益气通脉口服液制备工艺研究
作者：刘友平 李胜涛 李祖伦 罗永芬 李明富
单位：刘友平 李胜涛 李祖伦 罗永芬 李明富(成都中医药大学,四川 成都 610075)
关键词：益气通脉口服液；工艺研究；正交试验
成都中医药大学学报990125 摘 要：对益气通脉口服液的制备工艺进行了研究，结果为：以挥发油得率为指标，采用水蒸气蒸馏法提取挥发性有效成分，确定芳香水收集量；以丹参酮ⅡA的含量为指标，采用正交设计法优选了脂溶性有效部位提取工艺；以浸出物和黄芪甲甙的含量为指标，采用正交设计法优选了不煎煮提取工艺；对醇沉条件进行了考察，确定了制备工艺。由此制得的口服液经稳定性试验和药效学试验,证明该工艺稳定,合理可行。
中图分类号：R943 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)01-0054-04
, 百拇医药
Technological Studies of Preparing Yiqi Tongmai Oral Liquid
LIU Youping, LI Shengtao, LI Zhulun, et al (刘友平，等)
Medicine College, Chengdu University of TCM (Chengdu, 610075,China)
SUMMARY：Reported the results of the to technological studies of preparing Yiqi Tongmai Oral Liquid and the methods were as fellow. Distillation was adopted to extract the volatile effictive component, orthogonal design was adopted to optimum seek the technology of extracting lipid solubility effctive component and to define boil extraction technology. The oral Liquid made by above methods was put to tested and the result showed the technological was dependablr.
, http://www.100md.com
KEY WORDS：Technological studies; Yiqi Tongmai oral Liquid; Orthogonal test
益气通脉口服液处方由川芎、当归、丹参、延胡索、黄芪等多味中药组成，具有化瘀通脉、温通止痛的功效，临床用于冠心病、心绞痛等疾病的治疗，疗效确切。我们对其制备工艺现进行了研究，现将结果报告如下。
1 材料
1.1 仪器
(1)CS-930双波长薄层扫描仪(日本岛津公司)。
(2)微量点样毛细管(美国Drummond公司)。
1.2 试剂
(1)丹参酮ⅡA，黄芪甲甙对照品，均为中国药品生物制品检定所提供。
, http://www.100md.com
(2)薄层层析硅胶G(60型)，青岛海洋化工集团公司产品。
(3)所用试剂均为分析纯。
2 制备工艺及研究结果
2.1 挥发性有效成分提取工艺的优选
按处方量取川芎、当归等含挥发性有效成分的药材，按照《中国药典》1995年版附录X D.挥发油测定法甲法[1]测定挥发油含量。测定结果为1.41mL/kg。取当归、川芎等药材1kg，按水蒸气蒸馏法提取，收集不同量芳香水，将所得芳香水按上法测定其中挥发油含量，计算挥发油提取率，结果见表1。
表1 芳香水提取量优选 芳香水收集量
(相当于药材重倍数)
, http://www.100md.com
芳香水含挥发油量
(mL/kg)
挥发油提取率
(%)
1
0.64
45.15
2
0.81
57.68
3
1.04
73.65
, http://www.100md.com
4
1.29
91.25
5
1.31
92.67
6
1.35
95.50
从表1可看出，当芳香水收集量为药材重4倍量时,挥发油提取率可达91.25%，故确定芳香水收集量为4倍量.将提取后的药渣与余药合煎以提取其它有效成分。
2.2 脂溶性有效部位提取工艺的优选
, http://www.100md.com
丹参的有效成分包括脂溶性和水溶性两部分，故丹参的提取采用醇水双提法[2]；方中延胡索的有效成分为易溶于乙醇而在水中溶解度较小的生物碱，故将其与丹参一同采用乙醇提取。对乙醇浓度、用量、提取次数、提取时间的考察结果见表2。表2 脂溶性部位提取工艺考察因素水平表 水平
因 素
乙醇浓度(%)
乙醇用量
提取次数
提取时间(h)
1
60
4倍
1次
, 百拇医药
1.0
2
70
6倍
2次
1.5
3
80
8倍
3次
2.0
2.2.1 丹参酮ⅡA含量的测定U
(1)供试液的制备：按处方量取丹参、延胡索进行正交试验，减压回收乙醇至100mL，取5.0mL置水浴蒸干，残渣以无水乙醇溶解并定容于5mL容量瓶中，作为供试品溶液。
, 百拇医药
(2)对照液的制备:取丹参酮ⅡA 对照品,加无水乙醇制成1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液.
