一步法快速检测肌钙蛋白T及肌钙蛋白I诊断急性心肌梗塞
作者：曹淑芳 黄翠瑶 石林波 刘书霞
单位：广州军区广州总医院老年病三科；广州军区广州总医院医学检验科，广州，510010
关键词：肌钙蛋白；急性心肌梗塞；活性卡
第一军医大学学报990122 摘要：目的和方法 采用一步法免疫色谱干膜层析活性卡，快速检测19例急性心肌梗塞(AMI)患者血肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)，与CK-MB对照。结果 TnT、TnI和CK-MB的阳性率分别为89.5%，84.2%，57.9%，TnT与CK-MB之间有显著差异；三者特异性分别为83.3%，88.9%，88.9%，无统计学显著差异；在非心脏疾病者CK-MB也有升高，而Tn阴性。结论 Tn活性卡操作简便，灵敏性高，可用于急诊室及床旁检测。
中图分类号：R542.22
, http://www.100md.com
Clinical use of one-step assay of cardiac troponin I and troponin T for diagnosis of acute myocardial infarction
Cao Shufang Huang Cuiyao
Department of Third Gerontology
Shi Lingbo2, Liu Suxia2
Department of Medical Laboratory, Guangzhou General Hospital of PLA, Guangzhou, 510010 Abstract: Objective and Methods Cardiac troponin I (TnI) and troponin T (TnT) were rapidly tested in 19 patients with acute myocardial infarction using one-step immune chromatographic biocard and compared with CK-MB. Results The positive rates of TnT, TnI and CK-MB were 89.5%, 84.2% and 57.9% respectively. There was a significant difference between troponin T and CK-MB. The specificities were 83.3%, 88.9% and 88.9% respectively. There was no statistic difference. CK-MB had elevation but neither TnT nor TnI was detected in non-cardiac patients. Conclusions Troponin biocard is easy to operate and sensitive for detection of Tn, and may be used in emergence department and bed side.
, 百拇医药
Key words: cardiac troponin; acute myocardial infarction; biocard
急性心肌梗塞(AMI)如能早期诊断和及时治疗可降低致死率。AMI的诊断主要依据病史、心电图、心肌酶学检查，心肌酶谱中肌酸激酶(CK-MB)被认为特异性高，在非心脏性疾病也有较高假阳性，以及存在着灵敏度低、持续时间短等缺点。近几年来多数研究报道肌钙蛋白T(TnT)及肌钙蛋白I(TnI)特异性及敏感性均优于CK-MB[1,2]，但也有不同意见[3] ，且目前所采用的放免法及酶联免疫法定量检查耗时长，对急诊诊断不便。我院自1997年1月至1998年4月用一步法免疫色谱干膜层析活性卡对37例高度可疑AMI病人快速检测血中TnT、TnI，并与CK-MB做对照，以探讨Tn特点及快速检测法的实用价值，现报道如下。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 检测对象 因胸痛或心电图异常而疑为AMI的急诊入院及住院患者共37例，其中男性34例，女性3例，年龄53～81岁，平均(69.7±5.4)岁，新入院病人入院后即采血及作心电图检查。胸痛至抽血时间3.5～78 h不等，原住院病人发病至采血时间2.5～12 h。
