抗内皮细胞抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中的意义
作者：耿辉 章友康 赵明辉 邹万忠 鄂洁 郑欣 王海燕
单位：100034 北京医科大学第一医院肾内科 北京医科大学肾脏病研究所
关键词：狼疮肾炎；免疫印迹
中华医学杂志990109 【摘要】 目的 探讨抗内皮细胞抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中的意义。方法 采用细胞酶联免疫吸附实验(ELISA)，对58例狼疮性肾炎病人血清进行抗内皮细胞抗体检测，并以提取的内皮细胞蛋白为抗原，应用免疫印迹方法对抗内皮细胞抗体的抗原进行了分析。结果 在58例狼疮性肾炎病人中抗内皮细胞抗体的阳性率为36%，抗内皮细胞抗体阳性病人具有血小板减少发生率增高(24%)，血清IgG水平增高(13±7) g/L，C3水平降低以及抗核抗体谱中多种抗体阳性率增高倾向。抗内皮细胞抗体可识别内皮细胞分子量12 000～90 000的多种蛋白成分，在伴有大量蛋白尿的狼疮性肾炎病人中，同时与内皮细胞分子量27 000，29 000抗原相结合抗体的阳性率(34%)明显高于非大量蛋白尿的病人(4%)(P<0.05)；在肾小球微血栓检出阳性的狼疮性肾炎病人中，与内皮细胞29 000抗原相结合抗体的阳性率(60%)明显高于未检出肾小球微血栓的病人(14%)。结论 抗内皮细胞抗体阳性狼疮性肾炎病人，常伴有较严重的自身免疫紊乱；与内皮细胞某些抗原成分相结合的抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中可能具有一定的意义。
, http://www.100md.com
The significance of antiendothelial cell antibodies in patients with lupus nephritis: A clinical and renal pathological study GENG Hui, ZHANG Youkang, ZHAO Minghui, et al. Department of Nephrology, The First Teaching School of Beijing Medical University, Beijing 100034
【Abstract】 Objective To investigate the prevalence and possible role of antiendothelial cell antibodies(AECA)in the pathogenesis of lupus nephritis. Methods Sera from 58 patients with lupus nephritis were studied. Cellular ELISA were used to detect AECA, and immunoblotting was performed to determine specific endothelial target.Results 36% of the patients with lupus nephritis had elevated IgG-AECA. IgG-AECA was correlated with the higher incidence of thrombocytopenia, higher serum immuoglobulin G levels, lower serum C3 (13±7) g/L and higher titers of antibodies against nucli and dsDNA. AECA consisted of a group of heterogeneous antibodies and reacted with different endothelial cell antigens ranging from 12 000 to 90 000 in molecular size. A correlation was demonstrated between heavy proteinuria (>3.5 g/24 hr) and the existence of antibodies simultaneously against the 27 000, 29 000 endothelial cell antigens (34% vs 4%), we also found an association between the presence of glomerular capillary thrombi and antibody against the 29 000 endothelial cell antigen (60% vs 14%). Conclusion These results suggested that lupus nephritis patients with AECA showed a complex autoimmune disorder and provided an indirect evidence that AECA might contribute to the pathogenesis of lupus nephritis.
