脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠贮脂细胞的影响
作者：王 炯 李定国 陆汉明 孙志广 蒋祖民 徐芹芳 顾鹤定 陈颖伟
单位：上海第二医科大学附属新华医院 200092
关键词：肝硬化；脂蛋白，低密度；尼卡地平；维拉帕米；贮脂细胞
世界华人消化杂志990121 中国图书资料分类号 R575.2
摘 要
目的 观察脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠贮脂细胞增殖、透明质酸及胶原合成的影响.
方法 通过MTT法，透明质酸放射免疫分析法及3H-脯氨酸掺入法测定了低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、钙拮抗剂尼卡地平(Nicardipine, Nic)和维拉帕米(Verapamil, Ver)及其联合应用对大鼠贮脂细胞(fat-storing cell, Fsc)增殖、透明质酸(hyaluronic, HA)及胶原合成的影响.
, 百拇医药
结果 LDL能促进FSC增殖、HA及胶原合成，同时Nic及Ver对LDL刺激引起的FSC增殖、胶原合成有明显的抑制作用，但对HA的抑制作用不明显.
结论 LDL参与FSC的增殖及细胞外基质的合成，Nic及Ver则有对抗LDL的作用.
Effect of low density lipoprotein and calcium antigonists on fat-storing
cells in rat
WANG Jiong, LI Ding-Guo, LU Han-Ming, SUN Zhi-Guang, JIANG Zu-Min, XU Qin-Fang, GU He-Ding and CHEN Ying-Wei
Department of Digestive Diseases, Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092, China
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis; lipoprotein, low density; nicardipine; verapamil; fat-storing cell
Abstract
AIM To observe the effect of low density lipoprotein and calcium antagonists on the proliferation, HA and collagen synthesis of fat-storing cells (FSCs).
METHODS In this study, the effect of low density lipoprotein (LDL) and calcium antafonists-Nicardipine (Nic) and Verapamil (Ver) and the combination of them on the proliferation, HA and collagen synthesis of fat-storing cells (FSCs) were determined by MTT colorimetric assay, hyaluronic acid radioimmunoassay and 3H-proline incorporation assay were used to determine the effects of above factors.
, 百拇医药
RESULTS LDL could accelerate the proliferation, HA and collagen synthesis of FSCs. Nic and Ver could inhibit the proliferation and collagen synthesis of FSCs. Ver also inhibited the HA synthesis. Meanwhile, Nic and Ver had marked inhibitive effects on proliferation and collagen synthesis of FSCs stimulated by LDL, but the inhibition on synthesis of HA was not obvious.
CONCLUSION LDL is involved in the proliferation and synthesis of HA and collagen of FSCs. Nic and Ver had resistant effects on LDL.
, 百拇医药
0 引言
肝纤维化时贮脂细胞(fat-storing cell, FSC)大量增殖分化，其质膜的合成需要胆固醇，而低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)是胆固醇、胆固醇酯运载的载体；新近发现，它还具有刺激多种细胞胞内钙离子浓度升高，促进细胞增殖等多种作用[1,2]. 本文将就LDL对FSC增殖、合成细胞外基质的影响进行探讨，并观察已发现有抗肝纤维化作用的钙拮抗剂与它的相互关系.
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 ♂ SD大鼠，体重400g～500g，由中国科学院上海实验动物中心提供.
1.1.2 主要试剂 胶原酶，Pronase E, Nycodenze, 尼卡地平均购自Sigma公司，MTT购自Fluka公司，透明质酸放射免疫分析测定盒购自上海海军医学研究所，3H-脯氨酸购自中国原子能科学研究院. 维拉帕米购自Knoll公司.
, 百拇医药
1.1.3 分组 LDL不同剂量组(分别为25，50，100mg/L)、Nic组(25mg/L)、Ver组(50mg/L)、LDL(100mg/L)+Nic(25mg/L)、LDL(100mg/L)+Ver(50mg/L)组及对照组
1.1.4 大鼠FSC的分离、鉴定 采用胶原酶与Pronase E联合消化,Nycodenze一步密度梯度离心法分离，免疫组化鉴定FSC的Desmin，台盼蓝染色计数，细胞活力大于85%，得率达1～3×107/肝.