1.2 检测方法 采用芬兰安力生物科技有限公司提供的TnT、TnI活性卡，抽取静脉血1 ml，肝素抗凝，用微量管向试验卡内分别滴入150 µ l全血(也可用血浆、血清)，15 min内观察结果。检测区内显示两条线为阳性反应，一条线为阴性反应，二条线均不显示为无效。TnT、TnI阳性判断的临界值分别为0.2 μg/L及0.3 μg/L。同时抽血用日立7150全自动生化分析仪检测CK、CK-MB，参考值分别为140 U/L及15 U/L。
1.3 资料统计学分析 敏感性及特异性用计数资料的卡方检验。
2 结果
, 百拇医药
根据1979年WHO诊断标准，19例诊断为AMI，其中TnT阳性17例，TnI阳性16例，CK-MB阳性11例；16例为不稳定性心绞痛(UAP)，其中3例TnT阳性，2例TnI阳性，CK-MB均阴性。1例系统性红斑狼疮(SLE)，CK达1 085，CK-MB达32～62 U/L，另1例肺炎高热病人CK、CK-MB明显升高，Tn均阴性。
血TnT、TnI、CK-MB对诊断AMI效果如表所示，TnT与TnI敏感性无明显差异，TnT高于CK-MB(89% vs 57%，χ2 =4.8857, P <0.05)，TnI也高于CK-MB(84% vs 57%,χ2 =3.1986, P <0.1)，但无统计学意义，三者特异性之间无明显差异。
3 讨论
Tn是骨胳肌、心肌细胞收缩及结构蛋白的一种，主要由TnT、TnI、TnC三个亚基组成，大部分以结合型形式存在于细丝中，少部分以游离形式存在于细胞浆内。其中TnT及TnI是心肌特有的抗原，与骨胳肌无交叉反应[4] ，但在诊断AMI的敏感性文献报道颇具争议[1~3]。本研究通过一步法免疫色谱干膜层析活性卡检测19例AMI患者，结果显示TnT、TnI总体敏感性均高于CK-MB，但TnI与CK-MB之间无显著统计学差异，可能与观察例数少有关。有2例患者在胸痛后2.5～3 h采血，1例TnT阳性，1例TnI阳性。在发病后72 h入院的4例患者，3例TnT、TnI阳性，CK-MB均阴性，提示Tn敏感性高。这是因为当心肌细胞缺血受损时，Tn相对分子质量小，游离在细胞浆中的Tn便立即释放入血，而结合型Tn有一较长释放时间，在AMI发生5～7 d仍可通过血清Tn的测定进一步明确诊断；而CK-MB分子量大，释出稍慢，且在AMI发生50 h左右即恢复正常。
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16例UAP患者中，TnT阳性3例，TnI阳性2例，其中1例有OMI及慢性心功能不全，两项均阳性，两月后心衰死亡,1例一个月后发生AMI。文献报道Tn在UAP阳性率可达30%左右，Tn阳性是反映心肌损伤的特异性指标，是UAP患者预后差的独立预报因子[5,6]。一般研究用WHO标准诊断AMI(ST抬高、病理性Q波、CK-MB升高)，然而这些可能降低了诊断AMI的敏感性，小灶性非Q波AMI仅有轻微的心电图改变，CK、CK-MB不一定升高，由于在健康者血清中Tn含量很低，一旦发生微小心肌损伤，Tn释放入血，血中倍数变化大，易于检出。因此对于Tn阳性的UAP病人应视为高危人群。由此可见，Tn在检测微小病灶心肌细胞损伤的敏感性优于CK-MB活性检测，但在应用于鉴别AMI与UAP方面还待进一步观察 。
在非心肌梗塞患者中，1例SLE，1例肺炎高热，CK-MB均显著升高，而Tn均阴性。从本组病人总体来看，TnT、TnI、CK-MB特异性无统计学差别，但TnT、TnI阳性者均为心脏疾病，而CK-MB在非心脏疾病也出现阳性。据文献报道TnI特异性更优于TnT，因少数肾衰患者TnT阳性，故TnI更适于在复杂情况下用于鉴别心源性或非心源性疾病。
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综上所述，血TnT、TnI对AMI的诊断具有敏感性高、特异性强的特点，定量检测法操作复杂、耗时长，不能及时检测，限制了快速诊断的应用，而一步法免疫色谱干膜层析活性卡灵敏度高、特异性强，可以在15 min内得出结果，不需特殊仪器设备，仅需150 µ l全血、血浆或血清，尤其适用于急诊室怀疑为AMI的病人以及床旁检测，值得推广应用。
作者简介：曹淑芳，女，1950年出生,1990年毕业于第一军医大学,硕士,主治医师.
