低分子肝素对血液透析患者血小板活化状态的影响
作者：陆军 宋玉杰 朱亚平 胡惠平 沈健
单位：江苏省大丰市人民医院肾内科 224100
关键词：肝素；血液透析；血小板平均体积；血小板α-颗粒膜蛋白
临床内科杂志/990216 【摘要】目的 研究低分子量肝素(LMWH)对血液透析(血透)患者血小板平均体积(MPV)和α颗膜粒膜蛋白(GMP-140)的影响。方法 对45例维持性血透患者分别使用LMWH和标准肝素(SH)抗凝,分别测定透析前、透析后15、30、60、120、240分钟时活化的部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)及血小板计数(BPC)、MPV、GMP-140并作比较。结果 SH组APTT和TT在透析120及240分钟时较之LMWH组显著延长(P均<0.001),透析15分钟后SH组MPV、GMP-140较透析前及LMWH组有极显著增高(P均<0.01)。结论 SH是引起血透过程中血小板活化的重要因素之一,LMWH能显著改善这种状况。
, 百拇医药
Effect of low moleoular welght hepain on mean playelet volume and alpha-granule membrane protein in patlents treated with hemodlalysis
Lu Jun,Shong Yu jie,Zhu Ya ping,et al.
pioples Hospital of Dafeng City,Jiansu 224100
【Abstract】Objectives To investigate the effect of low molecular weight heparin on mean platelet volume(MPV)and alpha-granule membrane protein(GMP-140)in patients with hemodialysis(HD).Methods 45 patients with HD were treated with same HD fashion and used either with low molecular weighyt heparin(LMWH)or standard heparin(SH).The active partial thromboplasin time (APTT),thrombin time(TT),BPC,MPV,GMP-140 were measured at prior-HD and 15,30,60,120,240 minutes after HD,respectively.Results APTT and TT were markedly prolongated at 120,240 minutes after HD in SH group than those in LMWH group(all P<0.001).MPV and GMP-140 were much significantly higher at 15 minutes after HD in SH than those in LMWH group (all P<0.01).Conclusion The SH might be an important factor contributing to platelet activation and that LMWH can improve platelet activation during HD.
, 百拇医药
【Key words】Heparin Bemodialysis Mean platelet volume Platelet alpelet alpha-granule mimbrane protein.
长期以来,人们对血液透析(血透)过程中补体激活、白细胞减少、血小板减少以及一些细胞因子水平的变化,大多认为是受膜的生物相容性等影响,而往往忽略了抗凝剂肝素的影响。我们对45例使用低分子量肝素(LMWH)抗凝的血透患者的血小板平均体积(MPV)及血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)水平进行了观察,并与标准肝素(SH)作对比研究。现报道如下。
对象与方法
一、对象:45例均系慢性肾小球肾炎终未期肾功能衰竭的维持性血透患者,其中男性29例,女性16例,年龄23～68(平均35.3±9.5)岁,透析时间12～108(平均32.1±10.0)个月。研究期间均未使用影响血小板功能的药物。所有病人病情稳定,无出血倾向。
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二、方法
(一)透析方法:所有病人均使用日本NIKK ISO DBB22B型透析机常规作碳酸氢盐透析,每周3次,每次4小时,血流量250 ml/L,透析液流量500 ml/L。研究期间均采用聚砜膜透析器(德国Fresenirs F6,面积1.3 m2),透析器、管道、穿刺针均系一次性使用。
(二)肝素使用:LMWH在血透前一次性静脉注射10 000 U,不用维持量。SH按平时个体化剂量给予,平均首量3 125±900U,维持量每小时1 000±250U,血透结束前1小时停用。
(三)45例患者第一周第一次血透采用LMWH抗凝,第二周第一次血透采用SH抗凝。分别观察透析前后血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,分别测定透析肝素注入前(0分钟)及透析后15、30、60、120、240分钟时血小板计数(BPC)、MPV、GMP-140以及活化的部分凝血活酶时间(APTT)与凝血酶时间(TT)。
