氟哌啶醇对褪黑素免疫调节作用的影响
作者：杨迎暴 罗景慧 杨淑琴 李经才
单位：杨迎暴 杨淑琴 广州 第一军医大学；罗景慧 广州 南方医院；李经才 沈阳 沈阳药科大学
关键词：褪黑素；淋巴细胞百分率；T-淋巴细胞百分率；血清溶血素水平
中国现代应用药学990215摘要 目的：本文研究了氟哌啶醇(haloperidol,Hal)对褪黑素(melotonin,MT)免疫调节作用的影响。方法：小鼠自实验前1周置于标准明暗周期交迭环境中饲养、自由摄食饮水。实验时分别测定小鼠外周血淋巴细胞百分率(Lym %)、T-淋巴细胞百分率(T-Lym %)与血清溶血素生成水平(HC50值)。结果：MT 20μg/kg可以显著升高Lym%、T-Lym%与HC50值，Hal 0.4～1.6mg/kg对小鼠Lym%、T-Lym%无直接影响，对HC50值有一定影响，但均完全抑制MT升高Lym%、T-Lym%与HC50值的作用。结论：MT的免疫调节作用机制之一可能与多巴胺(DA)受体介导有关。
, http://www.100md.com
Effects of haloperidol on immune regulations of melatonin in mice
Yang Yingbao(Yang YB),Luo Jinghui(Luo JH),Yang Shuqin(Yang SQ),et al(First Military Medical University,Guangzhou 510515)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of haloperidol(Hal) on immune regulation of melatonin(MT) in mice.METHODS:Mice were housed in a standardized light-dark cycle with food and water for a week before experiment.The lymphocyte percentage(Lym%),T-lymphocyte percentage(T-Lym%) and serum hemolysis formation(HC50 value) in peripheral blood of mice were determined,respectively.RESULTS:MT(20μg/kg) significantly enhanced Lym%,T-Lym% and HC50 value.Hal(0.4～1.6mg/kg) had no direct influence on Lym%,T-Lym% and HC50 value,but completely depressed the effective immune enhancement of MT.CONCLUSION:One of mechanisms of MT immune enhancement may be the intermediation of dopamine receptor.
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KEY WORDS melatonin,Lym%,T-Lym%,HC50 value
褪黑素(Melatonin,MT)是松果腺分泌的一种吲哚类激素，其是目前临床上应用较好的一种新型催眠药，通称美乐通宁或美通宁。研究表明，该药在免疫功能的调节方面起非常重要的作用，例如它能够增加免疫器官重量，提高外周血中白细胞数、淋巴细胞百分数与T-淋巴细胞百分数；促进抗体形成及T、B淋巴细胞增殖反应，刺激腹腔巨噬细胞IL-1及脾淋巴细胞IL-2的产生；且MT在介导免疫功能昼夜节律方面发挥重要作用[1～5]。近来有人提出MT是神经内分泌换能器的主要中介激素，而已有研究表明DA通过神经内分泌免疫调节网络对免疫功能产生影响，故本文拟对MT免疫调节机制进行探讨，并探讨DA免疫调节作用与MT的相互关系，本文观察了氟哌啶醇(haloperidol,Hal)对MT免疫调节作用的影响。
1 材料与方法
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1.1 药品与试剂
MT,Sigma公司产品，用2%乙醇-生理盐水配制。氟哌啶醇注射剂，上海海普制药厂(910422)。其余试剂皆为AR级。
1.2 动物
昆明种小白鼠,4～5周龄，本院动物中心提供，体重16～20g,雌、雄兼有，随机分组置于恒湿(22±0.5℃)、恒湿(55%±5%)、12h光照(07:00～19:00h)、12h黑暗(19:00～07:00h)、隔音的环境中，自由摄食、饮水，适应上述环境1周后用于实验。
1.3 方法
1.3.1淋巴细胞百分率测定法[6]。
1.3.2 T-淋巴细胞百分率测定法[7]。
, 百拇医药
1.3.3 血清溶血素(IgM)测定法[8]。
1.3.4 数据处理：测定结果采用均数±标准差(
±s)表示；并用双侧t检验进行显著性差异比较。
2 结 果
2.1 Hal对MT调节Lym%水平的影响
Hal于每日15:00h腹腔注射(ip)给予,16:00h ip MT 20μg/kg,连续23d。结果表明，MT提高Lym%的作用可被Hal所取消，有一定剂量依赖性(见表1)。
表1 Hal对MT调节Lym%水平的影响(n=10) 组 别
, 百拇医药
Lym%
对照组
64.38±6.07
MT20μg/kg
73.67±6.52*1
Hal 0.4mg/kg
64.08±8.66*2
Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
74.40±7.88*1，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
, 百拇医药
66.87±4.38*2
Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
63.82±13.68*2，*4，*5
Hal 1.6mg/kg
64.05±4.42*2
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
61.23±9.26*2，*5，*6
注：与对照组比较，*1P<0.01，*2P>0.05；Hal+MT组与Hal组比较，*3P<0.05，*5P>0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P>0.05，*6P<0.01
, 百拇医药
2.2 Hal对MT调节T-Lym%水平的影响
给药方法同上，结果见表2。表明MT提高T-Lym%的效应同样被Hal取消，没有明显剂量依赖性。表2 Hal对MT调节T-Lym%水平的影响(n=10) 组 别
Lym%
对照组
54.41±4.21
MT20μg/kg
60.16±6.12*1
Hal 0.4mg/kg
51.57±5.35*2
, 百拇医药
Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
54.82±4.02*2，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
52.81±5.97*2
Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
54.25±6.18*2，*3，*4
Hal 1.6mg/kg
53.86±4.49*2
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
, 百拇医药
54.03±5.19*2，*3，*4
注：与对照组相比较，*1P<0.05，*2P>0.05；Hal+MT组与Hal组比较，*3P>0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P<0.05
2.3 Hal对MT调节血清溶血素生成的影响
给药方法同2.1,于d0致敏小鼠,d4取血样测定溶血素值，结果见表3。表明Hal本身对HC50值有一定影响，且有波动，但均能取消MT升高溶血素水平的作用，并有明显的剂量相关性，所以MT对体液免疫的影响与Hal的作用有较密切关系。表3 Hal对MT调节血清溶血素生成能力的影响(n=10) 组 别
Lym%
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对照组
212±48
MT20μg/kg
297±60*1
Hal 0.4mg/kg
144±51*1
Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
270±52*2，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
264±29*1
, 百拇医药
Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
212±48*2，*5，*6
Hal 1.6mg/kg
142±41*1
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
140±19*5，*7，*8
注：与对照组比较，*1P<0.05，*2P>0.05，*7P<0.01；Hal+MT组与Hal组比较，*3P<0.01，*5P<0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P>0.05，*6P<0.05；*8P<0.01
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3 讨 论
本实验结果表明，MT与小鼠免疫功能之间有密切关系，在20μg/kg剂量时能增强免疫功能，这种作用又被多巴胺受体阻断药Hal所调控。Hal对Lym%、T-Lym%水平并无影响，但却非常显著地降低或抑制MT对Lym%、T-Lym%的升高作用;Hal本身对血清溶血素生成能力有一定影响，且同时大大抑制MT提高血清溶血素水平的能力，提示MT对免疫功能的增强作用有可能与多巴胺受体介导有关。
有关DA对免疫功能影响已见于报道，帕金森氏病(PD)病人的黑质内DA神经元变性与消失，使纹状体内DA减少50%之多，病人免疫反应明显下降；潘嘉葆等[9]实验证明PD病人外周血中T细胞数值比正常人明显下降，但外周血中B细胞升高，免疫球蛋白增多，表现为细胞免疫和体液免疫异常；李康生等[10]则通过损毁黑质，使DA减少，发现胸腺萎缩，胸腺细胞自发性增殖反应降低，但体外实验表明，DA对免疫功能无明显影响，从而提出DA对免疫功能的调节作用是通过神经内分泌免疫调节网络，而非DA对免疫细胞的直接作用。本实验观察到，多巴胺受体阻断剂Hal在0.4～1.6mg/kg剂量范围内对体液免疫和细胞免疫几乎无影响，但却可以完全阻断MT免疫增强作用，而MT是神经-内分泌换能器松果腺功能的主要承载者[5]，提示MT免疫调节作用可能受DA调控，而DA的免疫调节作用可能反过来通过松果腺介导的网络来实现。
, 百拇医药
参考文献
[1] 杨迎暴，李经才，徐峰.褪黑素对小鼠免疫功能的影响.生理科学研究，1993∶123.