参考文献
1 王书奎，王自正，叶 飞等.肌钙蛋白T在急性心肌梗塞诊断中的应用.上海医学检验杂志,1997,12(2):87
2 Cummmins B，Cummuns P.Cardiac specific troponin I release in canine experimental myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol 1987,19:999
, 百拇医药
3 Mair J, Morandell D, Genser N et al. Equivalent early sensitivities of myoglobin, creatinin kinase MB mass, creatinin kinase isoform ratios, and cardiac troponins I and T for acute myocardial infarction. Clin Chem, 1995,41:1266
4 Mair J, Genser N, Morandell D et al. Cardiac troponin I in the diagnosis of myocardial injury and infarction. Clin Chim Acta, 1996,245(1):19
5 Magnus OE, Paul WA, Robert HC. Cardiac troponin T levels for risk stratification in acute myocardial ischemia. J New Eng Med,1996, 335: 1333
6 ElliottMA, Milenko JT, Brace T et al. Cardiac specific troponin I levels to predict the risk of mortality in patients with acute coronary syndromes. J New Eng Med, 1996,335:1342
(收稿日期：1998-08-15), 百拇医药
单位：广州军区广州总医院老年病三科；广州军区广州总医院医学检验科，广州，510010
关键词：肌钙蛋白；急性心肌梗塞；活性卡
第一军医大学学报990122 摘要：目的和方法 采用一步法免疫色谱干膜层析活性卡，快速检测19例急性心肌梗塞(AMI)患者血肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)，与CK-MB对照。结果 TnT、TnI和CK-MB的阳性率分别为89.5%，84.2%，57.9%，TnT与CK-MB之间有显著差异；三者特异性分别为83.3%，88.9%，88.9%，无统计学显著差异；在非心脏疾病者CK-MB也有升高，而Tn阴性。结论 Tn活性卡操作简便，灵敏性高，可用于急诊室及床旁检测。
中图分类号：R542.22
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Clinical use of one-step assay of cardiac troponin I and troponin T for diagnosis of acute myocardial infarction
Cao Shufang Huang Cuiyao
Department of Third Gerontology
Shi Lingbo2, Liu Suxia2
Department of Medical Laboratory, Guangzhou General Hospital of PLA, Guangzhou, 510010 Abstract: Objective and Methods Cardiac troponin I (TnI) and troponin T (TnT) were rapidly tested in 19 patients with acute myocardial infarction using one-step immune chromatographic biocard and compared with CK-MB. Results The positive rates of TnT, TnI and CK-MB were 89.5%, 84.2% and 57.9% respectively. There was a significant difference between troponin T and CK-MB. The specificities were 83.3%, 88.9% and 88.9% respectively. There was no statistic difference. CK-MB had elevation but neither TnT nor TnI was detected in non-cardiac patients. Conclusions Troponin biocard is easy to operate and sensitive for detection of Tn, and may be used in emergence department and bed side.
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Key words: cardiac troponin; acute myocardial infarction; biocard
急性心肌梗塞(AMI)如能早期诊断和及时治疗可降低致死率。AMI的诊断主要依据病史、心电图、心肌酶学检查，心肌酶谱中肌酸激酶(CK-MB)被认为特异性高，在非心脏性疾病也有较高假阳性，以及存在着灵敏度低、持续时间短等缺点。近几年来多数研究报道肌钙蛋白T(TnT)及肌钙蛋白I(TnI)特异性及敏感性均优于CK-MB[1,2]，但也有不同意见[3] ，且目前所采用的放免法及酶联免疫法定量检查耗时长，对急诊诊断不便。我院自1997年1月至1998年4月用一步法免疫色谱干膜层析活性卡对37例高度可疑AMI病人快速检测血中TnT、TnI，并与CK-MB做对照，以探讨Tn特点及快速检测法的实用价值，现报道如下。
1 材料与方法
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1.1 检测对象 因胸痛或心电图异常而疑为AMI的急诊入院及住院患者共37例，其中男性34例，女性3例，年龄53～81岁，平均(69.7±5.4)岁，新入院病人入院后即采血及作心电图检查。胸痛至抽血时间3.5～78 h不等，原住院病人发病至采血时间2.5～12 h。
