丝裂霉素与无水乙醇瘤灶内注射治疗肿瘤效果比较
作者：李 柏 凌昌全 林万和
单位：解放军第九七医院肿瘤科(221004)李 柏；第二军医大学长海医院 凌昌全 林万和
关键词：肿瘤，实验性；丝裂霉素；醇，乙
实用医学杂志990234摘 要 目的：比较丝裂霉素与无水乙醇瘤灶内注射的抗肿瘤效果。方法：24只荷W256肿瘤大鼠随机分为三组，分别肿瘤内注射丝裂霉素、无水乙醇和等渗盐水，观察大鼠体重、肿瘤体积、行为状态、生存期及肿瘤组织学变化。结果：丝裂霉素组肿瘤控制优于其它两组，但毒性亦较明显；无水乙醇组肿瘤控制优于对照组，无明显毒性。结论：无水乙醇瘤灶内注射较适用于无浸润、转移的小肿瘤，对全身情况不适合化疗的较大肿瘤，亦可起到“减积手术”的作用。丝裂霉素较适用于全身情况较好、肿瘤较大的患者。亦可考虑采用无水乙醇与化疗药物相结合的办法，交替注射。
瘤灶内直接注射细胞毒性药物是肝癌治疗手段之一，以无水乙醇及化疗药物较为常用，但各有其优缺点。笔者对丝裂霉素与无水乙醇瘤灶内注射治疗实验性肿瘤的效果进行了比较，报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 实验材料 (1)药物：丝裂霉素(mitomycin)，日本Kyowa Hakka Kogyo公司产品，规格2 mg/支，批号124AFH；无水乙醇(分析纯，99.7%)，上海振兴化工一厂产品；(2)动物：SD大鼠，雌性，体重120±20 g，由第二军医大学实验动物中心提供；(3)细胞株：大鼠Walker 256 Carcinoma(W256)细胞株，购自上海医药工业研究院。按常规方法[1]复制皮下荷W256肿瘤SD大鼠模型。
1.2 实验方法 取皮下荷W256肿瘤SD大鼠24只(肿瘤直径约0.5～1 cm)，随机分为三组，每组8只，分别于肿瘤内注射丝裂霉素(0.1 mg)、无水乙醇和等渗盐水(对照组)溶液每次每只0.4 ml，每4天注射1次，共4次。每次注射前专人称量大鼠体重，以游标卡尺测量肿瘤最大长径a及与最大长径相垂直的最大横径b，按公式V=ab2π/6[2]计算肿瘤体积。治疗后观察荷瘤鼠生存情况及行为状态。完成治疗鼠死亡前肿瘤取材制作光镜切片检查。
, http://www.100md.com
1.3 统计学方法 F检验。
2 结果
2.1 荷瘤大鼠治疗前后平均肿瘤体积变化，见表1。
表1 大鼠治疗前后平均肿瘤体积变化(mm3，
±s) 组别
治疗前
治疗1次
治疗2次
治疗3次
治疗4次
丝裂霉素
, http://www.100md.com
224±73
749±473
1 669±1 207
2 896±1 764
2 801±2 456
(8)
(8)
(8)
(8)△
(7)△△
无水乙醇
194±71
, 百拇医药
2 105±1 312
3 501±1 963
8 747±4 599
10 165±5 598
(8)
(8)*
(8)
(7)*
(6)*△△
等渗盐水
196±89
, 百拇医药 1 189±1 038
4 005±2 563
12 162±8 790
26 523±9 067
(8)
(8)
(8)
(7)
(4)
与丝裂霉素组相比 *P<0.05；与等渗盐水组相比 △P<0.05，△△P<0.01
2.2 荷瘤大鼠治疗前后平均体重变化，见表2。
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表2 大鼠治疗前后平均体重变化(g,±s) 组别
治疗前
治疗1次
治疗2次
治疗3次
治疗4次
丝裂霉素
120±11
121±8
115±8
104±12
, 百拇医药
98±13
(8)
(8)
(8)
(8)
(7)
无水乙醇
120±10
121±11
121±14
118±17
124±18
(8)
, 百拇医药
(8)
(8)
(7)
(6)*
等渗盐水
119±12
117±11
109±22
106±20
117±18
(8)
(8)
(8)
, 百拇医药
(7)
(4)
与丝裂霉素相比 * P<0.05