[2] 魏伟，梁君山，陈学广，等.褪黑素及松果腺培养上清对大鼠巨噬细胞产生IL-1的影响.中国药理学通报，1992，8(1)∶66.
[3] 魏伟，梁君山，陈学广，等.褪黑素对淋巴细胞功能的影响.中国药理学通报，1992，8(2)∶123.
[4] 魏伟，梁君山，陈学广，等.大鼠松果腺培养上清对淋巴细胞功能的影响.中国药理学通报，1992，8(2)∶125.
[5] 杨迎暴，李经才，徐峰，等.松果腺切除与褪黑素治疗对小鼠免疫功能昼夜节律的影响.时间医学杂志，1997，2(1)∶19.
, 百拇医药
[6] 施新猷.医学动物实验方法学.北京：人民卫生出版社，1980∶269.
[7] 宫伟，于爱苹，彭凤生，等.T淋巴细胞酶标记染色鉴别法在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979，9(3)∶42.
[8] 徐学瑛，李元，许津.一个改进的体液免疫测定方法溶血素测定法.药学学报，1979，14(7)∶443.
[9] 潘嘉葆，王增，徐德隆.帕金森症患者免疫状态的改变.中华神经精神科杂志，1985，18∶221.
[10] 李康生，余秀葵，杨锦华，等.实验性帕金森氏病免疫功能变化.上海免疫学杂志，1993，13(1)∶13.
收稿日期：1998-06-23, 百拇医药
单位：杨迎暴 杨淑琴 广州 第一军医大学；罗景慧 广州 南方医院；李经才 沈阳 沈阳药科大学
关键词：褪黑素；淋巴细胞百分率；T-淋巴细胞百分率；血清溶血素水平
中国现代应用药学990215摘要 目的：本文研究了氟哌啶醇(haloperidol,Hal)对褪黑素(melotonin,MT)免疫调节作用的影响。方法：小鼠自实验前1周置于标准明暗周期交迭环境中饲养、自由摄食饮水。实验时分别测定小鼠外周血淋巴细胞百分率(Lym %)、T-淋巴细胞百分率(T-Lym %)与血清溶血素生成水平(HC50值)。结果：MT 20μg/kg可以显著升高Lym%、T-Lym%与HC50值，Hal 0.4～1.6mg/kg对小鼠Lym%、T-Lym%无直接影响，对HC50值有一定影响，但均完全抑制MT升高Lym%、T-Lym%与HC50值的作用。结论：MT的免疫调节作用机制之一可能与多巴胺(DA)受体介导有关。
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Effects of haloperidol on immune regulations of melatonin in mice
Yang Yingbao(Yang YB),Luo Jinghui(Luo JH),Yang Shuqin(Yang SQ),et al(First Military Medical University,Guangzhou 510515)
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of haloperidol(Hal) on immune regulation of melatonin(MT) in mice.METHODS:Mice were housed in a standardized light-dark cycle with food and water for a week before experiment.The lymphocyte percentage(Lym%),T-lymphocyte percentage(T-Lym%) and serum hemolysis formation(HC50 value) in peripheral blood of mice were determined,respectively.RESULTS:MT(20μg/kg) significantly enhanced Lym%,T-Lym% and HC50 value.Hal(0.4～1.6mg/kg) had no direct influence on Lym%,T-Lym% and HC50 value,but completely depressed the effective immune enhancement of MT.CONCLUSION:One of mechanisms of MT immune enhancement may be the intermediation of dopamine receptor.