(3)层析与扫描条件：硅胶G板，展开剂苯-醋酸乙酯(19∶1)，上行展开，丹参酮ⅡA日光下检视为一紫红色斑点。扫描条件为双波长反射法锯齿扫描，λS=268 nm，λR=330 nm，SX=3。
(4)标准曲线制备：分别取对照品溶液1、2、3、4、5μL点于同一硅胶G板上，按上述条件展开、扫描，测定峰面积，得回归方程Y=396.03+17341.40X，r=0.9991，线性范围为1.02～5.10 μg。
(4)样品测定：取供试品溶液5μL，对照品溶液2、4μL，分别交叉点于同一硅胶G板上，同前展开，扫描测定，以外标两点法计算提取物中丹参酮ⅡA含量，结果见表3。
, 百拇医药
2.2.2 正交方案及结果
选择L9(34)正交表安排试验，以丹参酮ⅡA的含量为指标，对醇提工艺进行筛选，试验结果见表3。表3 正交试验方案及结果 因素
乙醇浓度(%)
乙醇用量
提取次数
提取时间(h)
丹参酮ⅡA含量(%)
1
1
1
, 百拇医药
1
1
0.023
试2
1
2
2
2
0.047
3
1
3
3
3
, 百拇医药
0.014
4
2
1
2
3
0.048
验5
2
2
3
1
0.016
6
, 百拇医药
2
3
1
2
0.062
号7
3
1
1
2
0.059
8
3
2
, http://www.100md.com
2
3
0.055
6
3
3
3
1
0.067
j
0.028
0.043
0.047
, http://www.100md.com
0.039
j
0.042
0.039
0.054
0.056
j
0.060
0.048
0.030
0.064
RI
, http://www.100md.com
0.032
0.009
0.024
0.010
对表3进行直观分析可得出结论，影响提取的主要因素为A(乙醇浓度)及因素C(提取次数)，其次为因素B(乙醇用量)及D(提取时间)，最佳提取条件为A2B3C2D2，即以80%乙醇8倍量，加热回流提取2次，提取时间为1.5h。
2.3 水溶性有效部位提取工艺的优选
处方中黄芪等药的有效成分易溶于水，故用煎煮法提取。将提取挥发油及经醇提后的丹参等药渣与黄芪等合并加水煎煮提取。对影响煎提的主要因素进行了考察，以浸出物含量和黄芪甲甙含量为指标，用L正交表安排试验，优选煎煮工艺条件。考察因素及水平见表4。表4 水溶性有效部位提取工艺考察因素及水平 水平
, 百拇医药
因 素
加水量%
浸泡时间
煎煮时间
煎煮次数
1
8倍
0.5h
1.0h
1次
2
12倍
1.0h
, 百拇医药
1.5h
2次
3
12倍
1.5h
2.0h
3次
2.3.1 浸出物含量测定
取药液(浓度100%)10.0mL置于已恒重的蒸发皿中，于水浴上蒸干，105℃干燥3h，移至干燥器中冷却，称重。
2.3.2 黄芪甲甙的双波长薄层扫描含量测定
(1)供试液的制备：精密吸取各试验号煎煮液(浓度100%)15.0mL，以水饱和正丁醇萃取5次，正丁醇层以5%NaHCO3溶液洗涤4次，水洗1次，蒸干正丁醇，残渣加水少量溶解，上D101大孔吸附树脂柱(1.5cm×12cm)，先以水洗脱，继以30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣以甲醇溶解定容至2mL容量瓶中，作为供试液。
, 百拇医药
(2)对照液的制备：取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每mL含1mg的溶液作为对照液。
(3)层析与扫描条件：硅胶G板(自制，含0.1%CMC-Na)，展开剂为醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)，上行展开，10%H2SO4乙醇溶液为显色剂，100～105℃烘5～10min；采用双波长反射法锯齿扫描，λS=520 nm，λR=600 nm。
(4)标准曲线制备：分别取对照品溶液1、2、3、4、5μL点于同一硅胶G板上，按上述条件展开、扫描，测定峰面积，得回归方程Y=2508.2677+3372.6879X，r=0.9954，线性范围为1～5μg。
(5)样品测定：取供试液5μL，对照液2 、4μL分别交叉点于同一硅胶G板上，同前展开，扫描测定，以外标两点法计算黄芪甲甙含量，结果见表5。表5 正交试验结果及方差分析 因素
, http://www.100md.com
