左归丸对单钠谷氨酸大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响＊
作者：蔡定芳 刘彦芳 陈晓红 李文伟 柏 洁 沈思钰 林锓武 陈锡群 阮晴珉
单位：蔡定芳 刘彦芳 陈晓红 李文伟 柏 洁 沈思钰 林锓武 陈锡群 阮晴珉 (上海医科大学中西医结合研究所 上海 200040)
关键词：左旋谷氨酸单钠；下丘脑-垂体-肾上腺轴；肾阴虚；左归丸
摘 要 目的 观察左归丸对左旋单钠谷氨酸 摘 要 目的 观察左归丸对左旋单钠谷氨酸(monosodium glutamate MSG)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响，探讨肾阴虚与MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴亢进的联系。方法 新生期大鼠出生后的第2、4、6、8、10天皮下注射MSG(4 mg/g/d)，成年后以不同浓度的左归丸灌胃1个月，观察血中CORT，ACTH及下丘脑CRH含量的变化。结果 MSG大鼠血CORT、ACTH和下丘脑CRH含量明显升高(P<0.05)，不同浓度的左归丸灌胃后，能不同程度地减轻HPA轴的功能亢进状态。提示 MSG大鼠所表现的HPA轴功能亢进与肾阴虚有关，左归丸能有效地改善HPA轴的功能亢进。
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我国近40年的中西医结合肾本质研究阐明肾虚证具有不同程度的下丘脑-垂体-肾上腺轴(Hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA)紊乱，补肾参与神经内分泌免疫网络的调节。我们前期研究工作证明温补肾阳能有效改善皮质酮大鼠HPA轴的抑制状态[1]。根据中医学阴阳对立原理，我们推论HPA轴功能亢进可能属于中医肾阴虚范畴。为了论证这一假说，发展和深化肾本质研究，阐明中医肾阴肾阳与现代医学神经内分泌的内在联系，本研究用左旋谷氨酸单钠(monosodium L-glutamate,MSG)造成大鼠HPS轴功能亢进模型，观察阳中求阴代表名方左归丸的调节作用。
材料与方法
1 主要试剂 左旋单钠谷氨酸(monosodium glutamate MSG)购自Sigma公司，使用时以双蒸水溶解，125I-CRH购自Amersham公司，特异性放射比强度74 TBq/mmol，每0.37KBq溶于100μl 0.1%醋酸，-20℃保存，使用时再用测定缓冲液稀释至750 Bq/100μl，兔抗人/鼠CRH抗体购自日本大阪肽研究所，50μl/瓶冻干品，使用时以测定缓冲液稀释，标准人/鼠CRH购自Sigma公司，100μg CRH溶于200 μl 0.1%醋酸，-20℃保存，用时以测定缓冲液稀释至不同浓度。每1000 m CRH测定缓冲液含25 mmol/L磷酸氢二钠/磷酸二氢钠(pH7.4)，15 mmol/L氯化镁，100 mmol/L氯化钠，0.1%*****，0.1%叠氮钠，0.1%明胶。每1000 ml CRH分离液含聚乙二醇(PEG6000)300g，0.2mol/L硼酸pH8.4，牛血清白蛋白5 g。125I-ACTH和125I-CORT放射免疫检测药盒购自美国DPC公司。兔抗鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)抗血清(anti-ACTH)，兔抗鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)抗血清(anti-CRH)购自美国UCB公司；免疫组织化学ABC试剂盒购自Vector公司。
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2 左归丸制备 取《景岳全书》左归丸原方，熟地、淮山药、枸杞子、山茱萸、菟丝子、牛膝、鹿角胶、龟板胶依次按8∶4∶4∶4∶4∶3∶4∶4重量比例称量。10倍体积饮用水煎1小时，滤取上清，如此重复3次。合并3次所得药汁，微火浓缩成100%浓度，冷却后置磁力搅拌器上边搅拌边加入无水乙醇，至乙醇浓度为75%，继续搅拌过夜。2000g离心20min，上清液经100℃电恒温水浴锅蒸发尽酒精，用蒸馏水调节药物浓度至100%，0.1MPa灭菌15 min，4℃保存备用。
