沈阳地区各型丙型肝炎患者丙型肝炎病毒的基因分型
作者：黄芬 蔡翠芳 赵桂珍 李颖
单位：110003 沈阳 中国医科大学第二临床医院传染科(黄芬 赵桂珍 李颖)；沈阳医学院微生物教研室(蔡翠芳)
关键词：丙型肝炎；丙型肝炎病毒；基因，病毒
中华实验和临床病毒学杂志990118 【摘要】 目的 研究沈阳地区丙型肝炎病毒(HCV)基因型分布状况及其临床意义。方法 应用聚合酶链反应(PCR)方法对沈阳地区84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的各临床型丙型肝炎患者进行HCV基因分型。结果 84例丙型肝炎中，HCV-Ⅱ型45例(53.6%)，HCV-Ⅲ型26例(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型13例(15.5%)；HCV不同基因型在各型丙型肝炎中总体分布不一致，经统计学处理，P<0.05；在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中，HCV-Ⅱ型感染分别占55.6%，36.2%，75.0%，85.7%及88.9%；HCV-Ⅲ型感染分别占22.2%，46.8%，8.3%，0%骸11.1%。结论 沈阳地区HCV感染以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型；HCV基因型与丙型肝炎严重程度密切相关。
, 百拇医药
Study on HCV genotypes in different clinical types of hepatitis C patients in Shenyang area HUANG Fen, CAI Cuifang, ZHAO Guizhen, et al. Department of Infectious Diseases, The Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang, 110003
【Abstract】 Objective To study the distribution of HCV genotypes in different clinical types of hepatitis C in Shenyang area and its clinical significance.Methods The HCV genotypes of 84 HC patients of different clinical types were detected by PCR assay with four kinds of type-specific primers.Results In 84 patients with hepatitis C, the HCV-Ⅱ and HCV-Ⅲ genotypes and the Ⅱ/Ⅲ mixed genotype were 53.6%,30.9% and 15.5% respectively. The distribution of HCV genotypes in different HC clinical types was not identical, P<0.05. In acute hepatitis, in mild, moderate and severe degree of chronic hepatitis, and in liver cirrhosis, the infection rates of genotype Ⅱ HCV were 55.6%,36.2%,75.0%,85.7% and 88.9% respectively, but that of genotype Ⅲ were 22.2%,46.8%,8.3%,0% and 11.1% respectively.Conclusion Infection of geno type Ⅱ HCV was predominant in Shenyang area followed by HCV-Ⅲ and Ⅱ/Ⅲ mixed geuotypes. The different genotypes of HCV were related to the severity of hepatitis C.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis C virus Gene, viral
近年来发现丙型肝炎病毒(HCV)变异较大，存在多种基因型。目前证实HCV至少存在12个基因型，广泛分布的有Ⅰ/1a、Ⅱ/1b、Ⅲ/2a、Ⅳ/2b和Ⅴ/3a型。HCV不同基因型与HCV基因型进行深入研究具有其实用价值。我们用PCR法对沈阳地区84例各型丙型肝炎进行HCV基因分型研究，旨在了解本地区HCV基因型分布状况。
1 材料和方法
1.1 研究对象 84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的各型丙型肝炎病人均为1993年7月～1996年6月本院传染科门诊及病房就诊及住院患者。包括急性肝炎9例，慢性肝炎66例(轻度47例，中度12例，重度7例)，肝炎后肝硬化(均为活动性)9例。其中男性69例、女性15例，平均年龄38.8±15.6岁，有输血或血制品史者43例(51.2%)，排除重叠或混合感染乙型肝炎者。诊断均符合1990年上海第六届全国病毒性肝炎会议制定的诊断标准，并参照1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议制定的诊断标准。其中2例肝硬化经手术病理证实。