2.3 荷瘤大鼠治疗后平均生存期 丝裂霉素、无水乙醇和等渗盐水组荷瘤鼠治疗后平均生存期分别为18.5±4.7天、16.3±5.1天和12.5±4.8天。丝裂霉素组生存期长于对照组(P<0.05)，其余相互间差异无显著性(P>0.05)。
2.4 荷瘤大鼠行为状态 无水乙醇组大鼠治疗初期，饮食正常，皮毛光亮，后期随着肿瘤不断增大，大鼠逐渐消瘦，皮毛松乱，衰竭死亡。丝裂霉素组在治疗初期，大鼠食量即明显减少，皮毛松乱，倦怠少动，体重下降显著。对照组大鼠肿瘤生长迅速，消耗症状明显，很快呈恶液质状，死亡。
2.5 荷瘤大鼠治疗后肿瘤组织学变化 肿瘤组织切片光镜下观察，丝裂霉素组肿瘤细胞坏死明显、彻底，细胞核溶解消失，胞浆红染，残存模糊轮廓；无水乙醇组肿瘤细胞坏死彻底，轮廓消失，呈一片模糊细颗粒状无结构物质；等渗盐水组肿瘤细胞坏死量少，且程度不彻底。
, 百拇医药
3 讨论
无水乙醇通过两种机制杀伤肿瘤细胞：首先在肿瘤细胞中扩散，引起胞浆脱水，继之细胞凝固性坏死，纤维组织增生；二是进入血循坏，引起毛细血管内皮细胞坏死，血小板凝集形成栓子阻塞小血管，导致肿瘤细胞局部缺血坏死[3]。乙醇注射后起效迅速，对未转移浸润的小肿瘤，可致肿瘤完全坏死，效果确切，但对较大肿瘤，则不能保证高浓度的乙醇扩散至所有肿瘤细胞，注射部位肿瘤细胞常见坏死，对周围肿瘤细胞则无治疗作用。本实验无水乙醇治疗组注射部位肿瘤细胞坏死彻底，但由于注射液量与肿瘤体积相比明显不足，肿瘤增长仍很迅速。
丝裂霉素是一常用化疗药物，通过与细胞DNA形成交叉联接，阻碍DNA的复制过程，杀伤肿瘤细胞。为减轻其全身毒性，可采用局部注射。本实验结果表明，在控制肿瘤生长方面，以丝裂霉素效果较佳，肿瘤生长明显慢于其它两组，且病理检查细胞坏死彻底。但由于化疗药物的杀伤作用与细胞增殖动力学密切相关，肿瘤细胞中一部分处于休止期的细胞对化疗相对不敏感，故化疗亦难以杀灭全部肿瘤细胞。
, 百拇医药
从药物毒性上考虑，无水乙醇的小鼠半数致死剂量(LD50)为10.0 g/kg[4]，毒性小，安全性高，无蓄积毒性；丝裂霉素的小鼠LD50为6.5 mg/kg[1]，骨髓抑制明显，消化道反应大，并有蓄积毒性。本实验中，无水乙醇每次用量经推算相当于大鼠的1/2.5 LD50量，丝裂霉素相当于1/5 LD50量[1]。无水乙醇治疗组大鼠几乎未见明显副作用，行为状态、体重均优于对照组；而丝裂霉素治疗组毒性较为明显，虽然大鼠肿瘤体积控制较好，但生存质量明显下降。
结合实验结果综合分析，无水乙醇瘤内注射较适用于肿瘤体积较小、无浸润转移的早期患者，对于全身情况不能耐受化疗的较大肿瘤患者，注射无水乙醇亦不失为一姑息手段，可起到“减积手术”的作用，改善生存质量。丝裂霉素较适用于全身情况较好、肿瘤较大的患者，可积极控制肿瘤生长。亦可考虑采用无水乙醇与化疗药物相结合的办法，交替注射，相互取长补短。先以化疗药物注射杀灭一部分增殖活跃的肿瘤细胞，使肿瘤体积缩小，再注射无水乙醇。但要注意的是，无水乙醇注射后，纤维组织形成，可能影响化疗药物的扩散和肿瘤细胞对其的摄取，减低治疗效果，所以，注射无水乙醇后再注射化疗药物的时间间隔不宜过长。
, 百拇医药
4 参考文献
1 徐叔云，卞如濂，陈 修，主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991，179，1424，1428.
2 Olson TA,Mohanraj D,Roy S,et al. Targeting the tumor vasculature:inhibition of tumor growth by a vascular endothelial growth factor-toxin conjugate. Int J Cancer,1997,73(6):865～870.
3 Livraghi T,Giorgio A,Marin G,et al. Hepatocellular carcinoma and cirrhosis in 746 patients:long-term results of percutaneous ethanol injection. Radiology,1995,197(1):101～8.
