体外液体培养联合低分子天然抑瘤物净化自体骨髓移植治疗AL
作者：魏建平 朱玲 顾惜春 赵声明 赵夷年
单位：卫生部北京医院血液科
关键词：自体骨髓移植；白血病，急性；骨髓净化；液体；培养/低分子天然抑瘤物
临床血液学杂志990212 自体骨髓移植(ABMT)已广泛应用于急性白血病(AL)的治疗， 并取得了可喜成果。但因骨髓中存在白血病残留细胞而使其成为移植后复发的重要原因之一 ，体外有效净化骨髓中残存的白血病细胞，减少复发成为人们关注的问题。我院1990年5月 ～1995年5月采用军事医学科学提供的长期骨髓液体培养(LTBMC)联合低分子天然抑瘤物(LMW NS)体外净化法行ABMT治疗急性白血病10例，报告如下。
1 病例和方法
1.1 病例 10例急性白血病均经骨髓形态、组化及免疫分 型明确诊断。男7例，女3例。年龄18～46岁，平均年龄31.7岁。急淋L22例，急粒8例 (见表1)。第1次完全缓解(CR1)后移植者6例，第2次完全缓解(CR2)后移植者2例，复发 早期2例(M4原粒+原单8.5%，L2原幼淋9.5%)。
, 百拇医药
1.2 移植方法 ①骨髓采集与保存：在硬膜外麻醉下，双 侧髂后上棘多层次多部位采集骨髓，方法按文献〔1，2〕。②LTBMC联合LMWNS净化： 方法按文献〔1〕培养5～9 d，骨髓培养前单个核细胞(MNC)均值2.08×108/kg ，CFU-GM平均7.58×104/kg；骨髓净化、培养后MNC均值1.76×108/kg，CFU -GM均值5.78×104/kg(见表2)。③预处理方案：见表1。环磷酰胺(CTX)50 mg/kg×2 ，足叶乙甙(VP 16)400～600 mg×2(8例)或CTX 50 mg/kg×2，Ara-C 600～700 mg×2。放 疗TBI 16.6～18.8 Gy。④支持治疗及并发症的预防：患者住空气层流无菌室，全 环境保护。常规消毒饮食，口服肠道消毒药及五官、肛门护理。大量补液碱化尿液，强迫利 尿，预防出血性膀胱炎，常规使用止吐药，输血、血小板，预防感染、出血、间质性肺炎等 。⑤疗效判断标准：采用1987年全国白血病化学治疗讨论会拟定的AL疗效标准〔3〕 。
, 百拇医药
2 结果
2.1 造血功能的重建 10例AL患者ABMT后造血功能均获重 建，外周血白细胞降至零的时间为ABMT后5.5(3～6) d，持续时间3.5(3～6) d，WB C≥1.0×109/L的时间18～60 d，平均23.5 d，BPC最低值为6.0×109/L， BPC>20×109/L的时间28.5(20～65)d。
2.2 并发症 口腔粘膜炎10例，发热7例，SGPT轻度升高4 例，经治疗均愈。迟发出血性膀胱炎、脑出血各1例。
2.3 疗效观察 见表1。10例1次性植活，至1998年5月， 平均持续缓解(CCR)时间3.57(0.25～7.3)年，总CCR率80%。1例因感染，脑出 血于+58 d死亡，1例因严重迟发性出血性膀胱炎于+60 d死亡。2例移植时处于复发早期的患 者分别于ABMT后3个月及6个月复发后死亡，其余6例仍持续缓解中(包括2例CR2者)。
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表1 10例患者的临床资料 病例
年 龄
性别
诊断
分期
移植时状态
预处理
目前状态
放疗(Gy)
化疗
1
30
男
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ALM
M2
CR2
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CCR，DFS88个月
2
18
男
ALL
L2
ER
, http://www.100md.com
TBI8.8
Cy50×2，Ara-C 700×2
3个月复发
3
46
男
ALM
M4
ER
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
6个月复发
, 百拇医药
4
28
男
ALL
L2
CR
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 64个月
5
33
男
ALM
, 百拇医药
M3
CR2
TBI7.7
Cy50×2，Ara-C 600×2
CCR，DFS 59个月
6
32
女
ALM
M2
CR
TBI7.7
, http://www.100md.com
Cy50×2，Vp16 600×2
58 d感染脑出血亡
7
31
男
ALM
M3
CR
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
60 d出血性膀胱炎亡
8
, 百拇医药
36
男
ALM
M2
CR
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 50个月
9
32
女
ALM
M3
, 百拇医药
CR
TBI6.6
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 37个月
10
31
女
ALM
M3
CR
TBI6.6
Cy50×2，Vp16 400×2
