血浆D-二聚体定量测定的临床意义
作者：钱申贤 王敏敏
单位：杭州市第一医院
关键词：D-二聚体；弥漫性血管内凝血；白血病，急性；淋巴 瘤
临床血液学杂志990211 D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白经纤溶酶水解后一种 特异性的降解产物，凡伴有微血栓形成的许多疾病都可能导致D-二聚体的增高，可作为DIC 及DIC前状态的诊断依据之一。我们对DIC和可能伴有DIC前状态的多种疾病患者的血浆进行D -二聚体的测定，并探讨了其临床意义。
1 材料与方法
1.1 研究对象 ①正常对照组：40例，男20例，女20例，年龄18～69岁(中位数36岁)，均为 本院健康职工及实习医生。②DIC组：22例，男12例，女10例，年龄17～72岁(中位数为35岁 )。诊断标准按文献〔1〕。原发疾病：急性非淋巴细胞白血病7例，肺癌5例，胃癌6 例，其它4例(感染性疾病)。③急性粒细胞白血病(AML)：初病期27例，男14例，女13例，平 均年龄45岁(17～75岁)。其中M16例，M26例，M34例，M55例，嗜酸细胞白血病1例 。缓解期32例，男17例，女15例，平均年龄38岁(17～75岁)。M18例，M28例，M36例 ，M57例，嗜酸细胞性白血病1例，M61例。④实体肿瘤：40例，男28例，女12例。平均 年龄55岁(40～78岁)，其中肺癌21例，胃癌19例。⑤脑血管意外：60例，男48例，女12例， 平均年龄68岁(51～79岁)，其中出血性中风30例，脑栓塞30例。⑥恶性淋巴瘤：初发期32例 ，男27例，女4例，年龄16～78岁，平均32岁。均为非霍奇金病，Ⅱ期12例，Ⅲ期17例，Ⅳ 期3例。缓解期32例次，男28例，女4例，平均年龄32岁。
, 百拇医药
1.2 测定方法 血浆制备：①抽取受检查者静脉血，以0.13 mol/L枸橼酸钠9∶1抗凝，3 000 r/min，离心10 min，分离血浆待测。②D-二聚体测定：ELTSA双抗体夹心法。在包被 单抗的酶标反应板上加入样品和不同稀释度的标准品，37℃温育1 h后洗涤4次，再加入酶标 记的单抗，37℃温育30 min后再洗涤4次，加底物显色，37℃温育15 min后加2 mol/L硫酸终 止反应，在492 nm波长下测定吸光度。根据标准曲线，求得含量。试剂盒由上海捷门生物技 术公司提供。
2 结果
①方法学评估：用ELISA方法测定，10份标本 连续测定，批内误差7.8%，12份标本同时双份测定，平均相差4.4%，12例标本分两 次不同板测定，平均相差5.4%。②参考值：正常对照组血浆D-二聚体为0.14±0 .07 mg/L。若以单侧95%为正常上限，应为0.255 mg/L，我室规定超过0.25 mg/L 为异常。③22例弥漫性血管内凝血患者在初诊时D-二聚体的含量为7.34±1.72 mg /L，用肝素50 mg-75 mg/d，持续静脉点滴治疗后，有效的18例在第3天D-二聚体开始下降，为5.23±1.42 mg/L，第7天D-二聚体为2.78±0.23 mg/L。4例无效患者血浆D-二聚体在第3 天(7.52±1.82 mg/L)和第7天(7.62±1.78 mg/L)无明显变化。④各种疾 病中D-二聚体测定结果见附表。
, 百拇医药
附表 各种疾病中血浆D-二聚体的含量
±s 检测对象
n
血浆D-二聚体含 量(mg/L)
P值*
P值△
对照组
48
0.14±0.07
急性粒细胞白血病
初诊期
, 百拇医药 缓解期
27
30
2.54±1.47
0.11±0.05
<0.05
>0.05
<0.05
恶性淋巴瘤
初诊期
缓解期
32
32
, 百拇医药
2.04±1.67
0.12±0.05
<0.05
>0.05
<0.05
脑血管意外
出血性中风
脑栓塞
30
30
0.17±0.42
