乳腺癌DNA含量与癌基因蛋白表达的关系
作者：李新功 姜辉 李爱英 丁洪基
单位：李新功 姜辉 李爱英 丁洪基(山东省胜利石油管理局中心医院病理科，东营 257034)
关键词：乳腺肿瘤；癌基因蛋白质类；DNA分析
乳腺癌DNA含量与癌基因蛋白表达的关系中国图书分类号 R737.9；R392.31
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0184-02
1 材料和方法
1.1 材料 以1987～1997年收检，进行过c-erbB-2、p53、nm23、PCNA免疫组织化学检查的82例乳腺癌为观察分析对象，其中包括浸润性导管癌63例、浸润性小叶癌4例、髓样癌7例、乳头状癌3例、粘液腺癌5例，均为女性患者。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 DNA图像分析 常规石蜡切片，Feulgen染色，Olympus VANOX显微镜10×40倍视野下选取目标，应用CMIAS-008病理图像分析仪，测量淋巴细胞积分吸光度、乳癌细胞积分吸光度，计算DNA指数(DI，乳癌细胞与淋巴细胞DNA含量的比值)，打印DNA倍体直方图，统计各例>5CEE(5倍体超出事件)数量。
1.2.2 免疫组织化学检查 微波修复抗原，S-P法进行免疫组织学标记，检测c-erbB-2、p53、nm23、PCNA。抗体及试剂盒均为Zymed及Maxim产品，购自迈新公司。抗体均为加强型单克隆抗体。阳性细胞<20%为弱阳性，20%～50%为阳性，>50%为强阳性。
2 结果
见表1。nm23阳性61例，其中48例为整倍体肿瘤。
, 百拇医药
表1 乳腺癌DNA含量与c-erbB-2、p53、nm23、PCNA表达的关系
c-erbB-2
nm23
p53
PCNA
-
+
-
+
-
+
-
+
, 百拇医药
n
34
48
21
61
44
38
7
75
DI
1.48±0.74
2.14±0.46
2.01±0.72
, 百拇医药
1.71±0.44
1.82±0.27
1.94±0.86
1.81±0.96
2.67±0.48
t
2.945
2.262
0.878
4.096
P
<0.01
, 百拇医药 <0.05
>0.05
<0.01
>5CEE
12.16±6.25
22.93±14.00
18.16±12.58
13.28±11.77
21.50±11.45
26.33±18.52
10.96±17.36
28.18±19.22
, 百拇医药
t
4.194
1.611
1.441
2.283
P
<0.01
>0.05
>0.05
<0.01
3 讨论
随着图像分析技术的开发，细胞核DNA含量测定将逐渐用于临床病理工作〔1，2〕。肿瘤细胞DNA含量常不同于正常细胞〔3〕。细胞DNA含量及分布的异常代表了核染色质数量和结构发生的改变。这种改变不但加速了细胞分裂增殖，同时导致细胞内特异性多肽和蛋白的合成失败，使细胞不能从增殖状态转变为分化状态。
, 百拇医药
在正常情况c-erbB-2基因处于非激活状态，参与调节正常细胞的生长、分化和分裂。当受某些因素影响激活，则具有肿瘤转化活性。其在乳腺癌中的过度表达与癌的分化、组织学类型、淋巴结转移及预后有关。本组研究发现，c-erbB-2阳性病例较阴性者DNA指数DI及>5CEE值均高，表明DNA分析结果与c-erbB-2检测同样对判别肿瘤恶性程度、病人预后有重要价值。
nm23是新近发现的转移抑制基因〔4〕，有nm23-H1和nm23-H2两个亚型，可通过参与调节细胞内微管系统的状态而抑制癌转移。nm23表达程度与淋巴结转移之间有非常显著的负相关性。本组研究显示，nm23阳性表达的病例，大多为整倍体肿瘤。这对说明nm23表达阳性病例具有相对较好预后的原因有一定意义。
p53是一种重要的抑癌基因，有野生型和突变型〔4〕。正常野生型p53有抑制细胞恶性转化的功能，突变后变为致癌基因，具有促进细胞恶性转化的作用。根据观察，p53蛋白表达与患者年龄、肿瘤体积、淋巴结转移、坏死等无关，与乳腺癌组织分化程度有关，组织学分级越高，其表达越强。DNA图像分析结果未显示p53不同表达之间存在差异。
, http://www.100md.com
PCNA又称周期素，是真核细胞DNA合成所必须的核蛋白，参与DNA合成的调节〔3〕，在静止细胞含量很少，在G晚期细胞核中表达开始增加，S期达到高峰，是判断细胞增殖状态的很好标记。乳腺癌组织分化程度越低，PCNA表达程度越高。DNA含量测定作为直接反映细胞内核酸代谢情况的指标，与肿瘤性质、病人预后有关。本组研究显示，DNA指数DI及>5CEE在PCNA阳性病例较阴性病例为高，证明二者在判别细胞增殖情况方面的一致性。