, 百拇医药
【Key words】 Lupus nephritis Immunoblotting
(Natl Med J China, 1999, 79：31-33)
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是以血清中存在多种自身抗体为特点的自身免疫性疾病，抗内皮细胞抗体(anti-endothelial cell antibodies, AECA)一般被认为是以引起血管病变为特征的一种自身抗体。应用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosobent assay, ELISA)检测的AECA阳性SLE病人常伴有肾脏损害，但到目前为止，其确切的抗原尚不清楚，有关与内皮细胞不同分子量抗原相结合的抗体与狼疮性肾炎临床表现之间关系的报道甚少，且差异很大，尚少见这些抗体在狼疮性肾炎病理改变中的报道。本研究以体外培养的人脐带静脉内皮细胞为抗原，应用免疫印迹法确定AECA的靶抗原，并比较以不同分子量为抗原的AECA与临床及病理改变之间的关系。
, 百拇医药
对象与方法
一、对象
所选用病人均来自我院1994～1996年间肾活检病人，其中，狼疮性肾炎病人58例，男6例，女52例，平均年龄31.2±9.4岁。临床上均符合美国风湿病协会1982年修定SLE诊断标准，且具备狼疮性肾炎的临床和病理改变，这些病人在肾穿刺活检前4周内未接收甲基强的松龙或环磷酰胺冲击治疗。以微小病变肾病35例，其它肾脏疾患16例为对照。术前取血，分离血清，置-30℃保存。所有肾活检组织均经过常规病理学检查，包括(1)光镜检查：HE、PAS、PASM及Masson染色；(2)免疫荧光检查：对肾小球进行IgG、IgA、IgM、C3、C1q和纤维蛋白相关抗原检查；(3)透射电镜检查。
二、方法
1.培养的人脐静脉内皮细胞鉴定：体外培养的人脐静脉内皮细胞经相差显微镜观察，人Ⅷ因子相关抗原和透射电镜下Weibel-Palade小体检查，符合内皮细胞特征。
, 百拇医药
2.AECA的检测[1]：以体外培养的人脐带静脉内皮细胞为抗原，应用细胞ELISA方法进行AECA检测。490 nm波长酶标仪测定吸光度(A)，计算样本结合指数(binding index，BI)，BI=S-A/B-A，S为待测标本吸光度，A为空白对照吸光度，B为100份正常献血员血清混合对照品的吸光度。100份正常献血员血清为对照，以BI大于均数+2倍标准差(
±2s)为阳性。
3.内皮细胞蛋白的提取及免疫印迹方法对AECA靶抗原的检测[2]：用含有蛋白酶抑制剂(对甲苯酰氟1 mmol/L)的1%Triton X-100溶解缓冲液(pH7-6)溶解细胞，将提取的内皮细胞蛋白行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。将内皮细胞蛋白转移到硝酸纤维素膜上，用含2%脱脂奶粉的Tris缓冲液(pH7.2，0.05%吐温-20)封闭，依次加入1∶50稀释的待测血清，1∶3000稀释的碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG(sigma公司)显色。
, 百拇医药
4.Lendrum纤维素染色[3]：为清楚地显示肾小球微血栓，本研究对肾活检组织进行了Lendrum染色。步骤包括Bouin氏液固定；依次入天青石蓝染液，Mayer氏苏木素染液，分化液，0.5%酸性复红染液，MacFarland氏液，苯胺蓝染液，脱水，封片。
5.参照Austin等[4]的半定量打分方法判定肾脏病理病变情况。
三、统计学处理
计量资料两样本之间比较采用t检验，率的比较采用χ2检验。
结果
一、AECA在狼疮性肾炎病人临床和病理中的意义
58例狼疮性肾炎中IgG型AECA阳性率为36%；35例微小病变肾病病人血清AECA均阴性。AECA阳性病人有血小板减少发生率增高，血沉增快，血清IgG水平增高，C3水平降低，抗核抗体谱成分阳性率增高的特点；虽AECA阳性率在狼疮性肾炎各病理类型中的差异无显著意义(结果未显示)，也未发现AECA与狼疮性肾炎肾脏的活动和慢性病变指数有关，但AECA阳性狼疮性肾炎病人具有肾小球微血栓阳性率增高倾向(表1、表2)。
, 百拇医药
表1 AECA阳性与阴性狼疮性肾炎病人临床和病理指标阳性率比较 分组
血小板
<100×109/L