0.56±0.47
, http://www.100md.com >0.05
<0. 05
实体肿瘤(肺癌、胃癌)
40
1.89±0.29
<0.05
弥漫性血管内凝血
22
7.34±1.72
<0.01
注与对照组比较 △初诊期与缓解期比较
, http://www.100md.com
附图 DIC治疗过程中血浆D-二聚体的动态变化
3 讨论
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种特 异性降解产物，为纤维蛋白降解产物中的最小片段，是反映凝血及纤溶活化的分子标志物。 DIC发生时凝血系统被激活，循环中产生了大量微血栓，继而激活了纤溶系统发生了纤溶亢 进，交联纤维蛋白被纤溶酶降解而产生了大量的D-二聚体。Greenberg〔2〕用乳胶 法检测了132例可疑DIC的血浆D-二聚体，发现FDP<10 mg/L时，69%患者的D-二聚体阳性 ；当FDP>10 mg/L时，约90%的患者D-二聚体阳性。Boischair〔3〕对30例DIC患者 进行了D-二聚体检测，发现DIC患者血浆及血清D-二聚体含量均显著增高，敏感性97%～10 0%，认为与以往诊断指标如血小板、纤维蛋白原、FDP等相比较，D-二聚体是唯一直接反映 凝血酶和纤溶酶生成的理想指标。对DIC的诊断有较高的价值。Carr用ELISA法测定了58例可 疑的DIC，同时与FDP进行比较，如果以D-二聚体>0.5 mg/L作为诊断DIC的标准，则其 诊断特异性达到97%，阳性预测率96%。FDP的敏感性较高，但缺乏特异性。Koyama认为D-二 聚体的变化早于3 P和FDP，有助于DIC的早期诊断。国内刘氏报告24例DIC病人，DIC患者血 浆中D-二聚体定量测定除1例，其余均在5 mg/L以上。表明D-二聚体的测定可作为DIC诊断 指标之一。本文22例DIC病人，血浆中D-二聚体定量明显增高，均值为7.34±1.72 mg/L，除3例<5 mg外(分别为3.2，3.87，4.72 mg/L)，其余19例均>5 mg/L 。因此认为，血浆D-二聚体>5 mg/L对DIC有诊断意义，如<3 mg/L基本可以排除DIC，但 要警惕DIC的发生。18例经治疗有效的DIC患者，治疗后血浆D-二聚体浓度明显下降，而4例 无效患者血浆D-二聚体无明显变化，DIC患者动态观察血浆D-二聚体浓度的变化，以便及 时了解治疗效果和判断预后。急性粒细胞白血病(AML)、恶性淋巴瘤和实体癌(肝癌和胃癌) 在初诊时患者的血浆D-二聚体水平高于正常对照组。这些疾病在发病期有出凝血机制的紊 乱，存在DIC前状态。提示这类患者易发生DIC。AML和恶性淋巴瘤在缓解期血浆D-二聚体水 平明显低于初诊时(P<0.05)，这说明AML和恶性淋巴瘤患者D-二聚体水平随病情 而变化。
, 百拇医药
脑血管性疾病：脑栓塞与正常对照组，比较血浆D-二聚体含量明显升高(P<0.05) ，提示这类患者中常处于高凝状态，血栓后溶解物的大量产生有关。
参考文献
[1] 张之南.血液病诊断及疗效标准.北京：科学技术出版社，1991.278
[2] Greenberg CS et al. Am J Clin Pathol 1987;87:94
[3] Boisclair DA, Lane JT, Wilde HA. A comparative evaluation of assays for marke rs of actived coagulation and/or fibrinolysis:thrombin-antithrombin complex, D -dimer and fibrinogen/fibrin fragment E antigen. Br J Haenatol,1990,74(4):471
(1998-07-02 收稿), http://www.100md.com