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1.2 HCV引物及主要试剂
1.2.1 HCV引物 HCV Core基因区分型PCR引物由中国科学院上海生物工程研究中心合成。型共同性引物：P1正链5′-CGCGCGACTAGGAAGACTTA-3′(nt 139～158)(从core基因启始密码子第一个核苷酸算起)，P2负链5′-ATGTACCCCATGAGGTCGCT-3′(nt 391～410)。型特异性引物：P3正链5′-AGGAAGACTTCCGAGCGGTC-3′(nt 148～167)，P4负链5′-TGCCTTGGGGATAGGCTGAC-3′(nt 185～204)(HCV-Ⅰ)；P5负链5′-GAGCCATCCTGCCCACCCCA-3′(nt 272～291)(HCV-Ⅱ)；P6负链5′-CCAAGAGGGACGGGAACCTC-3′(nt 302～321)(HCV-Ⅲ)；P7负链5′-ACCCTCGTTTCCGTACAGAG-3′(nt 251～270)(HCV-Ⅳ)。
, http://www.100md.com 1.2.2 主要试剂：逆转录酶(AMV-RT)、Tag酶、RNA酶抑制剂(RNasin)均为Promega公司产品。
1.3 血清RNA的提取 采用异硫氰酸胍一步法提取血清总RNA。
1.4 HCV基因分型 参照OKamoto[1]引物特异PCR法并加以改进。①逆转录及第1次PCR扩增：扩增体积30 μl，其中已提取的PNA中加入AMV-RT5 U，RNasin 20 U，Taq酶2 U，2 mmol/L dNTP 3 μl，10×AMV-RT缓冲液3 μl，型共同性引物P1及P2终浓度分别为0.8 μmol/L。42℃逆转录20 min后接第1次扩增，反应条件为94℃60 s, 55℃90 s,72℃120 s，共35个循环。②第二次PCR扩增：总体积30 μl，其中第1次PCR扩增产物5 μl加入10×AMV-RT缓冲液3 μl，2 mmol/LdNTP3 μl，Taq酶2 U，型特异性引物P3～P7终浓度均为0.8 μmol/L，反应条件为94℃60 s，60℃60 s，72℃90 s，共30个循环，72℃延伸5 min。每次扩增均设HCV RNA阳性血清对照，未加模板的阴性对照。
, http://www.100md.com
第2次PCR扩增产物10 μl在6%聚丙烯酰胺凝胶上电泳，溴化乙锭染色后在紫外灯下观察，HCVⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的扩增产物长度分别为57 bp, 144 bp, 174 bp及123 bp。
2 结果
2.1 84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的丙型肝炎HCV基因分型结果 84例丙型肝炎中，HCV-Ⅱ型45例(53.6%)，HCV-Ⅲ型26例(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型13例(15.5%)。未检出Ⅰ型及Ⅳ型。见图1。
图1 丙型肝炎HCV基因分型结果
1：χ174 DNA/Hae Ⅲ；2，6：HCV-Ⅱ型；3：HCV-Ⅲ型；
4，5：Ⅱ/Ⅲ混合型；7：阴性对照
, 百拇医药
Fig.1 The results of HCV genotyping
1:χ174 DNA/Hae Ⅲ marker. 2,6:HCV-Ⅱ genotype.3:HCV-Ⅲ genotype.
4,5: Ⅱ/Ⅲ mixed type. 7: Negative control
2.2 各型丙型肝炎HCV基因分型结果 各型丙型肝炎HCV基因分型结果表明，HCV不同基因型在不同临床类型丙型肝炎中总体分布不一致，经RXC表χ2检验，χ2=18.2,P<0.05。在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中，HCV-Ⅱ型感染分别占55.6%，36.2%，75.0%，85.7%及88.9%；HCV-Ⅲ型感染分别占22.2%，46.8%，8.3%，0%及11.1%。慢性肝炎中度、重度及肝炎后肝硬化组HCV-Ⅱ型感染率显著高于慢性肝炎轻度组(P<0.05或P<0.01)；HCV-Ⅲ感染率显著低于慢性肝炎轻度组(P<0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 各临床型丙型肝炎HCV基因分型结果
Tab.1 HCV Genotypes of hepatitis C in different clinical types HC临床类型
HC clinical types
例数
Cases
Ⅱ型
GenotypeⅡ
Ⅲ型
GenotypeⅢ
Ⅱ/Ⅲ混合型型
, http://www.100md.com Ⅱ/Ⅲmixed type
例数
Cases
(%)
例数
Cases
(%)
例数
Cases
(%)
急性肝炎
Acute hepatitis
9
, 百拇医药
5
(55.6)
2
(22.2)
2
(22.2)
慢性肝炎
Chronic hepatitis
轻度
Mild degree
47
17
(36.2)
, 百拇医药
22