, 百拇医药
C CR，DFS 36个月
注：全身照射：TBI，CY单位为mg/kg，VP16、Ara-C单位为mg表2 骨髓净化前后造血细胞的变化 病例
MNC(×108/kg)
CFU-GM(×104/kg)
净化
d
净化前
净化后
净化前
净化 后
1
, http://www.100md.com
1.64
2.02
5.50
8.30
5
2
2.11
1.82
8.16
5.78
5
3
1.56
, http://www.100md.com
1.29
4.28
1.78
9
4
3.71
2.51
19.23
9.20
5
5
2.86
1.70
, http://www.100md.com
10.87
5.52
9
6
1.65
2.17
4.25
5.34
6
7
1.84
1.59
4.31
, http://www.100md.com
3.78
6
8
2.12
1.54
6.48
5.25
6
9
2.10
3.09
2.00
3.50
, http://www.100md.com
5
10
1.98
2.12
1.64
3.20
5
3 讨论
近年来，国际多中心大系列观察，AL患者ABMT的疗效和地位得到肯定，但复发 率高〔4〕。而骨髓移植物中残留的白血病细胞是自体骨髓移植术后白血病复发的主 要原因。研究表明，在人胎儿肝脏中存在着一类天然的低分子量的对白血病细胞有一定选择 性抑制作用的抑瘤物，利用这种低分子抑瘤物可在体外净化白血病细胞〔5，6〕。骨 髓体外长期培养联合人类低分子天然抑瘤物能够选择性杀伤白血病细胞并保留足够的正常造 血干细胞，明显提高体外净化的效果〔1，7〕。本文结果充分证明了这一点。我们应 用该法行ABMT治疗AL 10例，CCR 80%，平均CCR时间3.57年，最长已达7.3年，疗效 满意。10例中有2例为第2次缓解后行ABMT，CCR已达7.3年及4.9年，目前仍CCR状态 ，说明第2次缓解的病人，如有条件应及时积极行ABMT治疗，仍能获长期无病生存。复发的2 例病人，在行ABMT时均处于早期复发阶段，说明移植时状态很重要，关系到今后能否CCR。 体外长期培养联合天然低分子抑瘤物净化骨髓，是一生物学方法，对正常造血细胞影响小， 对人体无任何毒副作用，有利于正常造血和免疫功能恢复，是一安全有效的方法。
邮政编码：北京，100730
(1998-08-20 收稿), http://www.100md.com
单位：卫生部北京医院血液科
关键词：自体骨髓移植；白血病，急性；骨髓净化；液体；培养/低分子天然抑瘤物
临床血液学杂志990212 自体骨髓移植(ABMT)已广泛应用于急性白血病(AL)的治疗， 并取得了可喜成果。但因骨髓中存在白血病残留细胞而使其成为移植后复发的重要原因之一 ，体外有效净化骨髓中残存的白血病细胞，减少复发成为人们关注的问题。我院1990年5月 ～1995年5月采用军事医学科学提供的长期骨髓液体培养(LTBMC)联合低分子天然抑瘤物(LMW NS)体外净化法行ABMT治疗急性白血病10例，报告如下。
1 病例和方法
1.1 病例 10例急性白血病均经骨髓形态、组化及免疫分 型明确诊断。男7例，女3例。年龄18～46岁，平均年龄31.7岁。急淋L22例，急粒8例 (见表1)。第1次完全缓解(CR1)后移植者6例，第2次完全缓解(CR2)后移植者2例，复发 早期2例(M4原粒+原单8.5%，L2原幼淋9.5%)。
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1.2 移植方法 ①骨髓采集与保存：在硬膜外麻醉下，双 侧髂后上棘多层次多部位采集骨髓，方法按文献〔1，2〕。②LTBMC联合LMWNS净化： 方法按文献〔1〕培养5～9 d，骨髓培养前单个核细胞(MNC)均值2.08×108/kg ，CFU-GM平均7.58×104/kg；骨髓净化、培养后MNC均值1.76×108/kg，CFU -GM均值5.78×104/kg(见表2)。③预处理方案：见表1。环磷酰胺(CTX)50 mg/kg×2 ，足叶乙甙(VP 16)400～600 mg×2(8例)或CTX 50 mg/kg×2，Ara-C 600～700 mg×2。放 疗TBI 16.6～18.8 Gy。④支持治疗及并发症的预防：患者住空气层流无菌室，全 环境保护。常规消毒饮食，口服肠道消毒药及五官、肛门护理。大量补液碱化尿液，强迫利 尿，预防出血性膀胱炎，常规使用止吐药，输血、血小板，预防感染、出血、间质性肺炎等 。⑤疗效判断标准：采用1987年全国白血病化学治疗讨论会拟定的AL疗效标准〔3〕 。
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2 结果
2.1 造血功能的重建 10例AL患者ABMT后造血功能均获重 建，外周血白细胞降至零的时间为ABMT后5.5(3～6) d，持续时间3.5(3～6) d，WB C≥1.0×109/L的时间18～60 d，平均23.5 d，BPC最低值为6.0×109/L， BPC>20×109/L的时间28.5(20～65)d。
2.2 并发症 口腔粘膜炎10例，发热7例，SGPT轻度升高4 例，经治疗均愈。迟发出血性膀胱炎、脑出血各1例。