研究表明，DNA含量与c-erbB-2、nm23、PCNA等的表达有重要关系，综合各种检查的结果，对评价乳腺病变，特别是乳腺癌的预后，比单一因素评价，具有更可靠的价值。
参考文献
1 Carey FA. Measurement of nuclear DNA content in histological, and cytological specimens:principles and applications. J Pathol，1994；172：307
, 百拇医药
2 Takahashi Y, Takenaka A, Ishiguro T et al. Inatratumal DNA heterogeneity correlated with lymph node involvement and surgical staging in epithelia ovarian cancer by flow cytometry. Cancer,1994;73:3011
3 Altomas S, Lipponen P, Syrjanen K. Prognostic value of cell proliferation in breast cancer as detemined by proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining. Anticancer Res,1992;12:1281
4 Leal CB, Schmitt FC, Bento MJ et al. Ductal carcinoma in situ of breast： Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohistochemical expression of hormone receptors, p53,and c-erbB-2 potein. Cancer,1995;75:2123
收稿日期：1998-06-29, http://www.100md.com
单位：李新功 姜辉 李爱英 丁洪基(山东省胜利石油管理局中心医院病理科，东营 257034)
关键词：乳腺肿瘤；癌基因蛋白质类；DNA分析
乳腺癌DNA含量与癌基因蛋白表达的关系中国图书分类号 R737.9；R392.31
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0184-02
1 材料和方法
1.1 材料 以1987～1997年收检，进行过c-erbB-2、p53、nm23、PCNA免疫组织化学检查的82例乳腺癌为观察分析对象，其中包括浸润性导管癌63例、浸润性小叶癌4例、髓样癌7例、乳头状癌3例、粘液腺癌5例，均为女性患者。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 DNA图像分析 常规石蜡切片，Feulgen染色，Olympus VANOX显微镜10×40倍视野下选取目标，应用CMIAS-008病理图像分析仪，测量淋巴细胞积分吸光度、乳癌细胞积分吸光度，计算DNA指数(DI，乳癌细胞与淋巴细胞DNA含量的比值)，打印DNA倍体直方图，统计各例>5CEE(5倍体超出事件)数量。
1.2.2 免疫组织化学检查 微波修复抗原，S-P法进行免疫组织学标记，检测c-erbB-2、p53、nm23、PCNA。抗体及试剂盒均为Zymed及Maxim产品，购自迈新公司。抗体均为加强型单克隆抗体。阳性细胞<20%为弱阳性，20%～50%为阳性，>50%为强阳性。
2 结果
见表1。nm23阳性61例，其中48例为整倍体肿瘤。
, 百拇医药
表1 乳腺癌DNA含量与c-erbB-2、p53、nm23、PCNA表达的关系
c-erbB-2
nm23
p53
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1.48±0.74
2.14±0.46
2.01±0.72
, 百拇医药
1.71±0.44
1.82±0.27
1.94±0.86
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2.67±0.48
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2.945
2.262
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4.096
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, 百拇医药 <0.05
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>5CEE
12.16±6.25