1.1.5 LDL的制备 正常人血清经超速离心制得LDL，微孔滤器过滤除菌，4℃中储存，3wk内使用，其纯度用聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定证明无其他组分污染.
1.2 方法
1.2.1 LDL及钙拮抗剂对FSC增殖的影响 采用MTT法.取培养4d～6d的大鼠FSC，调整浓度至1×105/mL，接种于96孔细胞培养板中，每孔200μL细胞悬液，按上述分组法加药，每种处理作3复孔. 培养48h后每孔加5mg/mL的MTT 20μL，反应7h，用快速翻板法去除培养液，加DMSO，30min后测定570nm处的吸光值(A).
, 百拇医药
1.2.2 LDL、钙拮抗剂对HA的影响 按照透明质酸放射免疫分析测定盒说明书操作. 分组同前，每个样品作双复管，HA的含量在FMJ-182放射免疫γ计数仪上测得.
1.2.3 LDL、钙拮抗剂对3H-脯氨酸掺入的影响 按1×105/mL密度接种FSC于24孔细胞培养板上，孵育48h后更换新培养液(无血清，含2μci[3H]脯氨酸)，同时按上述分组加入处理因素，每种处理作3复孔，再孵育48h，将细胞取出用胰酶离散并收集于玻璃纤维滤膜，用0.9% NaCl洗涤后用乙醇冲洗，室温下干燥，置于闪烁瓶内，并加入10mL闪烁液，12h后进行闪烁计数.
2 结果
LDL能明显促进FSC增殖；单独应用Nic或Ver均能显著抑制FSC的增殖，两者间无统计学差异(P>0.05)；Nic及Ver还能拮抗LDL刺激的FSC增殖，但结果仍高于对照组(P<0.01，表1).
, http://www.100md.com
LDL能非常明显地升高HA值；Nic能降低FSC合成HA，但无统计学意义(P>0.05)，Ver能显著地抑制HA的合成(P<0.05)；Nic及Ver对抗LDL升HA的作用不明显(P>0.05，表2).
表1 脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠FSC增殖的影响
(
±s) 组别
剂量
A值
对照组
0.2547±0.0407
LDL
25
, 百拇医药
0.3077±0.044a
50
0.3500±0.065b
100
0.3763±0.038b
Nic
25
0.1713±0.046b
Ver
50
0.1990±0.024b
, http://www.100md.com
LDL+Nic
100+25
0.3020±0.029bd
LDL+Ver
100+50
0.3143±0.037bd
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组；dP<0.01，vs LDL(100μg/mg)组.
LDL促进FSC胶原合成的作用随着剂量的增大愈发明显；钙拮抗剂Nic及Ver均能非常显著地抑制胶原合成，且Nic的作用明显强于Ver(P<0.01)；Nic能非常显著地抑制LDL促进的胶原合成(P<0.01)，且抑制程度达到对照组之下(P<0.01)，Ver亦能非常显著地抑制LDL促进的胶原合成(P<0.01)，但抑制程度未达到对照组之下(P>0.05，表2).
, http://www.100md.com
表2 脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠FSC合成透明质酸及胶原的影响
(±s)
组别
剂量(mg/mL)
透明质酸含量(ng/mL)
脯氨酸掺入(cpm)
对照组
131.088±12.33
14955±2114
LDL
, http://www.100md.com 25
362.73±19.13b
22420±1963b
50
398.69±25.46b
29639±2805b
100
535.44±32.12b
30380±4411b
Nic
, 百拇医药 25
126.82±29.11
931±78b
Ver
50
110.65±37.92a
1881±126b
LDL+Nic
100+25
476.20±134.27bc
7977±760bd
, 百拇医药
LDL+Ver
100+50
466.19±72.34bc
16459±3621d
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组；cP<0.05，dP<0.01，vs LDL(100mg/L)组.
3 讨论
脂质在生物体内具有供能及组成细胞结构等功能，而脂蛋白是胞质内外脂质转运的重要运载系统. LDL是脂蛋白一种，通常，它能作为胆固醇、胆固醇酯运载的载体，而目前发现LDL还具有刺激多种细胞胞内钙离子浓度升高，促进细胞增殖等多种作用[1-3].
, 百拇医药
游离胆固醇为生物膜的重要组成部分，在细胞质膜中含量较高. 分裂增生的细胞对胆固醇需求剧增，以满足合成质膜的需要. 没有胆固醇的细胞将停止生长与分裂. 静止状态的细胞通过细胞膜上LDL受体优先摄取外源性胆固醇，维持细胞质膜的新陈代谢；分裂增生期的细胞为获取额外的胆固醇，一方面通过提高膜上LDL受体活性，摄取更多的外源性胆固醇，另一方面则加强自身内源性胆固醇的合成[4].
