口腔鳞癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性与颈淋巴结转移的关系*
作者：刘 刚 李金荣
单位：刘 刚 李金荣 430070武汉，湖北医科大学口腔医学院
关键词：口腔鳞癌；转移；纤溶酶原激活剂；纤溶酶原激活剂抑制剂
临床口腔医学杂志990104 提 要 采用发色底物法测量了口腔鳞癌组织及相应癌旁组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和纤溶酶原激活剂的抑制剂(PAI-1)的活性，并分析其与口腔鳞癌各病理参数的关系。结果显示：肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于相应癌旁组织(P<0.01)；肿瘤组织中uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学分级无关，但uPA活性与临床分期有关；有转移的肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于无转移肿瘤组织(P<0.01)；9例淋巴结转移灶中，有7例uPA及PAI-1活性高于原发癌组织。本文结果提示：uPA及PAI-1活性升高可能是促进口腔鳞癌细胞发生转移的因素之一。
, 百拇医药
The Relationship between activity of urokinase-type plasminogen activator and Its inhibitor in oral squamous carcinoma tissue and metastasis to neck lymphnode. Liu Gang, Li Jingrong. College of Stomatalogy HuBei Medical University, Wuhan, HuBei,430070
Abstract Chromogenic substrate assay was used to determine the activity of uPA and PAI-1 in tumor extract, their relationship with clinlcal and pathological parameters were analysed. It was found that activity of uPA and PAI-1 in tumor tissue was much higher than those in the corresponding normal tissue(P<0.01); There was no relationship between activity of uPA and PAI-1 and size, histalogical classification of tumor, but the activity of uPA had positive relation to clinical stage; The uPA and PAI-1 activity in tumor with metastasis were significantly higher than those in nonmetastasis tumor(P>0.01),furthermore, it was shown that uPA and PAI-1 in metastastic lymphnode were greatly higher than that in primary tumor. The result indicated elevation of activity of uPA and PAI-1 might be responsible for the metastasis to neck lymphnode.
, 百拇医药
Key words Oral Squamous Carcinoma Metastasis Plasminogen Activator Plaminogen Activator Inhibitor
许多研究表明：纤维蛋白溶解系统在恶性肿瘤的浸润和转移过程中可能起着非常重要的作用[1、2]。本文检测了30例口腔鳞癌患者癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)及纤溶酶原激活剂抑制剂I(PAI-1)，目的在于阐明它们与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。
材料和方法
1. 临床资料
30例口腔鳞癌患者均为1997年5月至1998年9月间我院住院病人，术前未接受任何放疗、化疗,其中男性21例，女性9例，年龄29～65岁，平均42岁。临床分期根据UICC口腔癌分期标准。所有原发灶及淋巴结转移灶均经病理检查证实。
, 百拇医药
2. 主要仪器及试剂
uPA和PAI-1活性测定试剂盒由北京医科大学病理系提供，高速低温离心机；酶标测定仪；Morach-2000自动生化分析仪。
3. 标本采集及处理
肿瘤组织及癌旁组织离体三十分钟内于液氮中速冻后置-70℃冰箱保存，检测前按文献制备组织抽提液[3]。
4. 检测方法
uPA及PAI-1活性根据试剂盒提供的程序测定。蛋白质浓度用Morarch—2000自动生化分析仪测定。uPA活性以IU/mg蛋白质表示，PAI-1活性采用AU/mg蛋白质表示。
5. 统计学处理
, 百拇医药
采用t检验。
结 果
1. 口腔鳞癌及癌旁组织中uPA和PAI-1活性测定结果(表1)。
表1 口腔鳞癌及癌旁组织uPA和PAI-1活性(
±s) 组 别
例数
uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
鳞癌组织
, 百拇医药
30
2.35±0.92
11.37±2.25
癌旁组织
30
1.01±0.58*
4.58±1.21*