4 徐厚恩，张 铣，主编. 卫生毒理学基础. 北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1991.3., http://www.100md.com
单位：解放军第九七医院肿瘤科(221004)李 柏；第二军医大学长海医院 凌昌全 林万和
关键词：肿瘤，实验性；丝裂霉素；醇，乙
实用医学杂志990234摘 要 目的：比较丝裂霉素与无水乙醇瘤灶内注射的抗肿瘤效果。方法：24只荷W256肿瘤大鼠随机分为三组，分别肿瘤内注射丝裂霉素、无水乙醇和等渗盐水，观察大鼠体重、肿瘤体积、行为状态、生存期及肿瘤组织学变化。结果：丝裂霉素组肿瘤控制优于其它两组，但毒性亦较明显；无水乙醇组肿瘤控制优于对照组，无明显毒性。结论：无水乙醇瘤灶内注射较适用于无浸润、转移的小肿瘤，对全身情况不适合化疗的较大肿瘤，亦可起到“减积手术”的作用。丝裂霉素较适用于全身情况较好、肿瘤较大的患者。亦可考虑采用无水乙醇与化疗药物相结合的办法，交替注射。
瘤灶内直接注射细胞毒性药物是肝癌治疗手段之一，以无水乙醇及化疗药物较为常用，但各有其优缺点。笔者对丝裂霉素与无水乙醇瘤灶内注射治疗实验性肿瘤的效果进行了比较，报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 实验材料 (1)药物：丝裂霉素(mitomycin)，日本Kyowa Hakka Kogyo公司产品，规格2 mg/支，批号124AFH；无水乙醇(分析纯，99.7%)，上海振兴化工一厂产品；(2)动物：SD大鼠，雌性，体重120±20 g，由第二军医大学实验动物中心提供；(3)细胞株：大鼠Walker 256 Carcinoma(W256)细胞株，购自上海医药工业研究院。按常规方法[1]复制皮下荷W256肿瘤SD大鼠模型。
1.2 实验方法 取皮下荷W256肿瘤SD大鼠24只(肿瘤直径约0.5～1 cm)，随机分为三组，每组8只，分别于肿瘤内注射丝裂霉素(0.1 mg)、无水乙醇和等渗盐水(对照组)溶液每次每只0.4 ml，每4天注射1次，共4次。每次注射前专人称量大鼠体重，以游标卡尺测量肿瘤最大长径a及与最大长径相垂直的最大横径b，按公式V=ab2π/6[2]计算肿瘤体积。治疗后观察荷瘤鼠生存情况及行为状态。完成治疗鼠死亡前肿瘤取材制作光镜切片检查。
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1.3 统计学方法 F检验。
2 结果
2.1 荷瘤大鼠治疗前后平均肿瘤体积变化，见表1。
表1 大鼠治疗前后平均肿瘤体积变化(mm3，
±s) 组别治疗前
治疗1次
治疗2次
治疗3次
治疗4次
丝裂霉素
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224±73
749±473
1 669±1 207
2 896±1 764
2 801±2 456
(8)
(8)
(8)
(8)△
(7)△△
无水乙醇
194±71
, 百拇医药
2 105±1 312
3 501±1 963
8 747±4 599
10 165±5 598
(8)
(8)*
(8)
(7)*
(6)*△△
等渗盐水
196±89
, 百拇医药 1 189±1 038
4 005±2 563
12 162±8 790
26 523±9 067
(8)
(8)
(8)
(7)
(4)
与丝裂霉素组相比 *P<0.05；与等渗盐水组相比 △P<0.05，△△P<0.01
2.2 荷瘤大鼠治疗前后平均体重变化，见表2。
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表2 大鼠治疗前后平均体重变化(g,
±s) 组别治疗前
治疗1次
治疗2次
治疗3次
治疗4次
丝裂霉素
120±11
121±8
115±8
104±12
, 百拇医药
98±13
(8)
(8)
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(7)
无水乙醇
120±10
121±11
121±14
118±17
124±18
(8)
, 百拇医药
(8)
(8)
(7)
(6)*
等渗盐水
119±12
117±11
109±22
106±20
117±18
(8)
(8)
(8)
, 百拇医药
(7)
(4)
与丝裂霉素相比 * P<0.05