本实验中观察到LDL在剂量25μg/mL～100μg/mL范围内，能显著促进FSC增殖，与其他学者[5]观察到的LDL在10μg/mL～100μg/mL范围内能加速细胞分裂，从而促进血管内皮细胞增殖相一致. 钙拮抗剂Nic及Ver对FSC增殖具有抑制作用，同时它们都能抑制LDL刺激所引致的FSC增殖增加. 这些结果可能与LDL引起的FSC胞内钙离子浓度升高及钙拮抗剂引起的钙离子浓度降低有关，因为一定水平的钙离子是细胞增殖所必须的，故钙离子水平降低会使细胞增殖受阻同时LDL能促进FSC增殖还可能与其增加细胞内游离胆固醇浓度有关.
, 百拇医药
透明质酸是一种大分子蛋白多糖，是构成基质的重要成分[6，7]，纯化的鼠肝细胞体外研究提示肝内FSC是正常肝脏合成HA的主要部位[8]，FSC“激活”后HA合成量增加，肝内皮细胞是清除血清中HA的主要场所[9]. 肝硬变时血清内源性 HA水平升高是由于产生HA过多及清除减少所致，其血清水平能同时反映肝纤维化的活动和肝功能损害的程度[10，11]. 本实验中，LDL能增加FSC的HA合成量，Nic能降低HA的量，但其改变无统计学意义(P>0.05)，Ver能明显降低HA的量，Nic及Ver对LDL引起的HA量增加都有一定抑制作用，但均无统计学差异(P>0.05).
FSC“激活”后，其产生胶原的单量及种类均发生改变，肝纤维化时，HA的升高与血清Ⅲ型前胶原(PⅢP)显著相关，说明HA与作为纤维化发生一部分的胶原Ⅲ合成呈平行关系[12]，胶原和HA的合成过程中是否需要LDL受体及钙离子-钙调蛋白系统的参与，目前尚不清楚. 本实验观察到LDL能明显促进胶原的生成，Ver及Nic均能抑制胶原的生成，且对LDL的上述作用有一定的抑制，而且Nic的作用明显强于Ver. Nic在抑制HA及胶原合成中表现出的不一致性，可能涉及其作用机制的多样性.
, 百拇医药
作者简介：王炯，女，1969-12-10生，上海市人，汉族. 1993年上海第二医科大学本科毕业，1996年上海第二医科大学硕士研究生毕业，后工作于上海第二医科大学附属新华医院.
通讯作者 王炯，200092，上海第二医科大学附属新华医院.
Correspondence to:WANG Jiong, Department of Digestive Diseases, Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092, China
4 参考文献
[1] Sachinidis A, YonKo, Wiezorek A. Lipoproteins induce expression of the early growth response gene-1 in vascular somooth muscle cells from rat. Biochem Biophys Rex Commun, 1993;192:796-798
, 百拇医药
[2] Hermann H, Martin R, Carsten L. LDL increases [Ca2+]I in human endothelial cells and augments thrombininduced cell signalling. J Lab Clin Med, 1994;124:710-713
[3]Tasaki H, Yamashita K, Nakashima Y. Increase in intracellular calcium ion in smooth muscle cells induced by low-density lipoprotein. Gerontology, 1994;40(Suppl 2):23-28
[4] 蔡海江. 血浆脂蛋白与动脉粥样硬化. 宋正行主编. 支脉粥样硬化与冠心病. 第1版. 北京：人民卫生出版社，1982：61-75
, 百拇医药
[5] Jean PT, Jannie C, Denis G. Effect of high and low density lipoproteins on proliferation of culltured bovine vascular endothelial cells. J Clin Invest, 1980;66:696-708
[6] Bernanke DH, Markward RR. Effects of two glycosaminoglycans on seeding of cardiac cushion tissue cell into a collagen-lattice culture system. Anatom Record, 1984;210:25-28
[7] Bissel DM. Cell-matrix interaction and hepatic fibrosois. Prog Liver Dis, 1989;9:143-148
, 百拇医药
[8] Gressner AM, Haarman R. Hyaluronic acid systhesis and scretion by rat liver fat storing cells (perisinu soidal lipocytes) in culture. Biochem Biophysi Res Commun, 1988;151:225-229
[9] Smedsrod B, Pertoft H, Eriksson S. Studies in vitro on the uptake and degradation of sokium hyaluronate in rat liver endothelial cells. Biochem J, 1984;1223:621-626
[10] Gressner AM. Regulation of hyaluronate syntehesis in rat liver fat storing cell cultures by Kupffer cells. J Hepatol, 1988;5:638-642
, 百拇医药
[11] Engstrom LA, Loof L, Nyberg A. Increased serum levels of hyaluronate in liver desease. Hepatology, 1985;5:638-642
[12] Bentsen KD, Horn T, Risteli J. Serum aminoterminal type Ⅲ procollagen peptide and the 7s domain of type Ⅳ collagen in patients with alcohol abuse. Liver, 1987;7:342-347
收稿日期 1997-06-15, http://www.100md.com
单位：上海第二医科大学附属新华医院 200092
关键词：肝硬化；脂蛋白，低密度；尼卡地平；维拉帕米；贮脂细胞
世界华人消化杂志990121 中国图书资料分类号 R575.2
摘 要
目的 观察脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠贮脂细胞增殖、透明质酸及胶原合成的影响.