*与鳞癌组织比较 (P<0.01)
鳞癌组织中uPA及PAI-1活性明显高于癌旁组织(P<0.01)。
2. 癌组织中uPA及PAI-1活性和各临床病理参数的关系(表2)。
, 百拇医药
表2 口腔鳞癌组织中uPA和PAI-1活性与各病
理参数的关系 (±s) 组 别
例数
uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
有颈淋巴结转移
9
2.81±0.97
14.85±2.97
, 百拇医药
无颈淋巴结转移
21
2.03±0.84**
8.63±1.92**
肿瘤直径<2cm
5
2.21±0.78
10.54±2.07
肿瘤直径2～4cm
18
2.39±0.67
11.85±2.23
, http://www.100md.com
肿瘤直径>4cm
7
2.34±0.93
11.12±1.97
Ⅰ期
6
2.05±0.72
10.87±2.01
Ⅱ期
6
2.13±0.73
12.85±2.83
, 百拇医药 Ⅲ期
7
2.28±0.92
11.29±1.97
Ⅳ期
11
2.54±1.02*
11.13±2.17
*与相应参数比P<0.05 **与相应参数比P<0.01
uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学分级无关(P>0.05)，但uPA活性与肿瘤分期有关(P<0.05)；有转移的肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于无转移肿瘤组织(P<0.01)，且9例淋巴结转移灶中，有7例uPA及PAI-1活性高于相应的原发癌组织，只有2例淋巴癌组织uPA及PAI-1活性低于原发癌组织(表3)。
, http://www.100md.com
表3 淋巴结转移灶与其相应的原发灶uPA及
PAI-1活性 (±s) 组 别
uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
淋巴结转移灶
3.24±1.31
17.93±3.45
原 发 灶
, 百拇医药
2.81±0.97
14.85±2.97
讨 论
uPA及其天然抑制剂PAI-1是丝氨酸蛋白酶类的主要组成成份，近年来较多研究表明肿瘤uPA与PAI-1的表达及活性与癌细胞的转移呈密切相关。uPA以酶原的形式分泌后可被激活而具有激活纤溶酶原的活性，而且uPA可与癌细胞表面之uPA受体结合而于局部不断激活纤溶酶导致基底膜的溶解，促进转移的发生[4]。PAI-1在有转移患者活性增强是癌细胞生长过程中的调节机制,尽管它抑制uPA活性而可能对转移起到抑制作用，但其更重要的作用似乎是抑制uPA对肿瘤组织自身基质的降解。
本研究结果显示癌组织uPA及PAI-1活性远高于癌旁组织，表明癌的发生和生长过程中因不断要向周围组织浸润而需要高活性的蛋白酶降解基质；uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学类型均无关，而与淋巴结是否有转移呈显著相关性(P<0.01)，表明两者活性的表达并不受其它因素的控制，而只是参与转移的形成。Heron等将人uPA基因转染入低转移的黑色素细胞，发现其转移能力提高，但生长速度未改变也说明了相似的道理[5]。本实验9例淋巴结转移癌中uPA及PAI-1活性除2例外都高于原发瘤组织，尽管样本较少，但仍可提示uPA及PAI-1活性的增高是口腔鳞癌发生颈淋巴结转移的重要原因。本实验也为口腔鳞癌转移抑制的研究提供了一条新的思路。
, http://www.100md.com
*本课题受湖北省自然科学基金资助
参 考 文 献
[1] Quax PHA, Muijen GNPV, Verhoeff EJDW. Metastasis behavior of human melanoma lines in nude mice correlates with urokinase-type plasminogen activator, its type-1 inhibitor and urokinase-mediated matrix degradation. Cell Biology, 1991,115(1):191
[2] Hasen JG, Ralfki E, Kirkeby LT, et al. Localization of urokinase-type plasminogen activator in stromal cells in adenocarcinomas of the colon in human. Am J Pathol, 1991,148(1):111
, 百拇医药
[3] Sumiyoshi K, Baba S, Sakaguchi, et al. Increase in levels of plasminogen activator and type-1 plasminogen activator inhibitor in human breast cancer:possible roles in tumor progression and metastasis. Ttromb Res, 1991,63:159
[4] Ellis V, Scully MF, Kakkar VV. Plasminogen activation initiated by single-chain urokinase-type plasminogen activator, potention by 973 monocyte. Biol Chem. 1989,264(4):2185
[5] Heron Yu, Schultz RM. Relationship between secreted urokinase plasminase activator activity and metastatic potential in murine B16 cells transfected with human urokinase sense and antisensegenes. Cancer Res, 1990,50:7623