贫血*
尿红细胞
>3/HP
尿蛋白
>3.5g/24h
Scr>134
(μmol/L)
抗核抗体
, http://www.100md.com
阳性
抗dsDNA-
Ab阳性
抗RNP-
Ab阳性
肾小球
微血栓
AECA阳性
5/21(24)
13/21(62)
16/21(76)
16/21(76)
, http://www.100md.com 6/21(29)
18/21(86)
10/21(48)
9/21(43)
9/21(43)
AECA阴性
1/36(3)
16/37(43)
25/36(69)
19/37(51)
11/36(31)
20/36(56)
, 百拇医药
2/36(6)
7/36(19)
6/37(16)
P值
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
<0.01
>0.05
<0.05
, http://www.100md.com
注：括号内为百分数* 男性<120 g/L, 女性<110 g/L表2 AECA阳性与阴性狼疮性肾炎病人临床和病理指标比较(±2s)
分组
血沉
(mm/h)
血清
IgG(g/L)
血清
C3(g/L)
病变活
动指数
, 百拇医药
病变慢
性指数
AECA阳性
90±44
(21)
13±7
(21)
0.5±0.3
(21)
5±3
(21)
3±2
(21)
, 百拇医药
AECA阴性
58±41
(34)
9±4
(35)
0.7±0.3
(36)
5±4
(37)
3±2
(37)
P值
<0.01
, 百拇医药
<0.01
<0.05
>0.05
>0.05
注：括号内为例数
二、AECA的靶抗原及其在狼疮性肾炎中的意义
在提取的内皮细胞蛋白非还原状态下，免疫印迹法显示IgG型AECA的抗原分子量为12 000～90 000一组内皮细胞蛋白。细胞ELISA方法检测的AECA阳性血清与阴性血清比较，其与内皮细胞抗原结合的抗体条带数量多且颜色较深，两种方法具有较好的一致性(图1)。
注：A～F：ELISA法IgG-AECA阳性的狼疮病人血清；G～L：ELISA法IgG-AECA阴性的狼疮病人血清；M、N：正常人血清，O：空白对照
, 百拇医药
图1 免疫印迹方法检测的IgG-AECA
在出现大量蛋白尿(大于3.5 g/24 h)的病人中，与内皮细胞分子量27 000和29 000抗原相结合的抗体阳性率有增高倾向，但无统计学意义；而这两组抗体同时阳性的比例在大量蛋白尿病人中为34%(12/35)，明显高于非大量蛋白尿的病人(23例病人中只有1例阳性，阳性率为4%，P<0.05)。但与不同内皮细胞抗原相结合的抗体阳性率，在肾功能正常病人与肾功能减退病人之间，以及伴有血尿病人和无血尿病人之间差异无显著意义。
免疫印迹法显示的与内皮细胞不同抗原成分结合的抗体在狼疮性肾炎不同病理类型之间无显著性差异，其病理活动指数和慢性指数也无显著性差异。但与内皮细胞分子量29 000抗原相结合抗体的阳性率，在有肾小球微血栓检出的病人中为60%(9/15)，明显高于肾小球微血栓未检出的病人14%(6/43)，具有高度显著性差异(P<0.01)。
, 百拇医药 我们对12份正常人和16例其它肾小球疾病血清进行免疫印迹方法AECA检测，在正常人中，只有一份血清出现一条分子量80 000的条带。肾小球疾病中个别病人血清出现极弱的分子量34 000，43 000，60 000，68 000，80 000条带，未发现与16 000，20 000，27 000，29 000内皮细胞抗原相结合的抗体，提示与这些抗原相结合的抗体是狼疮性肾炎病人较特异的。
讨论
在既往的研究中，采用ELISA方法检测的AECA在狼疮病人中的阳性率为19%～84%[5]，各家间报道差异甚大。在本研究中，狼疮性肾炎病人AECA的阳性率为36%，与多数结果相近。一些研究显示，ACEA阳性的SLE病人多伴有狼疮性肾炎表现，AECA的滴度与狼疮性肾炎病变活动有关[6，7]。而另一些报道显示AECA具有抗磷脂抗体相近的临床意义[8]。本研究结果显示，IgG-AECA阳性病人具有血小板减少，血沉增快，血清IgG水平增高，C3水平降低和抗核抗体谱成分阳性率增高的特点。这实际上反映了AECA阳性病人具有较严重的自身免疫紊乱，伴有多种自身抗体的倾向。本研究应用Lendrum染色方法对狼疮性肾炎肾脏组织进行肾小球微血栓检查，结果显示AECA阳性病人肾小球微血栓检出率较高，提示抗内皮细胞抗体可能与肾小球微血栓的形成有一定的联系。