(46.8)
8
(17.0)
中度
Moderate degree
12
9
(75.0)*
1
(8.3)*
2
, 百拇医药 (16.7)
重度
Severe degree
7
6
(85.7)*
1
(14.3)
肝硬化
Liver cirrhosis
9
8
(88.9)**
, http://www.100md.com
1
(11.1)*
合计
Total
84
45
(53.6)
26
(30.9)
13
(15.5)
注：与慢性肝炎轻度比较，经χ2检验，*P<0.05，**P<0.01
, http://www.100md.com
Note:Compared with mild degree of chronic hepatitis,by χ2test,*P<0.05，**P<0.01
2.3 输血后丙型肝炎及散发性丙型肝炎患者HCV的基因分型结果 输血后及散发性丙型肝炎患者HCV基因分型结果表明，HCV不同基因型在输血后丙型肝炎及散发性丙型肝炎中分布一致，经R×C表χ2检验，χ2=2.05，P>0.05。见表2。
表2 输血后及散发性丙型肝炎HCV基因分型结果
Tab.2 HCV genotypes of post-transfusion and sporadic hepatitis C HC组别
HC Group
, http://www.100md.com
例数
Cases
Ⅱ型
GenotypeⅡ
Ⅲ型
GenotypeⅢ
Ⅱ/Ⅲ混合型
Ⅱ/Ⅲmixed type
例数
Cases
(%)
例数
Cases
, http://www.100md.com
(%)
例数
Cases
(%)
输血后肝炎
Post-transfusion hepatitis
43
22
(51.2)
12
(27.9)
9
(20.9)
, http://www.100md.com
散发性肝炎
Sporadic hepatitis
41
23
(56.1)
14
(34.1)
4
(9.8)
3 讨论
HCV基因型有一定的地区分布，美国以Ⅰ型为主，日本以Ⅱ型为主，我国也以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型。杜绍财等[2]报道北京、武汉、广州、西安、重庆、广西等地区HCV感染均以Ⅱ型为主，这些地区中北京Ⅲ型感染率最高(19%)，广州Ⅱ/Ⅲ混合型感染率
, http://www.100md.com
最高(9%)。本研究结果表明沈阳地区HCV感染以Ⅱ型为主(53.6%)，其次为Ⅲ型(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型亦不少见(15.5%)，提示本地区Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型感染较其它地区高，因此今后本地区HCV感染的病原学诊断、临床治疗、疫苗研制等研究，除应着重针对Ⅱ型病毒进行外，不应忽视Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型。
Pistello等[3]通过肝组织学检查及HCV基因型研究，指出HCV-Ⅱ型与严重肝损害有关。Pozzato等[4]报道伴有肝硬变的患者均为HCV-Ⅱ型感染，而无肝硬变的慢性肝炎则分布在其他三个类型或混合型中，认为HCV基因型与慢性肝病的严重程度有关。本研究结果表明，HCV不同基因型在不同临床类型丙型肝炎中总体分布有显著差异(P<0.05)。急性肝炎、慢性肝炎中度及重度、肝炎后肝硬化组HCV感染以Ⅱ型为主，且HCV-Ⅱ型感染率，肝硬化组>慢性肝炎重度>慢性肝炎中度>急性肝炎；而谷丙转氨酶轻度升高或正常的慢性肝炎轻度患者HCV感染以Ⅲ型为主。提示HCV-Ⅱ型可能具有较强的毒力及致病性，因此HCV-Ⅱ型感染所致丙型肝炎较重，而HCV-Ⅲ型感染所致丙型肝炎临床病情多较轻，HCV基因型与丙型肝炎病人临床病情及其严重程度密切相关。
, 百拇医药
HCV基因型在输血后丙型肝炎与散发性丙型肝炎中分布无显著差异，说明HCV感染型别与感染途径无密切关系。本研究中，散发性丙型肝炎中慢性肝炎轻度偏多，临床病情略轻于输血后丙型肝炎，但经统计学处理无显著差异，该组HCV-Ⅲ型感染(34.1%)略高于输血后丙型肝炎(27.9%)可能与此有关。输血后丙型肝炎Ⅱ/Ⅲ混合型感染(20.9%)高于散发性丙型肝炎(9.8%)，提示Ⅱ/Ⅲ混合型感染可能与反复输血及血制品有关。
本课题属辽宁省科研基金资助项目
参考文献
1 Okamoto H, Sugiyama Y, Okada S, et al. Typing hepatitis C virus by polymerase chain reaction with type-specific primers: application to clinical surveys and tracing infectious sources. J Gen Virol, 1992, 73:673-679.
, http://www.100md.com
2 杜绍财，陶其敏，朱凌，等.丙型肝炎病毒基因5′-末端非编码区酶切分型的研究.中华医学杂志，1993，73(1)：7-9.
3 Pistello M, Maggi F, Vateroni L, et al. Prevalence of hepatitis C virus genotypes in Italy. J Clin Microbiol, 1994, 32(1):232-235.
