); FB: filbroblasts(纤维母细胞); CEC: capillary endothelial cells(毛细血管内皮细胞)
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3 讨论
一般认为砂粒体是一种过渡型和混合形脑膜瘤的典型病理特征〔1〕，在一些腺瘤组织中也曾见到〔2，3〕，在脉络丛里形成的砂粒体报道极少，对砂粒体的成分还不十分清楚。Korzherskii〔4〕利用人脑脉络丛所形成的砂粒体标本进行了vimentin检测，认为砂粒体的形成是来源于围绕结缔组织周围的纤维母细胞。vimentin是正常间叶细胞及其肿瘤的特异性标志物〔5〕，它主要存在于纤维细胞、纤维母细胞、肌纤维母细胞、血管内皮细胞和血管壁平滑肌细胞。我们的检测结果提示，钙化的砂粒体内和透明变的毛细血管壁不含vimentin，而在砂粒体的周围含有少许纤维母细胞。纤维母细胞是存在于胶原纤维之间。在致密的纤维胶原束内呈不规则走行时，仅含有少量的纤维母细胞，因此，砂粒体是在大量增生且不规则走行的胶原纤维变性、坏死的基础上，或在血管壁透明变性的基础上形成的。至于纤维母细胞与胶原纤维变化的关系，平滑肌细胞与胶原纤维变化的关系，有待进一步探讨。本研究结果证实，脉络丛内所形成的砂粒体主要是由TypeⅢ胶原构成，其中含有部分TypeⅥ胶原和少许TypeⅠ和Ⅴ胶原。早在70年代末和80年代初，Virtanen等〔7〕和Kubota等〔8〕分别用扫描电镜和透射电镜证明，形成砂粒体的这些纤细纤维是胶原纤维。胶原纤维是具有67 nm横纹周期的纤维，由Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅺ型胶原凝集而形成的。在生物体内，通常以Ⅰ～Ⅴ, Ⅲ～Ⅴ, Ⅱ～Ⅺ型胶原组合形成聚合体。目前已知其构造和机能的有14种主要胶原，分为①纤维性胶原：Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅺ型，②纤维性结合性胶原(FACIT)：Ⅸ，Ⅹ Ⅱ，Ⅹ Ⅳ型，③短锁胶原：Ⅷ，Ⅹ型，④基底膜胶原：Ⅳ型，⑤其它：Ⅵ，Ⅶ，Ⅹ Ⅲ型等〔6〕。我们的研究结果提示，脉络丛内所形成的砂粒体是纤维性胶原凝集和变性的结果，与脑膜瘤中所形成的砂粒体的组成成分不同。
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Korzherskii〔4〕认为人脑脉络丛内砂粒体的形成，是从儿童时期开始的，早期无钙化形成(这点符合本例尸检的临床病理表现)是一种慢性炎症长期刺激、发展变化的结果。脑膜瘤中所形成的砂粒体，胶原纤维起着固着作用〔1〕，而脉络丛内所形成的砂粒体(以TypeⅢ胶原为主)，可能是由于长期慢性炎症的刺激，导致胶原纤维增生、变性、胶原化，或毛细血管扩张、壁增厚、透明变性等一系列退变改变的结果。
作者简介：金晓明，女，43岁，副教授，博士
参考文献
1，Han J, Daniel JC, Pappas GO. Expression of type Ⅵ collagen bodies. Immunofluoresence studies on tow fresh human meningiomas. Acta Cytologica, 1996;40:177～181
, 百拇医药
2，Aure JC, Hoeg K, Kolstad P. Psammoma bodies in serous carcinoma of the ovary: a prognostic study. Am J Obstet Gynecol, 1971;109:113～118
3，Leung CS, Harlwick RWJ, Bedard YC. Correlation of cytologic and histologic features in variants of papillary carcinoma of the thyroid. Acta Cytologica, 1993;37:645～650
4，Korzherskii DE. The formation of psammoma bodies in the choroid plexus of the human brain. Morfologiia, 1997;111:46～49
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5，纪小龙，施作霖.诊断免疫组织化学.北京: 军事医学科学出版社，1996：102
6，池田康夫，觉道健一，加藤良平等.免疫组织、细胞化学检查.临床检查，1995；39(增刊)：113～116
7，Virtanen I, Lehtnonen E, Wartiovaara J. Structure of psammoma bodies of a meningioma in scanning electron microscopy. Cancer, 1976;38:824～829
8，Kubota T, Hirano A, Yamamoto S et al. The fine structure of psammoma bodies in meningiocytic whorls. J Neuropathol Exp Neurol, 1984;43:37～44
(图片见插页第8页)
收稿日期：1998-05-18, http://www.100md.com