水溶性月桂氮酮对达克罗宁粘膜促渗作用的药效学研究
作者：朱健平 刘 刚 吴 铁
单位：湛江 524023 广东医学院药理教研室
关键词：达克罗宁；月桂氮酮；促渗剂；粘膜
中国现代应用药学990107水溶性月桂氮
酮对达克罗宁粘膜促渗作用的药效学研究
摘要 目的：考察月桂氮酮的粘膜促渗作用。方法：以达克罗宁为模型药，用青蛙和蚯蚓试验法分别研究了月桂氮酮对达克罗宁麻醉效果的影响。结果：与不含月桂氮酮的样品比较，体积分数为1%的月桂氮酮能显著促进达克罗宁的粘膜渗透作用(P<0.01)，短麻缩醉的潜伏期；用0.5%的月桂氮酮作促渗剂，可使达克罗宁的麻醉作用效价强度提高3倍。结论：考察了月桂氮酮对达克罗宁粘膜促渗作用的影响，其结果为进一步研究月桂氮酮在透皮给药系统方面的应用提供了有益的参考。
, http://www.100md.com
Pharmacodynamic studies of Azone on the mucosa permeation of dyclonine
Zhu Jianping(Zhu JP),Liu Gang(Liu G),Wu Tie(Wu T)(Department of Pharmacology,Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effect of Azone on the mucosa permeability of drug.METHODS:Dyclonine were used as a model drug in this experiment,and the effects of Azone on anesthetic result of dyclonine were investigated by frog and worm tests.RESULTS:The result showed that 1% Azone enhanced the mucosa permeation of dyclonine significantly(P<0.01).When 0.5% Azone was used as an enhancer,the potency of dyclonine from the product was as much as 3 times of that of the control group.CONCLUSION:The influence of Azone on dyclonine permeation through frog and worm were tested.The results were useful for further research of Azone on transdermal delivery system.
, 百拇医药
KEY WORDS dyclonine,Azone,penetration enhancer,mucosa
月桂氮(艹)/(卓)酮(Arone,A)是目前大家公认的有效的药物透皮促进剂，它对粘膜吸收的促渗作用则各实验者结论不一。水溶性月桂氮酮的开放方便了其在水溶性制剂中的使用，可以广泛添加于需要通过皮肤、粘膜(直肠、鼻腔、眼睛、口腔等)吸收的药物制剂中以促进药物吸收。水溶性月桂氮酮有无粘膜促渗作用，国内未见报道。我们以盐酸达克罗宁(Dyclonine hydrochloride,D)为模型药，利用蛙皮和蚯蚓外皮与粘膜相似的特点[1]，以该药的麻醉效果为药效学指标，研究了水溶性月桂氮酮对达克罗宁麻醉作用的影响，探讨其对粘膜的促渗作用。
, 百拇医药
1 材 料
盐酸达克罗宁(上海轻工实验厂，批号:950906),水溶性月桂氮酮(药用，新乡高金化学有限公司)，盐酸(分析纯),Ringer液(自配)，蚯蚓、青蛙(市售)。
2 方 法[1]
2.1 麻醉作用潜伏期的测定
取体重100g左右的青蛙24只，分成3组，每组8只，甲组测试0.1%达克罗宁液，乙组测试含1%水溶性月桂氮酮的0.1%达克罗宁混合液，丙组用1%水溶性月桂氮酮浸泡蛙足15min(预处理)后再测试0.1%达克罗宁液。测试时自蛙口角处剪去上颌头部，用卵圆夹夹住下颌悬吊，浸足于0.1mol/L HCl液中10s,观察缩腿反射，试毕用清水洗去腿上酸液并擦干，浸足于药液中，分别于0.5,1,2,3和5min取出，测试缩腿反射，记录自用药至反射消失的时间，此即麻醉作用的潜伏期，组间进行比较并作统计学处理。
, 百拇医药
2.2 相对作用强度测定
取重0.5～5g的蚯蚓，平均分成10组，每组18条，保存于含水量为25%～30%的含腐植质土壤内，实验前将之移入通气的Ringer液内2h,实验时1～5组蚯蚓浸入含0.5%水溶性月桂氮酮的Ringer液中预处理10min,6～10组不进行预处理，然后分别浸入等比稀释的达克罗宁溶液中，每组于1,3,5,8,12和16min各取3条浸入300ml 0.0125mol/L HCl中1min,观察急剧退缩反应，计算其负反应数，按下式计算麻醉指数：