2.3 荷瘤大鼠治疗后平均生存期 丝裂霉素、无水乙醇和等渗盐水组荷瘤鼠治疗后平均生存期分别为18.5±4.7天、16.3±5.1天和12.5±4.8天。丝裂霉素组生存期长于对照组(P<0.05)，其余相互间差异无显著性(P>0.05)。
2.4 荷瘤大鼠行为状态 无水乙醇组大鼠治疗初期，饮食正常，皮毛光亮，后期随着肿瘤不断增大，大鼠逐渐消瘦，皮毛松乱，衰竭死亡。丝裂霉素组在治疗初期，大鼠食量即明显减少，皮毛松乱，倦怠少动，体重下降显著。对照组大鼠肿瘤生长迅速，消耗症状明显，很快呈恶液质状，死亡。
2.5 荷瘤大鼠治疗后肿瘤组织学变化 肿瘤组织切片光镜下观察，丝裂霉素组肿瘤细胞坏死明显、彻底，细胞核溶解消失，胞浆红染，残存模糊轮廓；无水乙醇组肿瘤细胞坏死彻底，轮廓消失，呈一片模糊细颗粒状无结构物质；等渗盐水组肿瘤细胞坏死量少，且程度不彻底。
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3 讨论
无水乙醇通过两种机制杀伤肿瘤细胞：首先在肿瘤细胞中扩散，引起胞浆脱水，继之细胞凝固性坏死，纤维组织增生；二是进入血循坏，引起毛细血管内皮细胞坏死，血小板凝集形成栓子阻塞小血管，导致肿瘤细胞局部缺血坏死[3]。乙醇注射后起效迅速，对未转移浸润的小肿瘤，可致肿瘤完全坏死，效果确切，但对较大肿瘤，则不能保证高浓度的乙醇扩散至所有肿瘤细胞，注射部位肿瘤细胞常见坏死，对周围肿瘤细胞则无治疗作用。本实验无水乙醇治疗组注射部位肿瘤细胞坏死彻底，但由于注射液量与肿瘤体积相比明显不足，肿瘤增长仍很迅速。
丝裂霉素是一常用化疗药物，通过与细胞DNA形成交叉联接，阻碍DNA的复制过程，杀伤肿瘤细胞。为减轻其全身毒性，可采用局部注射。本实验结果表明，在控制肿瘤生长方面，以丝裂霉素效果较佳，肿瘤生长明显慢于其它两组，且病理检查细胞坏死彻底。但由于化疗药物的杀伤作用与细胞增殖动力学密切相关，肿瘤细胞中一部分处于休止期的细胞对化疗相对不敏感，故化疗亦难以杀灭全部肿瘤细胞。
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从药物毒性上考虑，无水乙醇的小鼠半数致死剂量(LD50)为10.0 g/kg[4]，毒性小，安全性高，无蓄积毒性；丝裂霉素的小鼠LD50为6.5 mg/kg[1]，骨髓抑制明显，消化道反应大，并有蓄积毒性。本实验中，无水乙醇每次用量经推算相当于大鼠的1/2.5 LD50量，丝裂霉素相当于1/5 LD50量[1]。无水乙醇治疗组大鼠几乎未见明显副作用，行为状态、体重均优于对照组；而丝裂霉素治疗组毒性较为明显，虽然大鼠肿瘤体积控制较好，但生存质量明显下降。
结合实验结果综合分析，无水乙醇瘤内注射较适用于肿瘤体积较小、无浸润转移的早期患者，对于全身情况不能耐受化疗的较大肿瘤患者，注射无水乙醇亦不失为一姑息手段，可起到“减积手术”的作用，改善生存质量。丝裂霉素较适用于全身情况较好、肿瘤较大的患者，可积极控制肿瘤生长。亦可考虑采用无水乙醇与化疗药物相结合的办法，交替注射，相互取长补短。先以化疗药物注射杀灭一部分增殖活跃的肿瘤细胞，使肿瘤体积缩小，再注射无水乙醇。但要注意的是，无水乙醇注射后，纤维组织形成，可能影响化疗药物的扩散和肿瘤细胞对其的摄取，减低治疗效果，所以，注射无水乙醇后再注射化疗药物的时间间隔不宜过长。
, 百拇医药
4 参考文献
1 徐叔云，卞如濂，陈 修，主编. 药理实验方法学. 第2版. 北京：人民卫生出版社，1991，179，1424，1428.
2 Olson TA,Mohanraj D,Roy S,et al. Targeting the tumor vasculature:inhibition of tumor growth by a vascular endothelial growth factor-toxin conjugate. Int J Cancer,1997,73(6):865～870.
3 Livraghi T,Giorgio A,Marin G,et al. Hepatocellular carcinoma and cirrhosis in 746 patients:long-term results of percutaneous ethanol injection. Radiology,1995,197(1):101～8.
4 徐厚恩，张 铣，主编. 卫生毒理学基础. 北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1991.3., http://www.100md.com