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KEY WORDS melatonin,Lym%,T-Lym%,HC50 value
褪黑素(Melatonin,MT)是松果腺分泌的一种吲哚类激素，其是目前临床上应用较好的一种新型催眠药，通称美乐通宁或美通宁。研究表明，该药在免疫功能的调节方面起非常重要的作用，例如它能够增加免疫器官重量，提高外周血中白细胞数、淋巴细胞百分数与T-淋巴细胞百分数；促进抗体形成及T、B淋巴细胞增殖反应，刺激腹腔巨噬细胞IL-1及脾淋巴细胞IL-2的产生；且MT在介导免疫功能昼夜节律方面发挥重要作用[1～5]。近来有人提出MT是神经内分泌换能器的主要中介激素，而已有研究表明DA通过神经内分泌免疫调节网络对免疫功能产生影响，故本文拟对MT免疫调节机制进行探讨，并探讨DA免疫调节作用与MT的相互关系，本文观察了氟哌啶醇(haloperidol,Hal)对MT免疫调节作用的影响。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 药品与试剂
MT,Sigma公司产品，用2%乙醇-生理盐水配制。氟哌啶醇注射剂，上海海普制药厂(910422)。其余试剂皆为AR级。
1.2 动物
昆明种小白鼠,4～5周龄，本院动物中心提供，体重16～20g,雌、雄兼有，随机分组置于恒湿(22±0.5℃)、恒湿(55%±5%)、12h光照(07:00～19:00h)、12h黑暗(19:00～07:00h)、隔音的环境中，自由摄食、饮水，适应上述环境1周后用于实验。
1.3 方法
1.3.1淋巴细胞百分率测定法[6]。
1.3.2 T-淋巴细胞百分率测定法[7]。
, 百拇医药
1.3.3 血清溶血素(IgM)测定法[8]。
1.3.4 数据处理：测定结果采用均数±标准差(
±s)表示；并用双侧t检验进行显著性差异比较。2 结 果
2.1 Hal对MT调节Lym%水平的影响
Hal于每日15:00h腹腔注射(ip)给予,16:00h ip MT 20μg/kg,连续23d。结果表明，MT提高Lym%的作用可被Hal所取消，有一定剂量依赖性(见表1)。
表1 Hal对MT调节Lym%水平的影响(n=10) 组 别
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Lym%
对照组
64.38±6.07
MT20μg/kg
73.67±6.52*1
Hal 0.4mg/kg
64.08±8.66*2
Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
74.40±7.88*1，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
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66.87±4.38*2
Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
63.82±13.68*2，*4，*5
Hal 1.6mg/kg
64.05±4.42*2
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
61.23±9.26*2，*5，*6
注：与对照组比较，*1P<0.01，*2P>0.05；Hal+MT组与Hal组比较，*3P<0.05，*5P>0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P>0.05，*6P<0.01
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2.2 Hal对MT调节T-Lym%水平的影响
给药方法同上，结果见表2。表明MT提高T-Lym%的效应同样被Hal取消，没有明显剂量依赖性。表2 Hal对MT调节T-Lym%水平的影响(n=10) 组 别
Lym%
对照组
54.41±4.21
MT20μg/kg
60.16±6.12*1
Hal 0.4mg/kg
51.57±5.35*2
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Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
54.82±4.02*2，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
52.81±5.97*2
Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
54.25±6.18*2，*3，*4
Hal 1.6mg/kg
53.86±4.49*2
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