麻醉指数=(负反应数)/(实验蚯蚓数)×100%
将麻醉指数换算成概率单位与药物对数浓度作图，求出半数有效浓度(ED50)并进行比较。
, 百拇医药 3 结 果
3.1 在药物麻醉作用潜伏期测定实验中，三组青蛙自用药至反射消失的平均时间如表1所示。统计学分析表明，经1%水溶性月桂氮酮预处理15min后的丙组麻醉作用潜伏期与未进行月桂氮酮预处理的甲、乙组比较大大缩短，差异有显著性(P<0.01)，未进行预处理的甲、乙组之间差异无显著性，麻醉作用潜伏期都较长。
3.2 在相对作用强度测定中，各组蚯蚓的麻醉指数如表2所示。将麻醉指数换算成概率单位与药物对数浓度作图，见图1，2。
表1 三组青蛙药物麻醉作用潜伏期的比较(
±s,n=8) 组 别
, 百拇医药
药 物
麻醉作用的潜伏期/min
甲
0.1%D
11.5±2.7
乙
1%A+0.1%D
10.3±2.3
丙
1%A预处理15min+0.1%D
1.6±0.8*
与甲、乙组比较，*P<0.01
, http://www.100md.com
表2 月桂氮酮预处理组和未处理组的麻醉指数(n=18) 组 别
达克罗宁药液浓度
(mg/L)
麻醉指数/%
预处理组
未处理组
1
41.0
17
2
51.2
, http://www.100md.com
33
3
64.0
61
4
80.0
89
5
100.0
99
6
94.9
11
7
, 百拇医药
126.6
28
8
168.8
44
9
225.0
67
10
300.0
89
图1 月桂氮酮预处理组麻醉指数的概率单位与对数浓度的直线图
, http://www.100md.com
预处理组的直线回归方程：y=8.4675x-9.8048,r=0.9883。未处理组的直线回归方程:y=4.7429x-5.6259,r=0.9955。据此求得月桂氮酮预处理组达克罗宁的ED50为56.0mg/L,未处理组达克罗宁的ED50为173.9mg/L,相对作用强度为两者的ED50比值约1∶3，即0.5%水溶性月桂氮酮预处理组达克罗宁的效价强度为未处理组的3倍。
图2 未预处理组麻醉指数的概率单位与对数浓度的直线图
4 讨 论
, 百拇医药 4.1 月桂氮酮作为有效的透皮促进剂，已为许多研究所证明[2]，但作为粘膜吸收促进剂则报道结论不一。在对头孢西丁灌肠液的研究中[2]，发现加入1%月桂氮酮可使血药浓度-时间曲线下面积从60±50μg/min.ml-1提高到370±290μg/min。ml-1我们根据蛙皮和蚯蚓外皮与粘膜结构相似的特点，试验证明经水溶性月桂氮酮预处理后能显著缩短达克罗宁对蛙皮表面麻醉的潜伏期，提高达克罗宁对蚯蚓的麻醉强度，减少麻醉用量，增强达克罗宁的粘膜麻醉效果，从而通过试验证明水溶性月桂氮酮具有一定的粘膜促渗作用。
, 百拇医药
4.2 在试验中我们发现，水溶性月桂氮酮与盐酸达克罗宁溶液混合使用效果并不好，即用含1%水溶性月桂氮酮的达克罗宁溶液麻醉青蛙足部并不能使麻醉潜伏期缩短，而预处理15min后再用达克罗宁则使麻醉潜伏期大大缩短，蚯蚓试验也有类似的情况，说明水溶性月桂氮酮的粘膜促渗作用有迟滞现象，这可能与其促渗机理有关。
4.3 现认为非极性月桂氮酮的促透作用机理是插入脂质双层疏水链之间，改变其有序状态，增加脂质的流动性[3]。由于改变脂质疏水尾排列进而影响极性头基的规整性，促进极性和非极性药物的渗透，因而推测极性较大的水溶性月桂氮酮其促渗机理则应主要影响脂质分子极性基团之间的氢键和离子键作用力，使极性头基之间的排列趋于无序状态，进而影响脂质分子非极性链排列的规整性，促进药物的渗透。是否如此，有待进一步证实。
, 百拇医药
参考文献
[1] 徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.第二版.北京：人民卫生出版社，1991∶635.
[2] Kurosaki Y,Takatori T,Kitayama M，et al.Application of propranolol to the keratinizrd oral mucosa:avoidance of firstpass elimination and the use of 1-dodecylazacycloheptan-2-one(Azone) as an absorption enhancer of bioadhesive film-dosage form.Int J Pharm,1988,11(12)∶824.
[3] 梁秉文.经皮给药制剂.北京：中国医药科技出版社，1992∶122.