, 百拇医药
应用免疫印迹方法可以检测出AECA中针对不同抗原成分的特异性抗体，国外虽有少数报道但差异甚大[5，9]。本结果发现在同一狼疮性肾炎病人血清中可存在有识别内皮细胞多种不同分子量蛋白的抗体，而不同病人血清所识别的蛋白条带也不尽相同，进一步证实狼疮性肾炎中AECA为一组异质性自身抗体。我们的研究结果表明与内皮细胞某些抗原成分相结合的抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中可能具有一定的意义，进一步明确这些与疾病相关的内皮细胞蛋白抗原的性质，在探讨狼疮性肾炎的发病机制方面可能具有积极作用。
参考文献
[1] Voshio T, Masuyama J, Sumiya M, et al. Antiendothelial cell antibodies and their relation to pulmonary hypertension in SLE. J Rheumatol, 1994, 21: 2058-2063.
, 百拇医药
[2] Allan M. Weissman isolubilization of cellular proteins. Currunt protocols in immunology. London: Greene Publishing Associated and Wiley-Interscience. 1991. 1-8.
[3] 邹万忠.肾脏病理与临床.长沙：湖南科学技术出版社.1993.4-8.
[4] Austin HA III, Muenz LR, Joyce KM, et al. Diffuse proliferative lupus nephritis: identification of specific pathologic features affecting renal outcome. Kidney Int, 1984, 25:689-695.
[5] Li JS, Liu MF, Lei HY. Characterization of anti-endothelial cell antibodies in the parients with systemic lupus erythematosus: a potential marker for disease activity. Clin Immunol Immupathol, 1996, 79：211-216.
, 百拇医药
[6] Chan TM, Cheng IKP. A prospective study on antiendothelial cell antibodies in patients with systemic lupus erythematosus. Clin Immunol Immupathol, 1996, 78：41-46.
[7] Perry GJ, Elstin T, Khouri NA, et al. Anti-endothelial cell antibodies in lupus: correlations with renal injury and circulating markers of endothelial damage. Q J Med, 1993. 86: 727-734.
[8] Hill MB, Phipps L, Malia GR, et al. Characterization and specificity of antiendothelial cell membrane antibodies and their relationship to thrombosis in primary antiphospholipid syndrome. Clin Exp Immunol, 1995, 102: 268-272.
[9] van der Zee JM, Sigert CEH, de Vreede TA, et al. Characterization of anti-endothelial cell antibodies in systemic lupus erythematosus. Clin Exp Immutnol, 1991, 84: 238-244.