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(四)检测方法:(1)MPV及BPC测定:经动脉端抽取1ml血液立即注入含乙二胺四乙酸二钾1.6ml的抗凝管中,用荷兰产SWELAB AC920全自动血球计数仪检测。(2)GMP-140测定:经动脉端取2ml血液加入含0.2 ml 2% EDTA Na2的塑料试管中,3 000rpm离心10分钟,收集上层血浆,用ELISA法测定,试剂盒由上海亚都医学生物技术公司生产。
三、统计学处理:检测数据采用均数±标准差(
±s)表示,同组透析过程中的比较采用F检验,同组前后的两两比较及组间比较采用t检验。
结果
一、2种方法透析前后患者BUN、Cr、Hb、Hct的比较无显著性差异。LMWH组出现齿龈出血2例,SH组2例。
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二、2组透析过程中APTT、TT水平的变化:见表1。LMWH组透析240分钟时APTT较同组0分钟时比较有显著性差异(t=2.36,P<0.05);SH组240分钟时APTT较同组0分钟比较有极显著性差异(t=3.42,P<0.01)。LMWH组240分钟时TT与0分钟时比较无显著性差异(t=1.86,P>0.05);SH组240分钟时TT与0分钟时比较有极显著性差异(t=3.50,P<0.01)。
三、2组透析过程中MPV、BPC、GMP-140的变化:见表2。透析15分钟后二组MPV、GMP-140水平比较有极显著性差异(P均<0.01);BPC计数在透析后15、30分钟时二组间比较有极显著性差异(P均<0.01);SH组透析后与透析前比较MPV有极显著增高(F=8.89,P<0.01)、GMP-140有极显著增高(F=12.86,P<0.001)。
表1 二组患者透析过程中APTT、TT水平的变化(±s,秒) 组 别
, 百拇医药
项 目
例数
0min
15min
30min
60min
120min
240min
LMWH组
APTTTT
45
45
26.00±4.06
, 百拇医药
12.10±1.36
49.44±9.89
30.14±7.87
46.75±9.72
32.32±8.21
40.33±7.21△
27.35±7.83*
36.59±8.00*
21.00±5.11*
30.27±6.06*
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16.07±2.01*
SH组
APTT
TT
45
45
25.89±5.67
12.40±1.60
55.82±9.01
35.24±9.92
51.23±8.19
34.77±9.00
, 百拇医药
50.36±9.98
30.56±6.88
46.88±7.85
30.45±7.55
42.20±8.05
25.25±5.13
注:本院APTT正常对照值为25.00±2.5秒;TT正常对照值为12.00±1.00秒。与SH组比较*P<0.01;△P<0.05。表2 二组患者透析过程中MPV、BPC、GMP-140的变化(±s) 组 别
项 目
, 百拇医药 例数
0min
15min
30min
60min
120min
240min
LMWH组
MPV(fl)BPC(×109/L)
GMP-140(ng/ml)
45
45
, 百拇医药
45
10.30±0.70
180.0±39.9
16.11±4.40
11.03±0.66*
170.0±31.0*
28.30±7.72*
10.70±0.56*
168.3±45.5*
33.47±8.46*
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10.61±0.70*
175.7±47.4△
27.81±9.45*
10.57±0.71*
166.1±46.3△
30.10±8.63*
10.40±0.80*
169.9±49.1△
23.14±6.41
, 百拇医药
SH组
MPV(fl)
BPC(×109/L)
GMP-140(ng/ml)
45
45
45
10.28±0.70
165.0±39.0
19.55±5.45
11.92±0.65
128.5±19.1
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66.16±9.40
12.80±0.71
122.4±24.3
86.12±14.33
12.81±0.69
134.2±19.9
80.54±10.49
12.30±0.67
140.1±20.5
77.11±11.71
11.68±0.70
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140.3±20.4
68.12±14.46
注:与SH组比较:*P<0.01;△P<0.05。讨论