4 Pozzato G, Kaneko S, Moretti M, et al. Different genotypes of hepatitis C virus are associated with different severity of chronic liver diseaes. J Med Virol, 1994, 43: 291-296.
(收稿：1997-12-11 修回：1998-12-28), 百拇医药
单位：110003 沈阳 中国医科大学第二临床医院传染科(黄芬 赵桂珍 李颖)；沈阳医学院微生物教研室(蔡翠芳)
关键词：丙型肝炎；丙型肝炎病毒；基因，病毒
中华实验和临床病毒学杂志990118 【摘要】 目的 研究沈阳地区丙型肝炎病毒(HCV)基因型分布状况及其临床意义。方法 应用聚合酶链反应(PCR)方法对沈阳地区84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的各临床型丙型肝炎患者进行HCV基因分型。结果 84例丙型肝炎中，HCV-Ⅱ型45例(53.6%)，HCV-Ⅲ型26例(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型13例(15.5%)；HCV不同基因型在各型丙型肝炎中总体分布不一致，经统计学处理，P<0.05；在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中，HCV-Ⅱ型感染分别占55.6%，36.2%，75.0%，85.7%及88.9%；HCV-Ⅲ型感染分别占22.2%，46.8%，8.3%，0%骸11.1%。结论 沈阳地区HCV感染以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型；HCV基因型与丙型肝炎严重程度密切相关。
, 百拇医药
Study on HCV genotypes in different clinical types of hepatitis C patients in Shenyang area HUANG Fen, CAI Cuifang, ZHAO Guizhen, et al. Department of Infectious Diseases, The Second Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang, 110003
【Abstract】 Objective To study the distribution of HCV genotypes in different clinical types of hepatitis C in Shenyang area and its clinical significance.Methods The HCV genotypes of 84 HC patients of different clinical types were detected by PCR assay with four kinds of type-specific primers.Results In 84 patients with hepatitis C, the HCV-Ⅱ and HCV-Ⅲ genotypes and the Ⅱ/Ⅲ mixed genotype were 53.6%,30.9% and 15.5% respectively. The distribution of HCV genotypes in different HC clinical types was not identical, P<0.05. In acute hepatitis, in mild, moderate and severe degree of chronic hepatitis, and in liver cirrhosis, the infection rates of genotype Ⅱ HCV were 55.6%,36.2%,75.0%,85.7% and 88.9% respectively, but that of genotype Ⅲ were 22.2%,46.8%,8.3%,0% and 11.1% respectively.Conclusion Infection of geno type Ⅱ HCV was predominant in Shenyang area followed by HCV-Ⅲ and Ⅱ/Ⅲ mixed geuotypes. The different genotypes of HCV were related to the severity of hepatitis C.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis C virus Gene, viral
近年来发现丙型肝炎病毒(HCV)变异较大，存在多种基因型。目前证实HCV至少存在12个基因型，广泛分布的有Ⅰ/1a、Ⅱ/1b、Ⅲ/2a、Ⅳ/2b和Ⅴ/3a型。HCV不同基因型与HCV基因型进行深入研究具有其实用价值。我们用PCR法对沈阳地区84例各型丙型肝炎进行HCV基因分型研究，旨在了解本地区HCV基因型分布状况。
1 材料和方法