A
加水量
B
浸泡时间
C
煎煮时间
D
煎者次数
浸出物量
(%)
黄芪甲甙含量
(%×10-3)
试 验 号
, http://www.100md.com
1
1
1
1
1
19.5988
8.2268
2
1
2
2
2
27.8104
10.3770
, http://www.100md.com
3
1
3
3
3
29.4996
11.5059
4
2
1
2
3
26.5942
12.4623
, 百拇医药
5
2
2
3
1
20.5848
4.9128
6
2
3
1
2
26.0324
12.2613
, http://www.100md.com
7
3
1
3
2
29.5096
14.9230
8
3
2
1
3
28.8104
16.8712
, 百拇医药
9
3
3
2
1
20.9864
7.0060
浸出物含量方差分析
Ⅰ
76.9809
75.7026
74.4417
61.1700
, http://www.100md.com
=5848.6907
Ⅱ
74.1493
77.2092
75.3909
83.3523
Ⅲ
79.3101
76.5165
75.5939
84.9078
R
, 百拇医药 17555.8906
17546.9189
17546.5434
17758.4829
SSe
3.2728
0.2823
4.8237
70.8043
自由度
2
2
, http://www.100md.com
2
2
方差
1.6364
0.1412
2.4164
35.4022
F
11.5934
1
17.0871
250.8123
P
, 百拇医药
<0.01
黄芪甲甙含量方差分析
Ⅰ
30.1197
35.6124
37.3593
20.1456
=1079.2604
Ⅱ
29.6364
32.1609
, http://www.100md.com
29.8452
37.5612
Ⅲ
38.8002
30.7851
31.3518
40.8477
R
3290.9680
3250.2676
3269.3887
1161.7412
, 百拇医药
SSe
17.7289
4.1621
10.5358
82.4808
自由度
2
2
2
2
方差
8.8644
2.0810
, 百拇医药
5.2679
41.2404
F
4.2596
1
2.5314
19.8171
P
<0.05
从表5浸出物含量和黄芪甲甙含量的方差分析结果可看出，D因素即煎煮次数对两个指标均有显著意义，A、B、C 3个因素无显著意义，结合生产实际，选择最佳煎煮工艺条件为A3B1C1D3，即加水12倍,浸泡0.5h,共提取3次,每次1h。
, 百拇医药
2.4 醇沉浓度的优选
由于水煎煮提取了大量的淀粉、树脂等杂质，影响了制剂的稳定性，采用乙醇沉淀可除去淀粉等杂质，故对乙醇沉浓度进行优选。按处方量取药材1000g，采用以上工艺条件提取，合并煎煮液，浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，将药液分为4份，分别调含醇量至50%、60%、70%、80%，放置24h，滤过，滤液减压回收乙醇至100mL，测定药液中浸出物含量及黄芪甲甙含量，计算有效成分转移率，观察药液外观性状，结果见表6。表6 醇沉浓度优选结果 醇沉浓度
(%)
浸出物转移率
(%)
黄芪甲甙转移率
(%)
, http://www.100md.com
外观性状
50
85.3
91.9
微浑
60
72.9
85.4
少量沉淀
70
66.9
32.2
少量沉淀
, 百拇医药
80
56.2
18.9
澄明
从表6可见，当醇沉浓度为50%和60%时，浸出物和黄芪甲甙的转移率较高，结合药液的外观性状，选择60%为最佳醇沉浓度。
2.5 增溶剂的选择
方中川芎等提取了芳香水,丹参等提取了脂溶性有效成分，这两个部分在液体制剂中不稳定，易析出沉淀、分层，为了提高制剂的稳定性，经反复筛选，确定以吐温-80为增溶剂，可提高制剂的稳定性。
2.6 制备工艺的确定