收稿：1998-02-16 修回：1998-09-28, http://www.100md.com
单位：100034 北京医科大学第一医院肾内科 北京医科大学肾脏病研究所
关键词：狼疮肾炎；免疫印迹
中华医学杂志990109 【摘要】 目的 探讨抗内皮细胞抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中的意义。方法 采用细胞酶联免疫吸附实验(ELISA)，对58例狼疮性肾炎病人血清进行抗内皮细胞抗体检测，并以提取的内皮细胞蛋白为抗原，应用免疫印迹方法对抗内皮细胞抗体的抗原进行了分析。结果 在58例狼疮性肾炎病人中抗内皮细胞抗体的阳性率为36%，抗内皮细胞抗体阳性病人具有血小板减少发生率增高(24%)，血清IgG水平增高(13±7) g/L，C3水平降低以及抗核抗体谱中多种抗体阳性率增高倾向。抗内皮细胞抗体可识别内皮细胞分子量12 000～90 000的多种蛋白成分，在伴有大量蛋白尿的狼疮性肾炎病人中，同时与内皮细胞分子量27 000，29 000抗原相结合抗体的阳性率(34%)明显高于非大量蛋白尿的病人(4%)(P<0.05)；在肾小球微血栓检出阳性的狼疮性肾炎病人中，与内皮细胞29 000抗原相结合抗体的阳性率(60%)明显高于未检出肾小球微血栓的病人(14%)。结论 抗内皮细胞抗体阳性狼疮性肾炎病人，常伴有较严重的自身免疫紊乱；与内皮细胞某些抗原成分相结合的抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中可能具有一定的意义。
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The significance of antiendothelial cell antibodies in patients with lupus nephritis: A clinical and renal pathological study GENG Hui, ZHANG Youkang, ZHAO Minghui, et al. Department of Nephrology, The First Teaching School of Beijing Medical University, Beijing 100034
【Abstract】 Objective To investigate the prevalence and possible role of antiendothelial cell antibodies(AECA)in the pathogenesis of lupus nephritis. Methods Sera from 58 patients with lupus nephritis were studied. Cellular ELISA were used to detect AECA, and immunoblotting was performed to determine specific endothelial target.Results 36% of the patients with lupus nephritis had elevated IgG-AECA. IgG-AECA was correlated with the higher incidence of thrombocytopenia, higher serum immuoglobulin G levels, lower serum C3 (13±7) g/L and higher titers of antibodies against nucli and dsDNA. AECA consisted of a group of heterogeneous antibodies and reacted with different endothelial cell antigens ranging from 12 000 to 90 000 in molecular size. A correlation was demonstrated between heavy proteinuria (>3.5 g/24 hr) and the existence of antibodies simultaneously against the 27 000, 29 000 endothelial cell antigens (34% vs 4%), we also found an association between the presence of glomerular capillary thrombi and antibody against the 29 000 endothelial cell antigen (60% vs 14%). Conclusion These results suggested that lupus nephritis patients with AECA showed a complex autoimmune disorder and provided an indirect evidence that AECA might contribute to the pathogenesis of lupus nephritis.
