转基因基质细胞对脐血CD34+细胞体外扩增及早期祖细胞的影响
作者：杨 光
单位：重庆医科大学儿科学院
关键词：
重庆医学990210
自1989年Broxmeyer和Geuckman等证实脐血富含造血干/祖细胞，并有可能用于临床造血细胞移植以来，至今在世界范围内已开展了对脐血干/祖细胞及其造血重建、体外扩增的研究，有报道的脐血干/祖细胞移植已达500多例。尽管脐血具有价廉、易获得、富含干/祖细胞等优点，但由于其量的限制而使其应用受限。因此，建立一个理想的脐血干/祖细胞体外扩增体系以保证干细胞存在，同时有大量祖细胞扩增是脐血干/祖细胞移植和以脐血干/祖细胞为靶细胞而进行基因治疗的关键。
我们通过逆病毒载体将具有较早期造血调控作用又对巨核系细胞有特异性调控作用的细胞因子血小板生成素(TPO)和白介素11(IL-11)的CDNA导入入基质细胞系HFCL，以观察转TPO和IL11的HFCL对脐血CD34+细胞体外扩增及早期祖细胞的影响。我们发现转TPO和IL11的HFCL培养体系中含有CD34+CD38-表型的细胞比率明显高于相应培养条件下含有未转基因HFCL的扩增培养体系，而且它们的CD34+CD34-细胞的比率均高于相应的液体扩增体系，且对于巨核系祖细胞的扩增作用和巨核细胞成熟的调控作用，转TPO和IL11的HFCL扩增体系也明显强于未转基因的HFCL和液体培养体系。而且转TPO和IL11的HFCL培养体系可明显促进带绿色荧光蛋白基因的逆病毒载体导入CD34+细胞的转染效率。, http://www.100md.com
单位：重庆医科大学儿科学院
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重庆医学990210
自1989年Broxmeyer和Geuckman等证实脐血富含造血干/祖细胞，并有可能用于临床造血细胞移植以来，至今在世界范围内已开展了对脐血干/祖细胞及其造血重建、体外扩增的研究，有报道的脐血干/祖细胞移植已达500多例。尽管脐血具有价廉、易获得、富含干/祖细胞等优点，但由于其量的限制而使其应用受限。因此，建立一个理想的脐血干/祖细胞体外扩增体系以保证干细胞存在，同时有大量祖细胞扩增是脐血干/祖细胞移植和以脐血干/祖细胞为靶细胞而进行基因治疗的关键。
我们通过逆病毒载体将具有较早期造血调控作用又对巨核系细胞有特异性调控作用的细胞因子血小板生成素(TPO)和白介素11(IL-11)的CDNA导入入基质细胞系HFCL，以观察转TPO和IL11的HFCL对脐血CD34+细胞体外扩增及早期祖细胞的影响。我们发现转TPO和IL11的HFCL培养体系中含有CD34+CD38-表型的细胞比率明显高于相应培养条件下含有未转基因HFCL的扩增培养体系，而且它们的CD34+CD34-细胞的比率均高于相应的液体扩增体系，且对于巨核系祖细胞的扩增作用和巨核细胞成熟的调控作用，转TPO和IL11的HFCL扩增体系也明显强于未转基因的HFCL和液体培养体系。而且转TPO和IL11的HFCL培养体系可明显促进带绿色荧光蛋白基因的逆病毒载体导入CD34+细胞的转染效率。, http://www.100md.com