处方中，川芎等以水蒸气蒸馏法提取，收集药材重4倍量芳香水，加适量吐温-80增溶备用，蒸馏后药液另器收集。丹参等以8倍量80%乙醇回流提取2次，提取时间为1.5h，合并乙醇提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液的相对密度1.08～1.10(50℃)，加适量吐温-80增溶备用。提取芳香水后药渣及丹参等醇提后药渣与处方中黄芪等加水12倍，煎提3次，提取时间均为1h，合并煎提液及上述蒸馏后药液，浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，调含醇量至60%，静置，取上清液，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度1.08～1.10(50℃)，加入芳香水及丹参等脂溶性有效部位，调至总量即得。
, 百拇医药
3 讨论
根据处方组成药物有效成分性质不同，将药物分为3组进行提取，以保留有效成分。按此工艺进行中试，3批样品经稳定性试验，符合有关规定，药效学试验结果满意(研究结果将另文报道)，说明本工艺合理可行。
在水溶性成分提取研究中可见，煎煮次数对黄芪甲甙的含量有极显著意义，提示含黄芪的制剂应注意提取次数以3次为宜。
丹参中脂溶性有效成分主要包括了菲醌类化合物如丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB和异丹参酮等，如丹参直接与其余各药加水煎煮，水提液中不能检出丹参酮ⅡA，采用乙醇提取后可在成品中检出丹参酮ⅡA，提示对含丹参的制剂应注意提取方法及提取溶媒的选择，一般应采用醇水双提法以最大限度提取其有效成分。
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：刘友平,女，1964年4月生；在读博士研究生；副教授；中药学专业；主要研究方向：中药有效成分及品质研究。
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部).95年版.广州：广东科技出版社，1995.附录62
[2]张玲，于宗渊，徐新刚等.丹参水醇法提取工艺研究.中成药，1995，17(5)：1
(收稿日期:1998-09-17), 百拇医药
单位：刘友平 李胜涛 李祖伦 罗永芬 李明富(成都中医药大学,四川 成都 610075)
关键词：益气通脉口服液；工艺研究；正交试验
成都中医药大学学报990125 摘 要：对益气通脉口服液的制备工艺进行了研究，结果为：以挥发油得率为指标，采用水蒸气蒸馏法提取挥发性有效成分，确定芳香水收集量；以丹参酮ⅡA的含量为指标，采用正交设计法优选了脂溶性有效部位提取工艺；以浸出物和黄芪甲甙的含量为指标，采用正交设计法优选了不煎煮提取工艺；对醇沉条件进行了考察，确定了制备工艺。由此制得的口服液经稳定性试验和药效学试验,证明该工艺稳定,合理可行。
中图分类号：R943 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)01-0054-04
, 百拇医药
Technological Studies of Preparing Yiqi Tongmai Oral Liquid
LIU Youping, LI Shengtao, LI Zhulun, et al (刘友平，等)
Medicine College, Chengdu University of TCM (Chengdu, 610075,China)
SUMMARY：Reported the results of the to technological studies of preparing Yiqi Tongmai Oral Liquid and the methods were as fellow. Distillation was adopted to extract the volatile effictive component, orthogonal design was adopted to optimum seek the technology of extracting lipid solubility effctive component and to define boil extraction technology. The oral Liquid made by above methods was put to tested and the result showed the technological was dependablr.