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54.03±5.19*2，*3，*4
注：与对照组相比较，*1P<0.05，*2P>0.05；Hal+MT组与Hal组比较，*3P>0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P<0.05
2.3 Hal对MT调节血清溶血素生成的影响
给药方法同2.1,于d0致敏小鼠,d4取血样测定溶血素值，结果见表3。表明Hal本身对HC50值有一定影响，且有波动，但均能取消MT升高溶血素水平的作用，并有明显的剂量相关性，所以MT对体液免疫的影响与Hal的作用有较密切关系。表3 Hal对MT调节血清溶血素生成能力的影响(n=10) 组 别
Lym%
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对照组
212±48
MT20μg/kg
297±60*1
Hal 0.4mg/kg
144±51*1
Hal 0.4mg/kg+MT 20μg/kg
270±52*2，*3，*4
Hal 0.8mg/kg
264±29*1
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Hal 0.8mg/kg+MT 20μg/kg
212±48*2，*5，*6
Hal 1.6mg/kg
142±41*1
Hal 1.6mg/kg+MT 20μg/kg
140±19*5，*7，*8
注：与对照组比较，*1P<0.05，*2P>0.05，*7P<0.01；Hal+MT组与Hal组比较，*3P<0.01，*5P<0.05；Hal+MT组与MT组比较，*4P>0.05，*6P<0.05；*8P<0.01
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本实验结果表明，MT与小鼠免疫功能之间有密切关系，在20μg/kg剂量时能增强免疫功能，这种作用又被多巴胺受体阻断药Hal所调控。Hal对Lym%、T-Lym%水平并无影响，但却非常显著地降低或抑制MT对Lym%、T-Lym%的升高作用;Hal本身对血清溶血素生成能力有一定影响，且同时大大抑制MT提高血清溶血素水平的能力，提示MT对免疫功能的增强作用有可能与多巴胺受体介导有关。
有关DA对免疫功能影响已见于报道，帕金森氏病(PD)病人的黑质内DA神经元变性与消失，使纹状体内DA减少50%之多，病人免疫反应明显下降；潘嘉葆等[9]实验证明PD病人外周血中T细胞数值比正常人明显下降，但外周血中B细胞升高，免疫球蛋白增多，表现为细胞免疫和体液免疫异常；李康生等[10]则通过损毁黑质，使DA减少，发现胸腺萎缩，胸腺细胞自发性增殖反应降低，但体外实验表明，DA对免疫功能无明显影响，从而提出DA对免疫功能的调节作用是通过神经内分泌免疫调节网络，而非DA对免疫细胞的直接作用。本实验观察到，多巴胺受体阻断剂Hal在0.4～1.6mg/kg剂量范围内对体液免疫和细胞免疫几乎无影响，但却可以完全阻断MT免疫增强作用，而MT是神经-内分泌换能器松果腺功能的主要承载者[5]，提示MT免疫调节作用可能受DA调控，而DA的免疫调节作用可能反过来通过松果腺介导的网络来实现。
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参考文献
[1] 杨迎暴，李经才，徐峰.褪黑素对小鼠免疫功能的影响.生理科学研究，1993∶123.
[2] 魏伟，梁君山，陈学广，等.褪黑素及松果腺培养上清对大鼠巨噬细胞产生IL-1的影响.中国药理学通报，1992，8(1)∶66.
[3] 魏伟，梁君山，陈学广，等.褪黑素对淋巴细胞功能的影响.中国药理学通报，1992，8(2)∶123.
[4] 魏伟，梁君山，陈学广，等.大鼠松果腺培养上清对淋巴细胞功能的影响.中国药理学通报，1992，8(2)∶125.
[5] 杨迎暴，李经才，徐峰，等.松果腺切除与褪黑素治疗对小鼠免疫功能昼夜节律的影响.时间医学杂志，1997，2(1)∶19.
, 百拇医药
[6] 施新猷.医学动物实验方法学.北京：人民卫生出版社，1980∶269.
[7] 宫伟，于爱苹，彭凤生，等.T淋巴细胞酶标记染色鉴别法在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979，9(3)∶42.
[8] 徐学瑛，李元，许津.一个改进的体液免疫测定方法溶血素测定法.药学学报，1979，14(7)∶443.
[9] 潘嘉葆，王增，徐德隆.帕金森症患者免疫状态的改变.中华神经精神科杂志，1985，18∶221.
[10] 李康生，余秀葵，杨锦华，等.实验性帕金森氏病免疫功能变化.上海免疫学杂志，1993，13(1)∶13.
收稿日期：1998-06-23, 百拇医药