过去在讨论血液透析的生物相容性时较多地关注了透析膜及透析液的因素。对LMWH较之SH在降低透析出血的危险性方面也已有一定的认识[1]。LMWH是从SH中分离出来的分子量在4 000～7 000 的肝素片断。当肝素分子量下降时,它表现为同抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的亲和性增加,抗Xa因子(FXa)活性增强,而对抗凝血酶活性大大降低,不明显延长APTT和TT[2],与本组结果相一致。然而LMWH与SH相比,除了在抗凝作用上的特点外,对血小板活化功能的影响也有显著的不同。SH进入人体后与体内少量血小板因子4(PF4)形成PF4肝素复合物,这种复合物与特异性的IgG或IgM抗体结合形成能与血小板Fc受体结合的免疫复合物,使血小板激活[3],激活的血小板MPV明显增大。MPV主要反映了体内血小板活化的程度,并能释放5-HT、血栓烷素,使GMP-140迅速表达至血小板质膜的表面并释放[4]。Brace等的研究表明,随着肝素分子量的减小而对血小板聚集的影响越小,与血管内皮的亲和力也越小。SH引起的血小板激活并不仅仅表现为血小板数量的减少,GMP-140能介导血小板、内皮细胞、中性粒细胞和单个核细胞的粘附功能,产生大量的氧自由基,造成内皮细胞损伤和一些细胞因子如IL-1、IL-6等释放[5],因而在透析的急慢性并发症中起一定的作用。本研究证实,SH较之LMWH能引起血透患者MPV增大,GMP-140释放增加,是血液透析过程中血小板激活和引起血透并发症的重要因素之一。
, http://www.100md.com
参考文献
1.朱兰英,吴永贵,毛海萍,等.单剂量小分子肝素在血液透析抗凝中的应用.中华肾脏病杂志,1996,(3)∶32.
2.Green D,Hirsh J,Heit J,et al.Low molecular weight heparin:Acritical analysis of clinical trials.Pharmacol Rev,1994,46(1)∶90.
3.Aster RH.Heparin-Induced thrombocytopenia and thrombosis.N Eng J Med,1995,332(20)∶1374.
4.Mally T,Langhrone P,Elton RA,et al.Platelet size in stroke patients.Stroike,1995,26∶995.
5.陆军,肖建美,智睿,等。血液透析对血小板α颗粒膜蛋白的影响及临床意义。临床荟萃,1998,13(18)∶823.
收稿:1998-08-25 修回:1998-10-06, http://www.100md.com
单位：江苏省大丰市人民医院肾内科 224100
关键词：肝素；血液透析；血小板平均体积；血小板α-颗粒膜蛋白
临床内科杂志/990216 【摘要】目的 研究低分子量肝素(LMWH)对血液透析(血透)患者血小板平均体积(MPV)和α颗膜粒膜蛋白(GMP-140)的影响。方法 对45例维持性血透患者分别使用LMWH和标准肝素(SH)抗凝,分别测定透析前、透析后15、30、60、120、240分钟时活化的部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)及血小板计数(BPC)、MPV、GMP-140并作比较。结果 SH组APTT和TT在透析120及240分钟时较之LMWH组显著延长(P均<0.001),透析15分钟后SH组MPV、GMP-140较透析前及LMWH组有极显著增高(P均<0.01)。结论 SH是引起血透过程中血小板活化的重要因素之一,LMWH能显著改善这种状况。
, 百拇医药
Effect of low moleoular welght hepain on mean playelet volume and alpha-granule membrane protein in patlents treated with hemodlalysis
Lu Jun,Shong Yu jie,Zhu Ya ping,et al.
pioples Hospital of Dafeng City,Jiansu 224100
【Abstract】Objectives To investigate the effect of low molecular weight heparin on mean platelet volume(MPV)and alpha-granule membrane protein(GMP-140)in patients with hemodialysis(HD).Methods 45 patients with HD were treated with same HD fashion and used either with low molecular weighyt heparin(LMWH)or standard heparin(SH).The active partial thromboplasin time (APTT),thrombin time(TT),BPC,MPV,GMP-140 were measured at prior-HD and 15,30,60,120,240 minutes after HD,respectively.Results APTT and TT were markedly prolongated at 120,240 minutes after HD in SH group than those in LMWH group(all P<0.001).MPV and GMP-140 were much significantly higher at 15 minutes after HD in SH than those in LMWH group (all P<0.01).Conclusion The SH might be an important factor contributing to platelet activation and that LMWH can improve platelet activation during HD.