, http://www.100md.com
KEY WORDS：Technological studies; Yiqi Tongmai oral Liquid; Orthogonal test
益气通脉口服液处方由川芎、当归、丹参、延胡索、黄芪等多味中药组成，具有化瘀通脉、温通止痛的功效，临床用于冠心病、心绞痛等疾病的治疗，疗效确切。我们对其制备工艺现进行了研究，现将结果报告如下。
1 材料
1.1 仪器
(1)CS-930双波长薄层扫描仪(日本岛津公司)。
(2)微量点样毛细管(美国Drummond公司)。
1.2 试剂
(1)丹参酮ⅡA，黄芪甲甙对照品，均为中国药品生物制品检定所提供。
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(2)薄层层析硅胶G(60型)，青岛海洋化工集团公司产品。
(3)所用试剂均为分析纯。
2 制备工艺及研究结果
2.1 挥发性有效成分提取工艺的优选
按处方量取川芎、当归等含挥发性有效成分的药材，按照《中国药典》1995年版附录X D.挥发油测定法甲法[1]测定挥发油含量。测定结果为1.41mL/kg。取当归、川芎等药材1kg，按水蒸气蒸馏法提取，收集不同量芳香水，将所得芳香水按上法测定其中挥发油含量，计算挥发油提取率，结果见表1。
表1 芳香水提取量优选 芳香水收集量
(相当于药材重倍数)
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芳香水含挥发油量
(mL/kg)
挥发油提取率
(%)
1
0.64
45.15
2
0.81
57.68
3
1.04
73.65
, http://www.100md.com
4
1.29
91.25
5
1.31
92.67
6
1.35
95.50
从表1可看出，当芳香水收集量为药材重4倍量时,挥发油提取率可达91.25%，故确定芳香水收集量为4倍量.将提取后的药渣与余药合煎以提取其它有效成分。
2.2 脂溶性有效部位提取工艺的优选
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丹参的有效成分包括脂溶性和水溶性两部分，故丹参的提取采用醇水双提法[2]；方中延胡索的有效成分为易溶于乙醇而在水中溶解度较小的生物碱，故将其与丹参一同采用乙醇提取。对乙醇浓度、用量、提取次数、提取时间的考察结果见表2。表2 脂溶性部位提取工艺考察因素水平表 水平
因 素
乙醇浓度(%)
乙醇用量
提取次数
提取时间(h)
1
60
4倍
1次
, 百拇医药
1.0
2
70
6倍
2次
1.5
3
80
8倍
3次
2.0
2.2.1 丹参酮ⅡA含量的测定U
(1)供试液的制备：按处方量取丹参、延胡索进行正交试验，减压回收乙醇至100mL，取5.0mL置水浴蒸干，残渣以无水乙醇溶解并定容于5mL容量瓶中，作为供试品溶液。
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(2)对照液的制备:取丹参酮ⅡA 对照品,加无水乙醇制成1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液.
(3)层析与扫描条件：硅胶G板，展开剂苯-醋酸乙酯(19∶1)，上行展开，丹参酮ⅡA日光下检视为一紫红色斑点。扫描条件为双波长反射法锯齿扫描，λS=268 nm，λR=330 nm，SX=3。
(4)标准曲线制备：分别取对照品溶液1、2、3、4、5μL点于同一硅胶G板上，按上述条件展开、扫描，测定峰面积，得回归方程Y=396.03+17341.40X，r=0.9991，线性范围为1.02～5.10 μg。
(4)样品测定：取供试品溶液5μL，对照品溶液2、4μL，分别交叉点于同一硅胶G板上，同前展开，扫描测定，以外标两点法计算提取物中丹参酮ⅡA含量，结果见表3。
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2.2.2 正交方案及结果
选择L9(34)正交表安排试验，以丹参酮ⅡA的含量为指标，对醇提工艺进行筛选，试验结果见表3。表3 正交试验方案及结果 因素
乙醇浓度(%)
乙醇用量
提取次数
提取时间(h)
丹参酮ⅡA含量(%)
1
1
1
, 百拇医药
1
1
0.023
试2
1
2
2
2
0.047
3
1
3
3
3
, 百拇医药
0.014
4
2
1
2
3
0.048
验5
2
2
3
1
0.016
6
, 百拇医药
2
3
1
2
0.062
号7
3
1
1
2
0.059
8
3
2
, http://www.100md.com
2
3
0.055
6
3
3
3
1
0.067
j0.028
0.043
0.047
, http://www.100md.com