1.1 研究对象 84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的各型丙型肝炎病人均为1993年7月～1996年6月本院传染科门诊及病房就诊及住院患者。包括急性肝炎9例，慢性肝炎66例(轻度47例，中度12例，重度7例)，肝炎后肝硬化(均为活动性)9例。其中男性69例、女性15例，平均年龄38.8±15.6岁，有输血或血制品史者43例(51.2%)，排除重叠或混合感染乙型肝炎者。诊断均符合1990年上海第六届全国病毒性肝炎会议制定的诊断标准，并参照1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议制定的诊断标准。其中2例肝硬化经手术病理证实。
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1.2 HCV引物及主要试剂
1.2.1 HCV引物 HCV Core基因区分型PCR引物由中国科学院上海生物工程研究中心合成。型共同性引物：P1正链5′-CGCGCGACTAGGAAGACTTA-3′(nt 139～158)(从core基因启始密码子第一个核苷酸算起)，P2负链5′-ATGTACCCCATGAGGTCGCT-3′(nt 391～410)。型特异性引物：P3正链5′-AGGAAGACTTCCGAGCGGTC-3′(nt 148～167)，P4负链5′-TGCCTTGGGGATAGGCTGAC-3′(nt 185～204)(HCV-Ⅰ)；P5负链5′-GAGCCATCCTGCCCACCCCA-3′(nt 272～291)(HCV-Ⅱ)；P6负链5′-CCAAGAGGGACGGGAACCTC-3′(nt 302～321)(HCV-Ⅲ)；P7负链5′-ACCCTCGTTTCCGTACAGAG-3′(nt 251～270)(HCV-Ⅳ)。
, http://www.100md.com 1.2.2 主要试剂：逆转录酶(AMV-RT)、Tag酶、RNA酶抑制剂(RNasin)均为Promega公司产品。
1.3 血清RNA的提取 采用异硫氰酸胍一步法提取血清总RNA。
1.4 HCV基因分型 参照OKamoto[1]引物特异PCR法并加以改进。①逆转录及第1次PCR扩增：扩增体积30 μl，其中已提取的PNA中加入AMV-RT5 U，RNasin 20 U，Taq酶2 U，2 mmol/L dNTP 3 μl，10×AMV-RT缓冲液3 μl，型共同性引物P1及P2终浓度分别为0.8 μmol/L。42℃逆转录20 min后接第1次扩增，反应条件为94℃60 s, 55℃90 s,72℃120 s，共35个循环。②第二次PCR扩增：总体积30 μl，其中第1次PCR扩增产物5 μl加入10×AMV-RT缓冲液3 μl，2 mmol/LdNTP3 μl，Taq酶2 U，型特异性引物P3～P7终浓度均为0.8 μmol/L，反应条件为94℃60 s，60℃60 s，72℃90 s，共30个循环，72℃延伸5 min。每次扩增均设HCV RNA阳性血清对照，未加模板的阴性对照。
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第2次PCR扩增产物10 μl在6%聚丙烯酰胺凝胶上电泳，溴化乙锭染色后在紫外灯下观察，HCVⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的扩增产物长度分别为57 bp, 144 bp, 174 bp及123 bp。
2 结果
2.1 84例血清抗-HCV及HCV RNA均阳性的丙型肝炎HCV基因分型结果 84例丙型肝炎中，HCV-Ⅱ型45例(53.6%)，HCV-Ⅲ型26例(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型13例(15.5%)。未检出Ⅰ型及Ⅳ型。见图1。
图1 丙型肝炎HCV基因分型结果
1：χ174 DNA/Hae Ⅲ；2，6：HCV-Ⅱ型；3：HCV-Ⅲ型；
4，5：Ⅱ/Ⅲ混合型；7：阴性对照
, 百拇医药
Fig.1 The results of HCV genotyping
1:χ174 DNA/Hae Ⅲ marker. 2,6:HCV-Ⅱ genotype.3:HCV-Ⅲ genotype.
4,5: Ⅱ/Ⅲ mixed type. 7: Negative control
2.2 各型丙型肝炎HCV基因分型结果 各型丙型肝炎HCV基因分型结果表明，HCV不同基因型在不同临床类型丙型肝炎中总体分布不一致，经RXC表χ2检验，χ2=18.2,P<0.05。在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中，HCV-Ⅱ型感染分别占55.6%，36.2%，75.0%，85.7%及88.9%；HCV-Ⅲ型感染分别占22.2%，46.8%，8.3%，0%及11.1%。慢性肝炎中度、重度及肝炎后肝硬化组HCV-Ⅱ型感染率显著高于慢性肝炎轻度组(P<0.05或P<0.01)；HCV-Ⅲ感染率显著低于慢性肝炎轻度组(P<0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 各临床型丙型肝炎HCV基因分型结果
Tab.1 HCV Genotypes of hepatitis C in different clinical types HC临床类型
HC clinical types
例数
Cases
Ⅱ型
GenotypeⅡ
Ⅲ型
GenotypeⅢ
Ⅱ/Ⅲ混合型型
, http://www.100md.com Ⅱ/Ⅲmixed type
例数
Cases
(%)
例数
Cases
(%)
例数
Cases