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【Key words】Heparin Bemodialysis Mean platelet volume Platelet alpelet alpha-granule mimbrane protein.
长期以来,人们对血液透析(血透)过程中补体激活、白细胞减少、血小板减少以及一些细胞因子水平的变化,大多认为是受膜的生物相容性等影响,而往往忽略了抗凝剂肝素的影响。我们对45例使用低分子量肝素(LMWH)抗凝的血透患者的血小板平均体积(MPV)及血小板α颗粒膜蛋白(GMP-140)水平进行了观察,并与标准肝素(SH)作对比研究。现报道如下。
对象与方法
一、对象:45例均系慢性肾小球肾炎终未期肾功能衰竭的维持性血透患者,其中男性29例,女性16例,年龄23～68(平均35.3±9.5)岁,透析时间12～108(平均32.1±10.0)个月。研究期间均未使用影响血小板功能的药物。所有病人病情稳定,无出血倾向。
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二、方法
(一)透析方法:所有病人均使用日本NIKK ISO DBB22B型透析机常规作碳酸氢盐透析,每周3次,每次4小时,血流量250 ml/L,透析液流量500 ml/L。研究期间均采用聚砜膜透析器(德国Fresenirs F6,面积1.3 m2),透析器、管道、穿刺针均系一次性使用。
(二)肝素使用:LMWH在血透前一次性静脉注射10 000 U,不用维持量。SH按平时个体化剂量给予,平均首量3 125±900U,维持量每小时1 000±250U,血透结束前1小时停用。
(三)45例患者第一周第一次血透采用LMWH抗凝,第二周第一次血透采用SH抗凝。分别观察透析前后血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,分别测定透析肝素注入前(0分钟)及透析后15、30、60、120、240分钟时血小板计数(BPC)、MPV、GMP-140以及活化的部分凝血活酶时间(APTT)与凝血酶时间(TT)。
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(四)检测方法:(1)MPV及BPC测定:经动脉端抽取1ml血液立即注入含乙二胺四乙酸二钾1.6ml的抗凝管中,用荷兰产SWELAB AC920全自动血球计数仪检测。(2)GMP-140测定:经动脉端取2ml血液加入含0.2 ml 2% EDTA Na2的塑料试管中,3 000rpm离心10分钟,收集上层血浆,用ELISA法测定,试剂盒由上海亚都医学生物技术公司生产。
三、统计学处理:检测数据采用均数±标准差(
±s)表示,同组透析过程中的比较采用F检验,同组前后的两两比较及组间比较采用t检验。结果
一、2种方法透析前后患者BUN、Cr、Hb、Hct的比较无显著性差异。LMWH组出现齿龈出血2例,SH组2例。
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二、2组透析过程中APTT、TT水平的变化:见表1。LMWH组透析240分钟时APTT较同组0分钟时比较有显著性差异(t=2.36,P<0.05);SH组240分钟时APTT较同组0分钟比较有极显著性差异(t=3.42,P<0.01)。LMWH组240分钟时TT与0分钟时比较无显著性差异(t=1.86,P>0.05);SH组240分钟时TT与0分钟时比较有极显著性差异(t=3.50,P<0.01)。
三、2组透析过程中MPV、BPC、GMP-140的变化:见表2。透析15分钟后二组MPV、GMP-140水平比较有极显著性差异(P均<0.01);BPC计数在透析后15、30分钟时二组间比较有极显著性差异(P均<0.01);SH组透析后与透析前比较MPV有极显著增高(F=8.89,P<0.01)、GMP-140有极显著增高(F=12.86,P<0.001)。
表1 二组患者透析过程中APTT、TT水平的变化(
±s,秒) 组 别, 百拇医药
项 目
例数
0min
15min
30min
60min
120min
240min
LMWH组
APTTTT
45
45
26.00±4.06
, 百拇医药
12.10±1.36
49.44±9.89
30.14±7.87
46.75±9.72
32.32±8.21
40.33±7.21△
27.35±7.83*
36.59±8.00*
21.00±5.11*
30.27±6.06*
, http://www.100md.com
16.07±2.01*
SH组
APTT
TT
45
45
25.89±5.67
12.40±1.60
55.82±9.01
35.24±9.92
51.23±8.19
34.77±9.00
, 百拇医药
50.36±9.98
30.56±6.88
46.88±7.85