0.039
j0.042
0.039
0.054
0.056
j0.060
0.048
0.030
0.064
RI
, http://www.100md.com
0.032
0.009
0.024
0.010
对表3进行直观分析可得出结论，影响提取的主要因素为A(乙醇浓度)及因素C(提取次数)，其次为因素B(乙醇用量)及D(提取时间)，最佳提取条件为A2B3C2D2，即以80%乙醇8倍量，加热回流提取2次，提取时间为1.5h。
2.3 水溶性有效部位提取工艺的优选
处方中黄芪等药的有效成分易溶于水，故用煎煮法提取。将提取挥发油及经醇提后的丹参等药渣与黄芪等合并加水煎煮提取。对影响煎提的主要因素进行了考察，以浸出物含量和黄芪甲甙含量为指标，用L正交表安排试验，优选煎煮工艺条件。考察因素及水平见表4。表4 水溶性有效部位提取工艺考察因素及水平 水平
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因 素
加水量%
浸泡时间
煎煮时间
煎煮次数
1
8倍
0.5h
1.0h
1次
2
12倍
1.0h
, 百拇医药
1.5h
2次
3
12倍
1.5h
2.0h
3次
2.3.1 浸出物含量测定
取药液(浓度100%)10.0mL置于已恒重的蒸发皿中，于水浴上蒸干，105℃干燥3h，移至干燥器中冷却，称重。
2.3.2 黄芪甲甙的双波长薄层扫描含量测定
(1)供试液的制备：精密吸取各试验号煎煮液(浓度100%)15.0mL，以水饱和正丁醇萃取5次，正丁醇层以5%NaHCO3溶液洗涤4次，水洗1次，蒸干正丁醇，残渣加水少量溶解，上D101大孔吸附树脂柱(1.5cm×12cm)，先以水洗脱，继以30%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣以甲醇溶解定容至2mL容量瓶中，作为供试液。
, 百拇医药
(2)对照液的制备：取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每mL含1mg的溶液作为对照液。
(3)层析与扫描条件：硅胶G板(自制，含0.1%CMC-Na)，展开剂为醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)，上行展开，10%H2SO4乙醇溶液为显色剂，100～105℃烘5～10min；采用双波长反射法锯齿扫描，λS=520 nm，λR=600 nm。
(4)标准曲线制备：分别取对照品溶液1、2、3、4、5μL点于同一硅胶G板上，按上述条件展开、扫描，测定峰面积，得回归方程Y=2508.2677+3372.6879X，r=0.9954，线性范围为1～5μg。
(5)样品测定：取供试液5μL，对照液2 、4μL分别交叉点于同一硅胶G板上，同前展开，扫描测定，以外标两点法计算黄芪甲甙含量，结果见表5。表5 正交试验结果及方差分析 因素
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A
加水量
B
浸泡时间
C
煎煮时间
D
煎者次数
浸出物量
(%)
黄芪甲甙含量
(%×10-3)
试 验 号
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1
1
1
1
1
19.5988
8.2268
2
1
2
2
2
27.8104
10.3770
, http://www.100md.com
3
1
3
3
3
29.4996
11.5059
4
2
1
2
3
26.5942
12.4623
, 百拇医药
5
2
2
3
1
20.5848
4.9128
6
2
3
1
2
26.0324
12.2613
, http://www.100md.com
7
3
1
3
2
29.5096
14.9230
8
3
2
1
3
28.8104
16.8712
, 百拇医药
9
3
3
2
1
20.9864
7.0060
浸出物含量方差分析
Ⅰ
76.9809
75.7026
74.4417
61.1700
, http://www.100md.com
=5848.6907
Ⅱ
74.1493
77.2092
75.3909
83.3523
Ⅲ
79.3101
76.5165
75.5939
84.9078
R
, 百拇医药 17555.8906
17546.9189
17546.5434
17758.4829
SSe
3.2728
0.2823
4.8237
70.8043
自由度
2
2
, http://www.100md.com
2
2
方差
1.6364
0.1412
2.4164
35.4022
F
11.5934
1
17.0871
250.8123
P
, 百拇医药
<0.01