收稿日期：1998-02-09, 百拇医药
单位：湛江 524023 广东医学院药理教研室
关键词：达克罗宁；月桂氮酮；促渗剂；粘膜
中国现代应用药学990107水溶性月桂氮
酮对达克罗宁粘膜促渗作用的药效学研究摘要 目的：考察月桂氮
酮的粘膜促渗作用。方法：以达克罗宁为模型药，用青蛙和蚯蚓试验法分别研究了月桂氮酮对达克罗宁麻醉效果的影响。结果：与不含月桂氮酮的样品比较，体积分数为1%的月桂氮酮能显著促进达克罗宁的粘膜渗透作用(P<0.01)，短麻缩醉的潜伏期；用0.5%的月桂氮酮作促渗剂，可使达克罗宁的麻醉作用效价强度提高3倍。结论：考察了月桂氮酮对达克罗宁粘膜促渗作用的影响，其结果为进一步研究月桂氮酮在透皮给药系统方面的应用提供了有益的参考。, http://www.100md.com
Pharmacodynamic studies of Azone on the mucosa permeation of dyclonine
Zhu Jianping(Zhu JP),Liu Gang(Liu G),Wu Tie(Wu T)(Department of Pharmacology,Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effect of Azone on the mucosa permeability of drug.METHODS:Dyclonine were used as a model drug in this experiment,and the effects of Azone on anesthetic result of dyclonine were investigated by frog and worm tests.RESULTS:The result showed that 1% Azone enhanced the mucosa permeation of dyclonine significantly(P<0.01).When 0.5% Azone was used as an enhancer,the potency of dyclonine from the product was as much as 3 times of that of the control group.CONCLUSION:The influence of Azone on dyclonine permeation through frog and worm were tested.The results were useful for further research of Azone on transdermal delivery system.
, 百拇医药
KEY WORDS dyclonine,Azone,penetration enhancer,mucosa
月桂氮(艹)/(卓)酮(Arone,A)是目前大家公认的有效的药物透皮促进剂，它对粘膜吸收的促渗作用则各实验者结论不一。水溶性月桂氮
酮的开放方便了其在水溶性制剂中的使用，可以广泛添加于需要通过皮肤、粘膜(直肠、鼻腔、眼睛、口腔等)吸收的药物制剂中以促进药物吸收。水溶性月桂氮酮有无粘膜促渗作用，国内未见报道。我们以盐酸达克罗宁(Dyclonine hydrochloride,D)为模型药，利用蛙皮和蚯蚓外皮与粘膜相似的特点[1]，以该药的麻醉效果为药效学指标，研究了水溶性月桂氮酮对达克罗宁麻醉作用的影响，探讨其对粘膜的促渗作用。, 百拇医药
1 材 料
盐酸达克罗宁(上海轻工实验厂，批号:950906),水溶性月桂氮
酮(药用，新乡高金化学有限公司)，盐酸(分析纯),Ringer液(自配)，蚯蚓、青蛙(市售)。2 方 法[1]
2.1 麻醉作用潜伏期的测定
取体重100g左右的青蛙24只，分成3组，每组8只，甲组测试0.1%达克罗宁液，乙组测试含1%水溶性月桂氮
酮的0.1%达克罗宁混合液，丙组用1%水溶性月桂氮酮浸泡蛙足15min(预处理)后再测试0.1%达克罗宁液。测试时自蛙口角处剪去上颌头部，用卵圆夹夹住下颌悬吊，浸足于0.1mol/L HCl液中10s,观察缩腿反射，试毕用清水洗去腿上酸液并擦干，浸足于药液中，分别于0.5,1,2,3和5min取出，测试缩腿反射，记录自用药至反射消失的时间，此即麻醉作用的潜伏期，组间进行比较并作统计学处理。, 百拇医药
2.2 相对作用强度测定
取重0.5～5g的蚯蚓，平均分成10组，每组18条，保存于含水量为25%～30%的含腐植质土壤内，实验前将之移入通气的Ringer液内2h,实验时1～5组蚯蚓浸入含0.5%水溶性月桂氮