(收稿：1998—10—03), 百拇医药
单位：刘 刚 李金荣 430070武汉，湖北医科大学口腔医学院
关键词：口腔鳞癌；转移；纤溶酶原激活剂；纤溶酶原激活剂抑制剂
临床口腔医学杂志990104 提 要 采用发色底物法测量了口腔鳞癌组织及相应癌旁组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和纤溶酶原激活剂的抑制剂(PAI-1)的活性，并分析其与口腔鳞癌各病理参数的关系。结果显示：肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于相应癌旁组织(P<0.01)；肿瘤组织中uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学分级无关，但uPA活性与临床分期有关；有转移的肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于无转移肿瘤组织(P<0.01)；9例淋巴结转移灶中，有7例uPA及PAI-1活性高于原发癌组织。本文结果提示：uPA及PAI-1活性升高可能是促进口腔鳞癌细胞发生转移的因素之一。
, 百拇医药
The Relationship between activity of urokinase-type plasminogen activator and Its inhibitor in oral squamous carcinoma tissue and metastasis to neck lymphnode. Liu Gang, Li Jingrong. College of Stomatalogy HuBei Medical University, Wuhan, HuBei,430070
Abstract Chromogenic substrate assay was used to determine the activity of uPA and PAI-1 in tumor extract, their relationship with clinlcal and pathological parameters were analysed. It was found that activity of uPA and PAI-1 in tumor tissue was much higher than those in the corresponding normal tissue(P<0.01); There was no relationship between activity of uPA and PAI-1 and size, histalogical classification of tumor, but the activity of uPA had positive relation to clinical stage; The uPA and PAI-1 activity in tumor with metastasis were significantly higher than those in nonmetastasis tumor(P>0.01),furthermore, it was shown that uPA and PAI-1 in metastastic lymphnode were greatly higher than that in primary tumor. The result indicated elevation of activity of uPA and PAI-1 might be responsible for the metastasis to neck lymphnode.
, 百拇医药
Key words Oral Squamous Carcinoma Metastasis Plasminogen Activator Plaminogen Activator Inhibitor
许多研究表明：纤维蛋白溶解系统在恶性肿瘤的浸润和转移过程中可能起着非常重要的作用[1、2]。本文检测了30例口腔鳞癌患者癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)及纤溶酶原激活剂抑制剂I(PAI-1)，目的在于阐明它们与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。
材料和方法
1. 临床资料
30例口腔鳞癌患者均为1997年5月至1998年9月间我院住院病人，术前未接受任何放疗、化疗,其中男性21例，女性9例，年龄29～65岁，平均42岁。临床分期根据UICC口腔癌分期标准。所有原发灶及淋巴结转移灶均经病理检查证实。
, 百拇医药
2. 主要仪器及试剂
uPA和PAI-1活性测定试剂盒由北京医科大学病理系提供，高速低温离心机；酶标测定仪；Morach-2000自动生化分析仪。
3. 标本采集及处理
肿瘤组织及癌旁组织离体三十分钟内于液氮中速冻后置-70℃冰箱保存，检测前按文献制备组织抽提液[3]。
4. 检测方法
uPA及PAI-1活性根据试剂盒提供的程序测定。蛋白质浓度用Morarch—2000自动生化分析仪测定。uPA活性以IU/mg蛋白质表示，PAI-1活性采用AU/mg蛋白质表示。
5. 统计学处理
, 百拇医药
采用t检验。
结 果
1. 口腔鳞癌及癌旁组织中uPA和PAI-1活性测定结果(表1)。
表1 口腔鳞癌及癌旁组织uPA和PAI-1活性(
±s) 组 别例数
uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
鳞癌组织
, 百拇医药
30
2.35±0.92
11.37±2.25
癌旁组织
30
1.01±0.58*
4.58±1.21*