单位：杭州市第一医院
关键词：D-二聚体；弥漫性血管内凝血；白血病，急性；淋巴 瘤
临床血液学杂志990211 D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白经纤溶酶水解后一种 特异性的降解产物，凡伴有微血栓形成的许多疾病都可能导致D-二聚体的增高，可作为DIC 及DIC前状态的诊断依据之一。我们对DIC和可能伴有DIC前状态的多种疾病患者的血浆进行D -二聚体的测定，并探讨了其临床意义。
1 材料与方法
1.1 研究对象 ①正常对照组：40例，男20例，女20例，年龄18～69岁(中位数36岁)，均为 本院健康职工及实习医生。②DIC组：22例，男12例，女10例，年龄17～72岁(中位数为35岁 )。诊断标准按文献〔1〕。原发疾病：急性非淋巴细胞白血病7例，肺癌5例，胃癌6 例，其它4例(感染性疾病)。③急性粒细胞白血病(AML)：初病期27例，男14例，女13例，平 均年龄45岁(17～75岁)。其中M16例，M26例，M34例，M55例，嗜酸细胞白血病1例 。缓解期32例，男17例，女15例，平均年龄38岁(17～75岁)。M18例，M28例，M36例 ，M57例，嗜酸细胞性白血病1例，M61例。④实体肿瘤：40例，男28例，女12例。平均 年龄55岁(40～78岁)，其中肺癌21例，胃癌19例。⑤脑血管意外：60例，男48例，女12例， 平均年龄68岁(51～79岁)，其中出血性中风30例，脑栓塞30例。⑥恶性淋巴瘤：初发期32例 ，男27例，女4例，年龄16～78岁，平均32岁。均为非霍奇金病，Ⅱ期12例，Ⅲ期17例，Ⅳ 期3例。缓解期32例次，男28例，女4例，平均年龄32岁。
, 百拇医药
1.2 测定方法 血浆制备：①抽取受检查者静脉血，以0.13 mol/L枸橼酸钠9∶1抗凝，3 000 r/min，离心10 min，分离血浆待测。②D-二聚体测定：ELTSA双抗体夹心法。在包被 单抗的酶标反应板上加入样品和不同稀释度的标准品，37℃温育1 h后洗涤4次，再加入酶标 记的单抗，37℃温育30 min后再洗涤4次，加底物显色，37℃温育15 min后加2 mol/L硫酸终 止反应，在492 nm波长下测定吸光度。根据标准曲线，求得含量。试剂盒由上海捷门生物技 术公司提供。
2 结果
①方法学评估：用ELISA方法测定，10份标本 连续测定，批内误差7.8%，12份标本同时双份测定，平均相差4.4%，12例标本分两 次不同板测定，平均相差5.4%。②参考值：正常对照组血浆D-二聚体为0.14±0 .07 mg/L。若以单侧95%为正常上限，应为0.255 mg/L，我室规定超过0.25 mg/L 为异常。③22例弥漫性血管内凝血患者在初诊时D-二聚体的含量为7.34±1.72 mg /L，用肝素50 mg-75 mg/d，持续静脉点滴治疗后，有效的18例在第3天D-二聚体开始下降，为5.23±1.42 mg/L，第7天D-二聚体为2.78±0.23 mg/L。4例无效患者血浆D-二聚体在第3 天(7.52±1.82 mg/L)和第7天(7.62±1.78 mg/L)无明显变化。④各种疾 病中D-二聚体测定结果见附表。
, 百拇医药
附表 各种疾病中血浆D-二聚体的含量
±s 检测对象n
血浆D-二聚体含 量(mg/L)
P值*
P值△
对照组
48
0.14±0.07
急性粒细胞白血病
初诊期
, 百拇医药 缓解期
27
30
2.54±1.47
0.11±0.05
<0.05
>0.05
<0.05
恶性淋巴瘤
初诊期
缓解期
32
32
, 百拇医药
2.04±1.67
0.12±0.05
<0.05
>0.05
<0.05
脑血管意外
出血性中风
脑栓塞
30
30
0.17±0.42
0.56±0.47