(%)
急性肝炎
Acute hepatitis
9
, 百拇医药
5
(55.6)
2
(22.2)
2
(22.2)
慢性肝炎
Chronic hepatitis
轻度
Mild degree
47
17
(36.2)
, 百拇医药
22
(46.8)
8
(17.0)
中度
Moderate degree
12
9
(75.0)*
1
(8.3)*
2
, 百拇医药 (16.7)
重度
Severe degree
7
6
(85.7)*
1
(14.3)
肝硬化
Liver cirrhosis
9
8
(88.9)**
, http://www.100md.com
1
(11.1)*
合计
Total
84
45
(53.6)
26
(30.9)
13
(15.5)
注：与慢性肝炎轻度比较，经χ2检验，*P<0.05，**P<0.01
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Note:Compared with mild degree of chronic hepatitis,by χ2test,*P<0.05，**P<0.01
2.3 输血后丙型肝炎及散发性丙型肝炎患者HCV的基因分型结果 输血后及散发性丙型肝炎患者HCV基因分型结果表明，HCV不同基因型在输血后丙型肝炎及散发性丙型肝炎中分布一致，经R×C表χ2检验，χ2=2.05，P>0.05。见表2。
表2 输血后及散发性丙型肝炎HCV基因分型结果
Tab.2 HCV genotypes of post-transfusion and sporadic hepatitis C HC组别
HC Group
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例数
Cases
Ⅱ型
GenotypeⅡ
Ⅲ型
GenotypeⅢ
Ⅱ/Ⅲ混合型
Ⅱ/Ⅲmixed type
例数
Cases
(%)
例数
Cases
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(%)
例数
Cases
(%)
输血后肝炎
Post-transfusion hepatitis
43
22
(51.2)
12
(27.9)
9
(20.9)
, http://www.100md.com
散发性肝炎
Sporadic hepatitis
41
23
(56.1)
14
(34.1)
4
(9.8)
3 讨论
HCV基因型有一定的地区分布，美国以Ⅰ型为主，日本以Ⅱ型为主，我国也以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型。杜绍财等[2]报道北京、武汉、广州、西安、重庆、广西等地区HCV感染均以Ⅱ型为主，这些地区中北京Ⅲ型感染率最高(19%)，广州Ⅱ/Ⅲ混合型感染率
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最高(9%)。本研究结果表明沈阳地区HCV感染以Ⅱ型为主(53.6%)，其次为Ⅲ型(30.9%)，Ⅱ/Ⅲ混合型亦不少见(15.5%)，提示本地区Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型感染较其它地区高，因此今后本地区HCV感染的病原学诊断、临床治疗、疫苗研制等研究，除应着重针对Ⅱ型病毒进行外，不应忽视Ⅲ型及Ⅱ/Ⅲ混合型。
Pistello等[3]通过肝组织学检查及HCV基因型研究，指出HCV-Ⅱ型与严重肝损害有关。Pozzato等[4]报道伴有肝硬变的患者均为HCV-Ⅱ型感染，而无肝硬变的慢性肝炎则分布在其他三个类型或混合型中，认为HCV基因型与慢性肝病的严重程度有关。本研究结果表明，HCV不同基因型在不同临床类型丙型肝炎中总体分布有显著差异(P<0.05)。急性肝炎、慢性肝炎中度及重度、肝炎后肝硬化组HCV感染以Ⅱ型为主，且HCV-Ⅱ型感染率，肝硬化组>慢性肝炎重度>慢性肝炎中度>急性肝炎；而谷丙转氨酶轻度升高或正常的慢性肝炎轻度患者HCV感染以Ⅲ型为主。提示HCV-Ⅱ型可能具有较强的毒力及致病性，因此HCV-Ⅱ型感染所致丙型肝炎较重，而HCV-Ⅲ型感染所致丙型肝炎临床病情多较轻，HCV基因型与丙型肝炎病人临床病情及其严重程度密切相关。
, 百拇医药
HCV基因型在输血后丙型肝炎与散发性丙型肝炎中分布无显著差异，说明HCV感染型别与感染途径无密切关系。本研究中，散发性丙型肝炎中慢性肝炎轻度偏多，临床病情略轻于输血后丙型肝炎，但经统计学处理无显著差异，该组HCV-Ⅲ型感染(34.1%)略高于输血后丙型肝炎(27.9%)可能与此有关。输血后丙型肝炎Ⅱ/Ⅲ混合型感染(20.9%)高于散发性丙型肝炎(9.8%)，提示Ⅱ/Ⅲ混合型感染可能与反复输血及血制品有关。
本课题属辽宁省科研基金资助项目
参考文献
1 Okamoto H, Sugiyama Y, Okada S, et al. Typing hepatitis C virus by polymerase chain reaction with type-specific primers: application to clinical surveys and tracing infectious sources. J Gen Virol, 1992, 73:673-679.
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(收稿：1997-12-11 修回：1998-12-28), 百拇医药