酮的Ringer液中预处理10min,6～10组不进行预处理，然后分别浸入等比稀释的达克罗宁溶液中，每组于1,3,5,8,12和16min各取3条浸入300ml 0.0125mol/L HCl中1min,观察急剧退缩反应，计算其负反应数，按下式计算麻醉指数：麻醉指数=(负反应数)/(实验蚯蚓数)×100%
将麻醉指数换算成概率单位与药物对数浓度作图，求出半数有效浓度(ED50)并进行比较。
, 百拇医药 3 结 果
3.1 在药物麻醉作用潜伏期测定实验中，三组青蛙自用药至反射消失的平均时间如表1所示。统计学分析表明，经1%水溶性月桂氮
酮预处理15min后的丙组麻醉作用潜伏期与未进行月桂氮酮预处理的甲、乙组比较大大缩短，差异有显著性(P<0.01)，未进行预处理的甲、乙组之间差异无显著性，麻醉作用潜伏期都较长。3.2 在相对作用强度测定中，各组蚯蚓的麻醉指数如表2所示。将麻醉指数换算成概率单位与药物对数浓度作图，见图1，2。
表1 三组青蛙药物麻醉作用潜伏期的比较(
±s,n=8) 组 别, 百拇医药
药 物
麻醉作用的潜伏期/min
甲
0.1%D
11.5±2.7
乙
1%A+0.1%D
10.3±2.3
丙
1%A预处理15min+0.1%D
1.6±0.8*
与甲、乙组比较，*P<0.01
, http://www.100md.com
表2 月桂氮
酮预处理组和未处理组的麻醉指数(n=18) 组 别达克罗宁药液浓度
(mg/L)
麻醉指数/%
预处理组
未处理组
1
41.0
17
2
51.2
, http://www.100md.com
33
3
64.0
61
4
80.0
89
5
100.0
99
6
94.9
11
7
, 百拇医药
126.6
28
8
168.8
44
9
225.0
67
10
300.0
89
图1 月桂氮
酮预处理组麻醉指数的概率单位与对数浓度的直线图, http://www.100md.com
预处理组的直线回归方程：y=8.4675x-9.8048,r=0.9883。未处理组的直线回归方程:y=4.7429x-5.6259,r=0.9955。据此求得月桂氮
酮预处理组达克罗宁的ED50为56.0mg/L,未处理组达克罗宁的ED50为173.9mg/L,相对作用强度为两者的ED50比值约1∶3，即0.5%水溶性月桂氮酮预处理组达克罗宁的效价强度为未处理组的3倍。图2 未预处理组麻醉指数的概率单位与对数浓度的直线图
4 讨 论
, 百拇医药 4.1 月桂氮
酮作为有效的透皮促进剂，已为许多研究所证明[2]，但作为粘膜吸收促进剂则报道结论不一。在对头孢西丁灌肠液的研究中[2]，发现加入1%月桂氮酮可使血药浓度-时间曲线下面积从60±50μg/min.ml-1提高到370±290μg/min。ml-1我们根据蛙皮和蚯蚓外皮与粘膜结构相似的特点，试验证明经水溶性月桂氮酮预处理后能显著缩短达克罗宁对蛙皮表面麻醉的潜伏期，提高达克罗宁对蚯蚓的麻醉强度，减少麻醉用量，增强达克罗宁的粘膜麻醉效果，从而通过试验证明水溶性月桂氮酮具有一定的粘膜促渗作用。, 百拇医药
4.2 在试验中我们发现，水溶性月桂氮
酮与盐酸达克罗宁溶液混合使用效果并不好，即用含1%水溶性月桂氮酮的达克罗宁溶液麻醉青蛙足部并不能使麻醉潜伏期缩短，而预处理15min后再用达克罗宁则使麻醉潜伏期大大缩短，蚯蚓试验也有类似的情况，说明水溶性月桂氮酮的粘膜促渗作用有迟滞现象，这可能与其促渗机理有关。4.3 现认为非极性月桂氮
酮的促透作用机理是插入脂质双层疏水链之间，改变其有序状态，增加脂质的流动性[3]。由于改变脂质疏水尾排列进而影响极性头基的规整性，促进极性和非极性药物的渗透，因而推测极性较大的水溶性月桂氮酮其促渗机理则应主要影响脂质分子极性基团之间的氢键和离子键作用力，使极性头基之间的排列趋于无序状态，进而影响脂质分子非极性链排列的规整性，促进药物的渗透。是否如此，有待进一步证实。, 百拇医药
参考文献
[1] 徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.第二版.北京：人民卫生出版社，1991∶635.
[2] Kurosaki Y,Takatori T,Kitayama M，et al.Application of propranolol to the keratinizrd oral mucosa:avoidance of firstpass elimination and the use of 1-dodecylazacycloheptan-2-one(Azone) as an absorption enhancer of bioadhesive film-dosage form.Int J Pharm,1988,11(12)∶824.
[3] 梁秉文.经皮给药制剂.北京：中国医药科技出版社，1992∶122.
收稿日期：1998-02-09, 百拇医药