2.3 疗效观察 见表1。10例1次性植活，至1998年5月， 平均持续缓解(CCR)时间3.57(0.25～7.3)年，总CCR率80%。1例因感染，脑出 血于+58 d死亡，1例因严重迟发性出血性膀胱炎于+60 d死亡。2例移植时处于复发早期的患 者分别于ABMT后3个月及6个月复发后死亡，其余6例仍持续缓解中(包括2例CR2者)。
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表1 10例患者的临床资料 病例
年 龄
性别
诊断
分期
移植时状态
预处理
目前状态
放疗(Gy)
化疗
1
30
男
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ALM
M2
CR2
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CCR，DFS88个月
2
18
男
ALL
L2
ER
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TBI8.8
Cy50×2，Ara-C 700×2
3个月复发
3
46
男
ALM
M4
ER
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
6个月复发
, 百拇医药
4
28
男
ALL
L2
CR
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 64个月
5
33
男
ALM
, 百拇医药
M3
CR2
TBI7.7
Cy50×2，Ara-C 600×2
CCR，DFS 59个月
6
32
女
ALM
M2
CR
TBI7.7
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Cy50×2，Vp16 600×2
58 d感染脑出血亡
7
31
男
ALM
M3
CR
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Cy50×2，Vp16 400×2
60 d出血性膀胱炎亡
8
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36
男
ALM
M2
CR
TBI7.7
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 50个月
9
32
女
ALM
M3
, 百拇医药
CR
TBI6.6
Cy50×2，Vp16 400×2
CC R，DFS 37个月
10
31
女
ALM
M3
CR
TBI6.6
Cy50×2，Vp16 400×2
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C CR，DFS 36个月
注：全身照射：TBI，CY单位为mg/kg，VP16、Ara-C单位为mg表2 骨髓净化前后造血细胞的变化 病例
MNC(×108/kg)
CFU-GM(×104/kg)
净化
d
净化前
净化后
净化前
净化 后
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1.64
2.02
5.50
8.30
5
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4.28
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5
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1.98
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3.20
5
3 讨论
近年来，国际多中心大系列观察，AL患者ABMT的疗效和地位得到肯定，但复发 率高〔4〕。而骨髓移植物中残留的白血病细胞是自体骨髓移植术后白血病复发的主 要原因。研究表明，在人胎儿肝脏中存在着一类天然的低分子量的对白血病细胞有一定选择 性抑制作用的抑瘤物，利用这种低分子抑瘤物可在体外净化白血病细胞〔5，6〕。骨 髓体外长期培养联合人类低分子天然抑瘤物能够选择性杀伤白血病细胞并保留足够的正常造 血干细胞，明显提高体外净化的效果〔1，7〕。本文结果充分证明了这一点。我们应 用该法行ABMT治疗AL 10例，CCR 80%，平均CCR时间3.57年，最长已达7.3年，疗效 满意。10例中有2例为第2次缓解后行ABMT，CCR已达7.3年及4.9年，目前仍CCR状态 ，说明第2次缓解的病人，如有条件应及时积极行ABMT治疗，仍能获长期无病生存。复发的2 例病人，在行ABMT时均处于早期复发阶段，说明移植时状态很重要，关系到今后能否CCR。 体外长期培养联合天然低分子抑瘤物净化骨髓，是一生物学方法，对正常造血细胞影响小， 对人体无任何毒副作用，有利于正常造血和免疫功能恢复，是一安全有效的方法。
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