方法 通过MTT法，透明质酸放射免疫分析法及3H-脯氨酸掺入法测定了低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、钙拮抗剂尼卡地平(Nicardipine, Nic)和维拉帕米(Verapamil, Ver)及其联合应用对大鼠贮脂细胞(fat-storing cell, Fsc)增殖、透明质酸(hyaluronic, HA)及胶原合成的影响.
, 百拇医药
结果 LDL能促进FSC增殖、HA及胶原合成，同时Nic及Ver对LDL刺激引起的FSC增殖、胶原合成有明显的抑制作用，但对HA的抑制作用不明显.
结论 LDL参与FSC的增殖及细胞外基质的合成，Nic及Ver则有对抗LDL的作用.
Effect of low density lipoprotein and calcium antigonists on fat-storing
cells in rat
WANG Jiong, LI Ding-Guo, LU Han-Ming, SUN Zhi-Guang, JIANG Zu-Min, XU Qin-Fang, GU He-Ding and CHEN Ying-Wei
Department of Digestive Diseases, Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092, China
, 百拇医药
Subject headings liver cirrhosis; lipoprotein, low density; nicardipine; verapamil; fat-storing cell
Abstract
AIM To observe the effect of low density lipoprotein and calcium antagonists on the proliferation, HA and collagen synthesis of fat-storing cells (FSCs).
METHODS In this study, the effect of low density lipoprotein (LDL) and calcium antafonists-Nicardipine (Nic) and Verapamil (Ver) and the combination of them on the proliferation, HA and collagen synthesis of fat-storing cells (FSCs) were determined by MTT colorimetric assay, hyaluronic acid radioimmunoassay and 3H-proline incorporation assay were used to determine the effects of above factors.
, 百拇医药
RESULTS LDL could accelerate the proliferation, HA and collagen synthesis of FSCs. Nic and Ver could inhibit the proliferation and collagen synthesis of FSCs. Ver also inhibited the HA synthesis. Meanwhile, Nic and Ver had marked inhibitive effects on proliferation and collagen synthesis of FSCs stimulated by LDL, but the inhibition on synthesis of HA was not obvious.
CONCLUSION LDL is involved in the proliferation and synthesis of HA and collagen of FSCs. Nic and Ver had resistant effects on LDL.
, 百拇医药
0 引言
肝纤维化时贮脂细胞(fat-storing cell, FSC)大量增殖分化，其质膜的合成需要胆固醇，而低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)是胆固醇、胆固醇酯运载的载体；新近发现，它还具有刺激多种细胞胞内钙离子浓度升高，促进细胞增殖等多种作用[1,2]. 本文将就LDL对FSC增殖、合成细胞外基质的影响进行探讨，并观察已发现有抗肝纤维化作用的钙拮抗剂与它的相互关系.
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 ♂ SD大鼠，体重400g～500g，由中国科学院上海实验动物中心提供.
1.1.2 主要试剂 胶原酶，Pronase E, Nycodenze, 尼卡地平均购自Sigma公司，MTT购自Fluka公司，透明质酸放射免疫分析测定盒购自上海海军医学研究所，3H-脯氨酸购自中国原子能科学研究院. 维拉帕米购自Knoll公司.
, 百拇医药
1.1.3 分组 LDL不同剂量组(分别为25，50，100mg/L)、Nic组(25mg/L)、Ver组(50mg/L)、LDL(100mg/L)+Nic(25mg/L)、LDL(100mg/L)+Ver(50mg/L)组及对照组
1.1.4 大鼠FSC的分离、鉴定 采用胶原酶与Pronase E联合消化,Nycodenze一步密度梯度离心法分离，免疫组化鉴定FSC的Desmin，台盼蓝染色计数，细胞活力大于85%，得率达1～3×107/肝.