30.45±7.55
42.20±8.05
25.25±5.13
注:本院APTT正常对照值为25.00±2.5秒;TT正常对照值为12.00±1.00秒。与SH组比较*P<0.01;△P<0.05。表2 二组患者透析过程中MPV、BPC、GMP-140的变化(
±s) 组 别项 目
, 百拇医药 例数
0min
15min
30min
60min
120min
240min
LMWH组
MPV(fl)BPC(×109/L)
GMP-140(ng/ml)
45
45
, 百拇医药
45
10.30±0.70
180.0±39.9
16.11±4.40
11.03±0.66*
170.0±31.0*
28.30±7.72*
10.70±0.56*
168.3±45.5*
33.47±8.46*
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10.61±0.70*
175.7±47.4△
27.81±9.45*
10.57±0.71*
166.1±46.3△
30.10±8.63*
10.40±0.80*
169.9±49.1△
23.14±6.41
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SH组
MPV(fl)
BPC(×109/L)
GMP-140(ng/ml)
45
45
45
10.28±0.70
165.0±39.0
19.55±5.45
11.92±0.65
128.5±19.1
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66.16±9.40
12.80±0.71
122.4±24.3
86.12±14.33
12.81±0.69
134.2±19.9
80.54±10.49
12.30±0.67
140.1±20.5
77.11±11.71
11.68±0.70
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140.3±20.4
68.12±14.46
注:与SH组比较:*P<0.01;△P<0.05。讨论
过去在讨论血液透析的生物相容性时较多地关注了透析膜及透析液的因素。对LMWH较之SH在降低透析出血的危险性方面也已有一定的认识[1]。LMWH是从SH中分离出来的分子量在4 000～7 000 的肝素片断。当肝素分子量下降时,它表现为同抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的亲和性增加,抗Xa因子(FXa)活性增强,而对抗凝血酶活性大大降低,不明显延长APTT和TT[2],与本组结果相一致。然而LMWH与SH相比,除了在抗凝作用上的特点外,对血小板活化功能的影响也有显著的不同。SH进入人体后与体内少量血小板因子4(PF4)形成PF4肝素复合物,这种复合物与特异性的IgG或IgM抗体结合形成能与血小板Fc受体结合的免疫复合物,使血小板激活[3],激活的血小板MPV明显增大。MPV主要反映了体内血小板活化的程度,并能释放5-HT、血栓烷素,使GMP-140迅速表达至血小板质膜的表面并释放[4]。Brace等的研究表明,随着肝素分子量的减小而对血小板聚集的影响越小,与血管内皮的亲和力也越小。SH引起的血小板激活并不仅仅表现为血小板数量的减少,GMP-140能介导血小板、内皮细胞、中性粒细胞和单个核细胞的粘附功能,产生大量的氧自由基,造成内皮细胞损伤和一些细胞因子如IL-1、IL-6等释放[5],因而在透析的急慢性并发症中起一定的作用。本研究证实,SH较之LMWH能引起血透患者MPV增大,GMP-140释放增加,是血液透析过程中血小板激活和引起血透并发症的重要因素之一。
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参考文献
1.朱兰英,吴永贵,毛海萍,等.单剂量小分子肝素在血液透析抗凝中的应用.中华肾脏病杂志,1996,(3)∶32.
2.Green D,Hirsh J,Heit J,et al.Low molecular weight heparin:Acritical analysis of clinical trials.Pharmacol Rev,1994,46(1)∶90.
3.Aster RH.Heparin-Induced thrombocytopenia and thrombosis.N Eng J Med,1995,332(20)∶1374.
4.Mally T,Langhrone P,Elton RA,et al.Platelet size in stroke patients.Stroike,1995,26∶995.
5.陆军,肖建美,智睿,等。血液透析对血小板α颗粒膜蛋白的影响及临床意义。临床荟萃,1998,13(18)∶823.
收稿:1998-08-25 修回:1998-10-06, http://www.100md.com