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【Key words】 Lupus nephritis Immunoblotting
(Natl Med J China, 1999, 79：31-33)
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是以血清中存在多种自身抗体为特点的自身免疫性疾病，抗内皮细胞抗体(anti-endothelial cell antibodies, AECA)一般被认为是以引起血管病变为特征的一种自身抗体。应用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosobent assay, ELISA)检测的AECA阳性SLE病人常伴有肾脏损害，但到目前为止，其确切的抗原尚不清楚，有关与内皮细胞不同分子量抗原相结合的抗体与狼疮性肾炎临床表现之间关系的报道甚少，且差异很大，尚少见这些抗体在狼疮性肾炎病理改变中的报道。本研究以体外培养的人脐带静脉内皮细胞为抗原，应用免疫印迹法确定AECA的靶抗原，并比较以不同分子量为抗原的AECA与临床及病理改变之间的关系。
, 百拇医药
对象与方法
一、对象
所选用病人均来自我院1994～1996年间肾活检病人，其中，狼疮性肾炎病人58例，男6例，女52例，平均年龄31.2±9.4岁。临床上均符合美国风湿病协会1982年修定SLE诊断标准，且具备狼疮性肾炎的临床和病理改变，这些病人在肾穿刺活检前4周内未接收甲基强的松龙或环磷酰胺冲击治疗。以微小病变肾病35例，其它肾脏疾患16例为对照。术前取血，分离血清，置-30℃保存。所有肾活检组织均经过常规病理学检查，包括(1)光镜检查：HE、PAS、PASM及Masson染色；(2)免疫荧光检查：对肾小球进行IgG、IgA、IgM、C3、C1q和纤维蛋白相关抗原检查；(3)透射电镜检查。
二、方法
1.培养的人脐静脉内皮细胞鉴定：体外培养的人脐静脉内皮细胞经相差显微镜观察，人Ⅷ因子相关抗原和透射电镜下Weibel-Palade小体检查，符合内皮细胞特征。
, 百拇医药
2.AECA的检测[1]：以体外培养的人脐带静脉内皮细胞为抗原，应用细胞ELISA方法进行AECA检测。490 nm波长酶标仪测定吸光度(A)，计算样本结合指数(binding index，BI)，BI=S-A/B-A，S为待测标本吸光度，A为空白对照吸光度，B为100份正常献血员血清混合对照品的吸光度。100份正常献血员血清为对照，以BI大于均数+2倍标准差(
±2s)为阳性。3.内皮细胞蛋白的提取及免疫印迹方法对AECA靶抗原的检测[2]：用含有蛋白酶抑制剂(对甲苯酰氟1 mmol/L)的1%Triton X-100溶解缓冲液(pH7-6)溶解细胞，将提取的内皮细胞蛋白行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。将内皮细胞蛋白转移到硝酸纤维素膜上，用含2%脱脂奶粉的Tris缓冲液(pH7.2，0.05%吐温-20)封闭，依次加入1∶50稀释的待测血清，1∶3000稀释的碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG(sigma公司)显色。
, 百拇医药
4.Lendrum纤维素染色[3]：为清楚地显示肾小球微血栓，本研究对肾活检组织进行了Lendrum染色。步骤包括Bouin氏液固定；依次入天青石蓝染液，Mayer氏苏木素染液，分化液，0.5%酸性复红染液，MacFarland氏液，苯胺蓝染液，脱水，封片。
5.参照Austin等[4]的半定量打分方法判定肾脏病理病变情况。
三、统计学处理
计量资料两样本之间比较采用t检验，率的比较采用χ2检验。
结果
一、AECA在狼疮性肾炎病人临床和病理中的意义
58例狼疮性肾炎中IgG型AECA阳性率为36%；35例微小病变肾病病人血清AECA均阴性。AECA阳性病人有血小板减少发生率增高，血沉增快，血清IgG水平增高，C3水平降低，抗核抗体谱成分阳性率增高的特点；虽AECA阳性率在狼疮性肾炎各病理类型中的差异无显著意义(结果未显示)，也未发现AECA与狼疮性肾炎肾脏的活动和慢性病变指数有关，但AECA阳性狼疮性肾炎病人具有肾小球微血栓阳性率增高倾向(表1、表2)。
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表1 AECA阳性与阴性狼疮性肾炎病人临床和病理指标阳性率比较 分组
血小板
<100×109/L
贫血*
尿红细胞
>3/HP
尿蛋白
>3.5g/24h
Scr>134
(μmol/L)
抗核抗体
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阳性
抗dsDNA-
Ab阳性
抗RNP-
Ab阳性
肾小球
微血栓
AECA阳性
5/21(24)
13/21(62)
16/21(76)
16/21(76)