*与鳞癌组织比较 (P<0.01)
鳞癌组织中uPA及PAI-1活性明显高于癌旁组织(P<0.01)。
2. 癌组织中uPA及PAI-1活性和各临床病理参数的关系(表2)。
, 百拇医药
表2 口腔鳞癌组织中uPA和PAI-1活性与各病
理参数的关系 (
±s) 组 别例数
uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
有颈淋巴结转移
9
2.81±0.97
14.85±2.97
, 百拇医药
无颈淋巴结转移
21
2.03±0.84**
8.63±1.92**
肿瘤直径<2cm
5
2.21±0.78
10.54±2.07
肿瘤直径2～4cm
18
2.39±0.67
11.85±2.23
, http://www.100md.com
肿瘤直径>4cm
7
2.34±0.93
11.12±1.97
Ⅰ期
6
2.05±0.72
10.87±2.01
Ⅱ期
6
2.13±0.73
12.85±2.83
, 百拇医药 Ⅲ期
7
2.28±0.92
11.29±1.97
Ⅳ期
11
2.54±1.02*
11.13±2.17
*与相应参数比P<0.05 **与相应参数比P<0.01
uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学分级无关(P>0.05)，但uPA活性与肿瘤分期有关(P<0.05)；有转移的肿瘤组织中uPA及PAI-1活性远高于无转移肿瘤组织(P<0.01)，且9例淋巴结转移灶中，有7例uPA及PAI-1活性高于相应的原发癌组织，只有2例淋巴癌组织uPA及PAI-1活性低于原发癌组织(表3)。
, http://www.100md.com
表3 淋巴结转移灶与其相应的原发灶uPA及
PAI-1活性 (
±s) 组 别uPA活性
(IU/mg蛋白质)
PAI-1活性
(AU/mg蛋白质)
淋巴结转移灶
3.24±1.31
17.93±3.45
原 发 灶
, 百拇医药
2.81±0.97
14.85±2.97
讨 论
uPA及其天然抑制剂PAI-1是丝氨酸蛋白酶类的主要组成成份，近年来较多研究表明肿瘤uPA与PAI-1的表达及活性与癌细胞的转移呈密切相关。uPA以酶原的形式分泌后可被激活而具有激活纤溶酶原的活性，而且uPA可与癌细胞表面之uPA受体结合而于局部不断激活纤溶酶导致基底膜的溶解，促进转移的发生[4]。PAI-1在有转移患者活性增强是癌细胞生长过程中的调节机制,尽管它抑制uPA活性而可能对转移起到抑制作用，但其更重要的作用似乎是抑制uPA对肿瘤组织自身基质的降解。
本研究结果显示癌组织uPA及PAI-1活性远高于癌旁组织，表明癌的发生和生长过程中因不断要向周围组织浸润而需要高活性的蛋白酶降解基质；uPA及PAI-1活性与肿瘤大小、组织学类型均无关，而与淋巴结是否有转移呈显著相关性(P<0.01)，表明两者活性的表达并不受其它因素的控制，而只是参与转移的形成。Heron等将人uPA基因转染入低转移的黑色素细胞，发现其转移能力提高，但生长速度未改变也说明了相似的道理[5]。本实验9例淋巴结转移癌中uPA及PAI-1活性除2例外都高于原发瘤组织，尽管样本较少，但仍可提示uPA及PAI-1活性的增高是口腔鳞癌发生颈淋巴结转移的重要原因。本实验也为口腔鳞癌转移抑制的研究提供了一条新的思路。
, http://www.100md.com
*本课题受湖北省自然科学基金资助
参 考 文 献
[1] Quax PHA, Muijen GNPV, Verhoeff EJDW. Metastasis behavior of human melanoma lines in nude mice correlates with urokinase-type plasminogen activator, its type-1 inhibitor and urokinase-mediated matrix degradation. Cell Biology, 1991,115(1):191
[2] Hasen JG, Ralfki E, Kirkeby LT, et al. Localization of urokinase-type plasminogen activator in stromal cells in adenocarcinomas of the colon in human. Am J Pathol, 1991,148(1):111
, 百拇医药
[3] Sumiyoshi K, Baba S, Sakaguchi, et al. Increase in levels of plasminogen activator and type-1 plasminogen activator inhibitor in human breast cancer:possible roles in tumor progression and metastasis. Ttromb Res, 1991,63:159
[4] Ellis V, Scully MF, Kakkar VV. Plasminogen activation initiated by single-chain urokinase-type plasminogen activator, potention by 973 monocyte. Biol Chem. 1989,264(4):2185
[5] Heron Yu, Schultz RM. Relationship between secreted urokinase plasminase activator activity and metastatic potential in murine B16 cells transfected with human urokinase sense and antisensegenes. Cancer Res, 1990,50:7623
(收稿：1998—10—03), 百拇医药