22.93±14.00
18.16±12.58
13.28±11.77
21.50±11.45
26.33±18.52
10.96±17.36
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1.611
1.441
2.283
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<0.01
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3 讨论
随着图像分析技术的开发，细胞核DNA含量测定将逐渐用于临床病理工作〔1，2〕。肿瘤细胞DNA含量常不同于正常细胞〔3〕。细胞DNA含量及分布的异常代表了核染色质数量和结构发生的改变。这种改变不但加速了细胞分裂增殖，同时导致细胞内特异性多肽和蛋白的合成失败，使细胞不能从增殖状态转变为分化状态。
, 百拇医药
在正常情况c-erbB-2基因处于非激活状态，参与调节正常细胞的生长、分化和分裂。当受某些因素影响激活，则具有肿瘤转化活性。其在乳腺癌中的过度表达与癌的分化、组织学类型、淋巴结转移及预后有关。本组研究发现，c-erbB-2阳性病例较阴性者DNA指数DI及>5CEE值均高，表明DNA分析结果与c-erbB-2检测同样对判别肿瘤恶性程度、病人预后有重要价值。
nm23是新近发现的转移抑制基因〔4〕，有nm23-H1和nm23-H2两个亚型，可通过参与调节细胞内微管系统的状态而抑制癌转移。nm23表达程度与淋巴结转移之间有非常显著的负相关性。本组研究显示，nm23阳性表达的病例，大多为整倍体肿瘤。这对说明nm23表达阳性病例具有相对较好预后的原因有一定意义。
p53是一种重要的抑癌基因，有野生型和突变型〔4〕。正常野生型p53有抑制细胞恶性转化的功能，突变后变为致癌基因，具有促进细胞恶性转化的作用。根据观察，p53蛋白表达与患者年龄、肿瘤体积、淋巴结转移、坏死等无关，与乳腺癌组织分化程度有关，组织学分级越高，其表达越强。DNA图像分析结果未显示p53不同表达之间存在差异。
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PCNA又称周期素，是真核细胞DNA合成所必须的核蛋白，参与DNA合成的调节〔3〕，在静止细胞含量很少，在G晚期细胞核中表达开始增加，S期达到高峰，是判断细胞增殖状态的很好标记。乳腺癌组织分化程度越低，PCNA表达程度越高。DNA含量测定作为直接反映细胞内核酸代谢情况的指标，与肿瘤性质、病人预后有关。本组研究显示，DNA指数DI及>5CEE在PCNA阳性病例较阴性病例为高，证明二者在判别细胞增殖情况方面的一致性。
研究表明，DNA含量与c-erbB-2、nm23、PCNA等的表达有重要关系，综合各种检查的结果，对评价乳腺病变，特别是乳腺癌的预后，比单一因素评价，具有更可靠的价值。
参考文献
1 Carey FA. Measurement of nuclear DNA content in histological, and cytological specimens:principles and applications. J Pathol，1994；172：307
, 百拇医药
2 Takahashi Y, Takenaka A, Ishiguro T et al. Inatratumal DNA heterogeneity correlated with lymph node involvement and surgical staging in epithelia ovarian cancer by flow cytometry. Cancer,1994;73:3011
3 Altomas S, Lipponen P, Syrjanen K. Prognostic value of cell proliferation in breast cancer as detemined by proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining. Anticancer Res,1992;12:1281
4 Leal CB, Schmitt FC, Bento MJ et al. Ductal carcinoma in situ of breast： Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohistochemical expression of hormone receptors, p53,and c-erbB-2 potein. Cancer,1995;75:2123
收稿日期：1998-06-29, http://www.100md.com