, http://www.100md.com 6/21(29)
18/21(86)
10/21(48)
9/21(43)
9/21(43)
AECA阴性
1/36(3)
16/37(43)
25/36(69)
19/37(51)
11/36(31)
20/36(56)
, 百拇医药
2/36(6)
7/36(19)
6/37(16)
P值
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
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>0.05
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注：括号内为百分数* 男性<120 g/L, 女性<110 g/L表2 AECA阳性与阴性狼疮性肾炎病人临床和病理指标比较(
±2s)分组
血沉
(mm/h)
血清
IgG(g/L)
血清
C3(g/L)
病变活
动指数
, 百拇医药
病变慢
性指数
AECA阳性
90±44
(21)
13±7
(21)
0.5±0.3
(21)
5±3
(21)
3±2
(21)
, 百拇医药
AECA阴性
58±41
(34)
9±4
(35)
0.7±0.3
(36)
5±4
(37)
3±2
(37)
P值
<0.01
, 百拇医药
<0.01
<0.05
>0.05
>0.05
注：括号内为例数
二、AECA的靶抗原及其在狼疮性肾炎中的意义
在提取的内皮细胞蛋白非还原状态下，免疫印迹法显示IgG型AECA的抗原分子量为12 000～90 000一组内皮细胞蛋白。细胞ELISA方法检测的AECA阳性血清与阴性血清比较，其与内皮细胞抗原结合的抗体条带数量多且颜色较深，两种方法具有较好的一致性(图1)。
注：A～F：ELISA法IgG-AECA阳性的狼疮病人血清；G～L：ELISA法IgG-AECA阴性的狼疮病人血清；M、N：正常人血清，O：空白对照
, 百拇医药
图1 免疫印迹方法检测的IgG-AECA
在出现大量蛋白尿(大于3.5 g/24 h)的病人中，与内皮细胞分子量27 000和29 000抗原相结合的抗体阳性率有增高倾向，但无统计学意义；而这两组抗体同时阳性的比例在大量蛋白尿病人中为34%(12/35)，明显高于非大量蛋白尿的病人(23例病人中只有1例阳性，阳性率为4%，P<0.05)。但与不同内皮细胞抗原相结合的抗体阳性率，在肾功能正常病人与肾功能减退病人之间，以及伴有血尿病人和无血尿病人之间差异无显著意义。
免疫印迹法显示的与内皮细胞不同抗原成分结合的抗体在狼疮性肾炎不同病理类型之间无显著性差异，其病理活动指数和慢性指数也无显著性差异。但与内皮细胞分子量29 000抗原相结合抗体的阳性率，在有肾小球微血栓检出的病人中为60%(9/15)，明显高于肾小球微血栓未检出的病人14%(6/43)，具有高度显著性差异(P<0.01)。
, 百拇医药 我们对12份正常人和16例其它肾小球疾病血清进行免疫印迹方法AECA检测，在正常人中，只有一份血清出现一条分子量80 000的条带。肾小球疾病中个别病人血清出现极弱的分子量34 000，43 000，60 000，68 000，80 000条带，未发现与16 000，20 000，27 000，29 000内皮细胞抗原相结合的抗体，提示与这些抗原相结合的抗体是狼疮性肾炎病人较特异的。
讨论
在既往的研究中，采用ELISA方法检测的AECA在狼疮病人中的阳性率为19%～84%[5]，各家间报道差异甚大。在本研究中，狼疮性肾炎病人AECA的阳性率为36%，与多数结果相近。一些研究显示，ACEA阳性的SLE病人多伴有狼疮性肾炎表现，AECA的滴度与狼疮性肾炎病变活动有关[6，7]。而另一些报道显示AECA具有抗磷脂抗体相近的临床意义[8]。本研究结果显示，IgG-AECA阳性病人具有血小板减少，血沉增快，血清IgG水平增高，C3水平降低和抗核抗体谱成分阳性率增高的特点。这实际上反映了AECA阳性病人具有较严重的自身免疫紊乱，伴有多种自身抗体的倾向。本研究应用Lendrum染色方法对狼疮性肾炎肾脏组织进行肾小球微血栓检查，结果显示AECA阳性病人肾小球微血栓检出率较高，提示抗内皮细胞抗体可能与肾小球微血栓的形成有一定的联系。
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应用免疫印迹方法可以检测出AECA中针对不同抗原成分的特异性抗体，国外虽有少数报道但差异甚大[5，9]。本结果发现在同一狼疮性肾炎病人血清中可存在有识别内皮细胞多种不同分子量蛋白的抗体，而不同病人血清所识别的蛋白条带也不尽相同，进一步证实狼疮性肾炎中AECA为一组异质性自身抗体。我们的研究结果表明与内皮细胞某些抗原成分相结合的抗体在狼疮性肾炎临床和病理改变中可能具有一定的意义，进一步明确这些与疾病相关的内皮细胞蛋白抗原的性质，在探讨狼疮性肾炎的发病机制方面可能具有积极作用。
参考文献
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收稿：1998-02-16 修回：1998-09-28, http://www.100md.com