1.1.5 LDL的制备 正常人血清经超速离心制得LDL，微孔滤器过滤除菌，4℃中储存，3wk内使用，其纯度用聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定证明无其他组分污染.
1.2 方法
1.2.1 LDL及钙拮抗剂对FSC增殖的影响 采用MTT法.取培养4d～6d的大鼠FSC，调整浓度至1×105/mL，接种于96孔细胞培养板中，每孔200μL细胞悬液，按上述分组法加药，每种处理作3复孔. 培养48h后每孔加5mg/mL的MTT 20μL，反应7h，用快速翻板法去除培养液，加DMSO，30min后测定570nm处的吸光值(A).
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1.2.2 LDL、钙拮抗剂对HA的影响 按照透明质酸放射免疫分析测定盒说明书操作. 分组同前，每个样品作双复管，HA的含量在FMJ-182放射免疫γ计数仪上测得.
1.2.3 LDL、钙拮抗剂对3H-脯氨酸掺入的影响 按1×105/mL密度接种FSC于24孔细胞培养板上，孵育48h后更换新培养液(无血清，含2μci[3H]脯氨酸)，同时按上述分组加入处理因素，每种处理作3复孔，再孵育48h，将细胞取出用胰酶离散并收集于玻璃纤维滤膜，用0.9% NaCl洗涤后用乙醇冲洗，室温下干燥，置于闪烁瓶内，并加入10mL闪烁液，12h后进行闪烁计数.
2 结果
LDL能明显促进FSC增殖；单独应用Nic或Ver均能显著抑制FSC的增殖，两者间无统计学差异(P>0.05)；Nic及Ver还能拮抗LDL刺激的FSC增殖，但结果仍高于对照组(P<0.01，表1).
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LDL能非常明显地升高HA值；Nic能降低FSC合成HA，但无统计学意义(P>0.05)，Ver能显著地抑制HA的合成(P<0.05)；Nic及Ver对抗LDL升HA的作用不明显(P>0.05，表2).
表1 脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠FSC增殖的影响
(
±s) 组别剂量
A值
对照组
0.2547±0.0407
LDL
25
, 百拇医药
0.3077±0.044a
50
0.3500±0.065b
100
0.3763±0.038b
Nic
25
0.1713±0.046b
Ver
50
0.1990±0.024b
, http://www.100md.com
LDL+Nic
100+25
0.3020±0.029bd
LDL+Ver
100+50
0.3143±0.037bd
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组；dP<0.01，vs LDL(100μg/mg)组.
LDL促进FSC胶原合成的作用随着剂量的增大愈发明显；钙拮抗剂Nic及Ver均能非常显著地抑制胶原合成，且Nic的作用明显强于Ver(P<0.01)；Nic能非常显著地抑制LDL促进的胶原合成(P<0.01)，且抑制程度达到对照组之下(P<0.01)，Ver亦能非常显著地抑制LDL促进的胶原合成(P<0.01)，但抑制程度未达到对照组之下(P>0.05，表2).
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表2 脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠FSC合成透明质酸及胶原的影响
(
±s)组别
剂量(mg/mL)
透明质酸含量(ng/mL)
脯氨酸掺入(cpm)
对照组
131.088±12.33
14955±2114
LDL
, http://www.100md.com 25
362.73±19.13b
22420±1963b
50
398.69±25.46b
29639±2805b
100
535.44±32.12b
30380±4411b
Nic
, 百拇医药 25
126.82±29.11
931±78b
Ver
50
110.65±37.92a
1881±126b
LDL+Nic
100+25
476.20±134.27bc
7977±760bd
, 百拇医药
LDL+Ver
100+50
466.19±72.34bc
16459±3621d
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组；cP<0.05，dP<0.01，vs LDL(100mg/L)组.
3 讨论
脂质在生物体内具有供能及组成细胞结构等功能，而脂蛋白是胞质内外脂质转运的重要运载系统. LDL是脂蛋白一种，通常，它能作为胆固醇、胆固醇酯运载的载体，而目前发现LDL还具有刺激多种细胞胞内钙离子浓度升高，促进细胞增殖等多种作用[1-3].