1.2 检测方法 采用芬兰安力生物科技有限公司提供的TnT、TnI活性卡，抽取静脉血1 ml，肝素抗凝，用微量管向试验卡内分别滴入150 µ l全血(也可用血浆、血清)，15 min内观察结果。检测区内显示两条线为阳性反应，一条线为阴性反应，二条线均不显示为无效。TnT、TnI阳性判断的临界值分别为0.2 μg/L及0.3 μg/L。同时抽血用日立7150全自动生化分析仪检测CK、CK-MB，参考值分别为140 U/L及15 U/L。
1.3 资料统计学分析 敏感性及特异性用计数资料的卡方检验。
2 结果
, 百拇医药
根据1979年WHO诊断标准，19例诊断为AMI，其中TnT阳性17例，TnI阳性16例，CK-MB阳性11例；16例为不稳定性心绞痛(UAP)，其中3例TnT阳性，2例TnI阳性，CK-MB均阴性。1例系统性红斑狼疮(SLE)，CK达1 085，CK-MB达32～62 U/L，另1例肺炎高热病人CK、CK-MB明显升高，Tn均阴性。
血TnT、TnI、CK-MB对诊断AMI效果如表所示，TnT与TnI敏感性无明显差异，TnT高于CK-MB(89% vs 57%，χ2 =4.8857, P <0.05)，TnI也高于CK-MB(84% vs 57%,χ2 =3.1986, P <0.1)，但无统计学意义，三者特异性之间无明显差异。
3 讨论
Tn是骨胳肌、心肌细胞收缩及结构蛋白的一种，主要由TnT、TnI、TnC三个亚基组成，大部分以结合型形式存在于细丝中，少部分以游离形式存在于细胞浆内。其中TnT及TnI是心肌特有的抗原，与骨胳肌无交叉反应[4] ，但在诊断AMI的敏感性文献报道颇具争议[1~3]。本研究通过一步法免疫色谱干膜层析活性卡检测19例AMI患者，结果显示TnT、TnI总体敏感性均高于CK-MB，但TnI与CK-MB之间无显著统计学差异，可能与观察例数少有关。有2例患者在胸痛后2.5～3 h采血，1例TnT阳性，1例TnI阳性。在发病后72 h入院的4例患者，3例TnT、TnI阳性，CK-MB均阴性，提示Tn敏感性高。这是因为当心肌细胞缺血受损时，Tn相对分子质量小，游离在细胞浆中的Tn便立即释放入血，而结合型Tn有一较长释放时间，在AMI发生5～7 d仍可通过血清Tn的测定进一步明确诊断；而CK-MB分子量大，释出稍慢，且在AMI发生50 h左右即恢复正常。
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16例UAP患者中，TnT阳性3例，TnI阳性2例，其中1例有OMI及慢性心功能不全，两项均阳性，两月后心衰死亡,1例一个月后发生AMI。文献报道Tn在UAP阳性率可达30%左右，Tn阳性是反映心肌损伤的特异性指标，是UAP患者预后差的独立预报因子[5,6]。一般研究用WHO标准诊断AMI(ST抬高、病理性Q波、CK-MB升高)，然而这些可能降低了诊断AMI的敏感性，小灶性非Q波AMI仅有轻微的心电图改变，CK、CK-MB不一定升高，由于在健康者血清中Tn含量很低，一旦发生微小心肌损伤，Tn释放入血，血中倍数变化大，易于检出。因此对于Tn阳性的UAP病人应视为高危人群。由此可见，Tn在检测微小病灶心肌细胞损伤的敏感性优于CK-MB活性检测，但在应用于鉴别AMI与UAP方面还待进一步观察 。
在非心肌梗塞患者中，1例SLE，1例肺炎高热，CK-MB均显著升高，而Tn均阴性。从本组病人总体来看，TnT、TnI、CK-MB特异性无统计学差别，但TnT、TnI阳性者均为心脏疾病，而CK-MB在非心脏疾病也出现阳性。据文献报道TnI特异性更优于TnT，因少数肾衰患者TnT阳性，故TnI更适于在复杂情况下用于鉴别心源性或非心源性疾病。
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综上所述，血TnT、TnI对AMI的诊断具有敏感性高、特异性强的特点，定量检测法操作复杂、耗时长，不能及时检测，限制了快速诊断的应用，而一步法免疫色谱干膜层析活性卡灵敏度高、特异性强，可以在15 min内得出结果，不需特殊仪器设备，仅需150 µ l全血、血浆或血清，尤其适用于急诊室怀疑为AMI的病人以及床旁检测，值得推广应用。
作者简介：曹淑芳，女，1950年出生,1990年毕业于第一军医大学,硕士,主治医师.
参考文献
1 王书奎，王自正，叶 飞等.肌钙蛋白T在急性心肌梗塞诊断中的应用.上海医学检验杂志,1997,12(2):87
2 Cummmins B，Cummuns P.Cardiac specific troponin I release in canine experimental myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol 1987,19:999
, 百拇医药
3 Mair J, Morandell D, Genser N et al. Equivalent early sensitivities of myoglobin, creatinin kinase MB mass, creatinin kinase isoform ratios, and cardiac troponins I and T for acute myocardial infarction. Clin Chem, 1995,41:1266
4 Mair J, Genser N, Morandell D et al. Cardiac troponin I in the diagnosis of myocardial injury and infarction. Clin Chim Acta, 1996,245(1):19
5 Magnus OE, Paul WA, Robert HC. Cardiac troponin T levels for risk stratification in acute myocardial ischemia. J New Eng Med,1996, 335: 1333
6 ElliottMA, Milenko JT, Brace T et al. Cardiac specific troponin I levels to predict the risk of mortality in patients with acute coronary syndromes. J New Eng Med, 1996,335:1342
(收稿日期：1998-08-15), 百拇医药