, http://www.100md.com >0.05
<0. 05
实体肿瘤(肺癌、胃癌)
40
1.89±0.29
<0.05
弥漫性血管内凝血
22
7.34±1.72
<0.01
注与对照组比较 △初诊期与缓解期比较
, http://www.100md.com
附图 DIC治疗过程中血浆D-二聚体的动态变化
3 讨论
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种特 异性降解产物，为纤维蛋白降解产物中的最小片段，是反映凝血及纤溶活化的分子标志物。 DIC发生时凝血系统被激活，循环中产生了大量微血栓，继而激活了纤溶系统发生了纤溶亢 进，交联纤维蛋白被纤溶酶降解而产生了大量的D-二聚体。Greenberg〔2〕用乳胶 法检测了132例可疑DIC的血浆D-二聚体，发现FDP<10 mg/L时，69%患者的D-二聚体阳性 ；当FDP>10 mg/L时，约90%的患者D-二聚体阳性。Boischair〔3〕对30例DIC患者 进行了D-二聚体检测，发现DIC患者血浆及血清D-二聚体含量均显著增高，敏感性97%～10 0%，认为与以往诊断指标如血小板、纤维蛋白原、FDP等相比较，D-二聚体是唯一直接反映 凝血酶和纤溶酶生成的理想指标。对DIC的诊断有较高的价值。Carr用ELISA法测定了58例可 疑的DIC，同时与FDP进行比较，如果以D-二聚体>0.5 mg/L作为诊断DIC的标准，则其 诊断特异性达到97%，阳性预测率96%。FDP的敏感性较高，但缺乏特异性。Koyama认为D-二 聚体的变化早于3 P和FDP，有助于DIC的早期诊断。国内刘氏报告24例DIC病人，DIC患者血 浆中D-二聚体定量测定除1例，其余均在5 mg/L以上。表明D-二聚体的测定可作为DIC诊断 指标之一。本文22例DIC病人，血浆中D-二聚体定量明显增高，均值为7.34±1.72 mg/L，除3例<5 mg外(分别为3.2，3.87，4.72 mg/L)，其余19例均>5 mg/L 。因此认为，血浆D-二聚体>5 mg/L对DIC有诊断意义，如<3 mg/L基本可以排除DIC，但 要警惕DIC的发生。18例经治疗有效的DIC患者，治疗后血浆D-二聚体浓度明显下降，而4例 无效患者血浆D-二聚体无明显变化，DIC患者动态观察血浆D-二聚体浓度的变化，以便及 时了解治疗效果和判断预后。急性粒细胞白血病(AML)、恶性淋巴瘤和实体癌(肝癌和胃癌) 在初诊时患者的血浆D-二聚体水平高于正常对照组。这些疾病在发病期有出凝血机制的紊 乱，存在DIC前状态。提示这类患者易发生DIC。AML和恶性淋巴瘤在缓解期血浆D-二聚体水 平明显低于初诊时(P<0.05)，这说明AML和恶性淋巴瘤患者D-二聚体水平随病情 而变化。
, 百拇医药
脑血管性疾病：脑栓塞与正常对照组，比较血浆D-二聚体含量明显升高(P<0.05) ，提示这类患者中常处于高凝状态，血栓后溶解物的大量产生有关。
参考文献
[1] 张之南.血液病诊断及疗效标准.北京：科学技术出版社，1991.278
[2] Greenberg CS et al. Am J Clin Pathol 1987;87:94
[3] Boisclair DA, Lane JT, Wilde HA. A comparative evaluation of assays for marke rs of actived coagulation and/or fibrinolysis:thrombin-antithrombin complex, D -dimer and fibrinogen/fibrin fragment E antigen. Br J Haenatol,1990,74(4):471
(1998-07-02 收稿), http://www.100md.com