黄芪甲甙含量方差分析
Ⅰ
30.1197
35.6124
37.3593
20.1456
=1079.2604
Ⅱ
29.6364
32.1609
, http://www.100md.com
29.8452
37.5612
Ⅲ
38.8002
30.7851
31.3518
40.8477
R
3290.9680
3250.2676
3269.3887
1161.7412
, 百拇医药
SSe
17.7289
4.1621
10.5358
82.4808
自由度
2
2
2
2
方差
8.8644
2.0810
, 百拇医药
5.2679
41.2404
F
4.2596
1
2.5314
19.8171
P
<0.05
从表5浸出物含量和黄芪甲甙含量的方差分析结果可看出，D因素即煎煮次数对两个指标均有显著意义，A、B、C 3个因素无显著意义，结合生产实际，选择最佳煎煮工艺条件为A3B1C1D3，即加水12倍,浸泡0.5h,共提取3次,每次1h。
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2.4 醇沉浓度的优选
由于水煎煮提取了大量的淀粉、树脂等杂质，影响了制剂的稳定性，采用乙醇沉淀可除去淀粉等杂质，故对乙醇沉浓度进行优选。按处方量取药材1000g，采用以上工艺条件提取，合并煎煮液，浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，将药液分为4份，分别调含醇量至50%、60%、70%、80%，放置24h，滤过，滤液减压回收乙醇至100mL，测定药液中浸出物含量及黄芪甲甙含量，计算有效成分转移率，观察药液外观性状，结果见表6。表6 醇沉浓度优选结果 醇沉浓度
(%)
浸出物转移率
(%)
黄芪甲甙转移率
(%)
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外观性状
50
85.3
91.9
微浑
60
72.9
85.4
少量沉淀
70
66.9
32.2
少量沉淀
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80
56.2
18.9
澄明
从表6可见，当醇沉浓度为50%和60%时，浸出物和黄芪甲甙的转移率较高，结合药液的外观性状，选择60%为最佳醇沉浓度。
2.5 增溶剂的选择
方中川芎等提取了芳香水,丹参等提取了脂溶性有效成分，这两个部分在液体制剂中不稳定，易析出沉淀、分层，为了提高制剂的稳定性，经反复筛选，确定以吐温-80为增溶剂，可提高制剂的稳定性。
2.6 制备工艺的确定
处方中，川芎等以水蒸气蒸馏法提取，收集药材重4倍量芳香水，加适量吐温-80增溶备用，蒸馏后药液另器收集。丹参等以8倍量80%乙醇回流提取2次，提取时间为1.5h，合并乙醇提取液，减压回收乙醇并浓缩至药液的相对密度1.08～1.10(50℃)，加适量吐温-80增溶备用。提取芳香水后药渣及丹参等醇提后药渣与处方中黄芪等加水12倍，煎提3次，提取时间均为1h，合并煎提液及上述蒸馏后药液，浓缩至相对密度1.06～1.08(50℃)，调含醇量至60%，静置，取上清液，减压回收乙醇，继续浓缩至相对密度1.08～1.10(50℃)，加入芳香水及丹参等脂溶性有效部位，调至总量即得。
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3 讨论
根据处方组成药物有效成分性质不同，将药物分为3组进行提取，以保留有效成分。按此工艺进行中试，3批样品经稳定性试验，符合有关规定，药效学试验结果满意(研究结果将另文报道)，说明本工艺合理可行。
在水溶性成分提取研究中可见，煎煮次数对黄芪甲甙的含量有极显著意义，提示含黄芪的制剂应注意提取次数以3次为宜。
丹参中脂溶性有效成分主要包括了菲醌类化合物如丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB和异丹参酮等，如丹参直接与其余各药加水煎煮，水提液中不能检出丹参酮ⅡA，采用乙醇提取后可在成品中检出丹参酮ⅡA，提示对含丹参的制剂应注意提取方法及提取溶媒的选择，一般应采用醇水双提法以最大限度提取其有效成分。
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：刘友平,女，1964年4月生；在读博士研究生；副教授；中药学专业；主要研究方向：中药有效成分及品质研究。
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部).95年版.广州：广东科技出版社，1995.附录62
[2]张玲，于宗渊，徐新刚等.丹参水醇法提取工艺研究.中成药，1995，17(5)：1
(收稿日期:1998-09-17), 百拇医药