, 百拇医药
游离胆固醇为生物膜的重要组成部分，在细胞质膜中含量较高. 分裂增生的细胞对胆固醇需求剧增，以满足合成质膜的需要. 没有胆固醇的细胞将停止生长与分裂. 静止状态的细胞通过细胞膜上LDL受体优先摄取外源性胆固醇，维持细胞质膜的新陈代谢；分裂增生期的细胞为获取额外的胆固醇，一方面通过提高膜上LDL受体活性，摄取更多的外源性胆固醇，另一方面则加强自身内源性胆固醇的合成[4].
本实验中观察到LDL在剂量25μg/mL～100μg/mL范围内，能显著促进FSC增殖，与其他学者[5]观察到的LDL在10μg/mL～100μg/mL范围内能加速细胞分裂，从而促进血管内皮细胞增殖相一致. 钙拮抗剂Nic及Ver对FSC增殖具有抑制作用，同时它们都能抑制LDL刺激所引致的FSC增殖增加. 这些结果可能与LDL引起的FSC胞内钙离子浓度升高及钙拮抗剂引起的钙离子浓度降低有关，因为一定水平的钙离子是细胞增殖所必须的，故钙离子水平降低会使细胞增殖受阻同时LDL能促进FSC增殖还可能与其增加细胞内游离胆固醇浓度有关.
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透明质酸是一种大分子蛋白多糖，是构成基质的重要成分[6，7]，纯化的鼠肝细胞体外研究提示肝内FSC是正常肝脏合成HA的主要部位[8]，FSC“激活”后HA合成量增加，肝内皮细胞是清除血清中HA的主要场所[9]. 肝硬变时血清内源性 HA水平升高是由于产生HA过多及清除减少所致，其血清水平能同时反映肝纤维化的活动和肝功能损害的程度[10，11]. 本实验中，LDL能增加FSC的HA合成量，Nic能降低HA的量，但其改变无统计学意义(P>0.05)，Ver能明显降低HA的量，Nic及Ver对LDL引起的HA量增加都有一定抑制作用，但均无统计学差异(P>0.05).
FSC“激活”后，其产生胶原的单量及种类均发生改变，肝纤维化时，HA的升高与血清Ⅲ型前胶原(PⅢP)显著相关，说明HA与作为纤维化发生一部分的胶原Ⅲ合成呈平行关系[12]，胶原和HA的合成过程中是否需要LDL受体及钙离子-钙调蛋白系统的参与，目前尚不清楚. 本实验观察到LDL能明显促进胶原的生成，Ver及Nic均能抑制胶原的生成，且对LDL的上述作用有一定的抑制，而且Nic的作用明显强于Ver. Nic在抑制HA及胶原合成中表现出的不一致性，可能涉及其作用机制的多样性.
, 百拇医药
作者简介：王炯，女，1969-12-10生，上海市人，汉族. 1993年上海第二医科大学本科毕业，1996年上海第二医科大学硕士研究生毕业，后工作于上海第二医科大学附属新华医院.
通讯作者 王炯，200092，上海第二医科大学附属新华医院.
Correspondence to:WANG Jiong, Department of Digestive Diseases, Xinhua Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092, China
4 参考文献
[1] Sachinidis A, YonKo, Wiezorek A. Lipoproteins induce expression of the early growth response gene-1 in vascular somooth muscle cells from rat. Biochem Biophys Rex Commun, 1993;192:796-798
, 百拇医药
[2] Hermann H, Martin R, Carsten L. LDL increases [Ca2+]I in human endothelial cells and augments thrombininduced cell signalling. J Lab Clin Med, 1994;124:710-713
[3]Tasaki H, Yamashita K, Nakashima Y. Increase in intracellular calcium ion in smooth muscle cells induced by low-density lipoprotein. Gerontology, 1994;40(Suppl 2):23-28
[4] 蔡海江. 血浆脂蛋白与动脉粥样硬化. 宋正行主编. 支脉粥样硬化与冠心病. 第1版. 北京：人民卫生出版社，1982：61-75
, 百拇医药
[5] Jean PT, Jannie C, Denis G. Effect of high and low density lipoproteins on proliferation of culltured bovine vascular endothelial cells. J Clin Invest, 1980;66:696-708
[6] Bernanke DH, Markward RR. Effects of two glycosaminoglycans on seeding of cardiac cushion tissue cell into a collagen-lattice culture system. Anatom Record, 1984;210:25-28
[7] Bissel DM. Cell-matrix interaction and hepatic fibrosois. Prog Liver Dis, 1989;9:143-148
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收稿日期 1997-06-15, http://www.100md.com