3 动物分组 雄性新生大鼠出生后的第2、4、6、8、10天皮下注射MSG，每次4mg/g体重，对照组注射等体积生理盐水。28天后离乳，分笼饲养，光照时间为12h(8∶00～20∶00)，温度(22±1)℃。至第8周时，将大鼠分成5组，即正常对照组、模型组以及三组不同浓度的左归丸(0.05 g/kg,0.5 g/kg，5g/kg)，每组各8只。左归丸组以上述不同浓度的左归丸灌胃，对照组与模型组以等体积的生理盐水灌胃。用药第31天，5组动物均以戊巴比妥钠麻醉，打开胸腔心脏取血。取血清测CORT，以EDTA抗凝血测ACTH，具体方法参见药盒说明。
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4 大鼠下丘脑CRH的放射免疫检测 按文献方法取大鼠下丘脑[2、3]。将得到的下丘脑移至盛有0.1N盐酸∶2N醋酸=1∶1的1 ml溶液的试管中。组织匀浆器4000 g匀浆20s，煮沸加热3min，2000g离心20min，取上清液保存于-20℃待测。将CRH抗血清稀释成1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600，每个浓度加入750 Bq125I-CRH，4℃冰箱平衡24h，30%PEG分离，倾去上清，γ计数仪测cpm。计数不同稀释度抗血清结合标记CRH的百分率(B/T%)，以结合百分率为纵坐标，抗血清的稀释度为横坐标，得CRH抗血清的稀释度曲线。所有玻璃均需硅化。试管内依次加入测定缓冲液100μl，待测样品100μl，1∶400抗CRH血清100μl，125I-CRH100μl，标准CRH用测定缓冲液稀释成10pg/100μl，100pg/100μl，1000pg/100μl，10000pg/100μl，代替代测样品作为标准曲线，震荡混匀器混匀30s，置4℃冰箱孵育24h，每管加入30%PEG分离液1ml，2000g离心30min，弃上清，γ计数仪测cpm[4]。
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5 下丘脑-垂体-肾上腺轴的形态学观察 将固定12h的垂体、肾上腺、胸腺快速用滤纸吸干，电子天平(LIBROR L-160D)型称重。然后与下丘脑一起，室温下50～100%酒精梯度脱水，氯仿透明，石蜡包埋。下丘脑从视交叉至正中隆起止作冠状切片，全垂体作水平切片，每片均厚10μm，依次分置于10张载玻片上，各组取相同序号片作免疫组织化学染色。CRH抗血清终浓度为1∶1000，ACTH抗血清终浓度为1∶4000，第二抗体为羊抗兔IgG，终浓度为1∶200，DAB显色。肾上腺、胸腺常规切片作苏木素-伊红染色。
结果
1 左归丸对MSG大鼠血CORT、ACTH及下丘脑CRH含量的影响 如附表，MSG大鼠血CORT、ACTH及下丘脑CRH含量明显高于正常组(P<0.05)，提示MSG大鼠HPA轴功能处于亢进状态；左归丸能有效改善MSG大鼠的HPA亢进状态并呈现一定的剂量依赖性(P<0.05)。
, 百拇医药 附表 左归丸对MSG大鼠CORT、ACTH、CRH含量的影响
组 别
动物数
CORT(ng/ml)
ACTH(pg/ml)
CRH(ng/下丘脑)
对照组
8
375±26
52.8±11.8
2.35±0.85
模型组
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8
535±94#
91.0±19.7#
4.27±1.36#
左归丸(0.05g/kg)
8
496±72
73.3±12.1
3.22±1.12
左归丸(0.05g/kg)
8
, http://www.100md.com
407±31*
58.3±14.0*
2.50±0.54*
左归丸(5g/kg)
8
360±21*
49.3±10.9*
2.41±0.43*
注：与对照组比较：# P<0.05；与模型组比较：*P<0.05。
2 左归丸对MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴形态学影响 MSG-大鼠下丘脑室旁核(paraventricular,PVN)CRH神经元、正中隆起(median eminence,ME)CRH神经纤维免疫组化染色变深，数目增多；垂体前叶ACTH分泌细胞免疫组化染色变深，细胞数目增多；肾上腺HE染色示髓质层明显缩小，皮质层与髓质层之比增加，皮质束状带细胞数量增多，细胞绝对体积无明显变化，核有所缩小，核内染色质疏松淡染，胞浆相对增加(核/质比缩小)，血窦明显扩张充血。提示MSG大鼠HPA轴处于亢进状态。给予左归丸后，PVN的CRH神经元、ME的CRH神经纤维、垂体前叶ACTH分泌细胞免疫组化染色变浅，数目减少；垂体HE染色切片上与免疫组化切片ACTH着色区相同区域的细胞数目明显减少，胞浆有所增加。肾上腺HE染色切片上髓质层厚度增加，皮质束状带细胞数量减少，核染色有所加深，核/质比增加，血窦扩张充血明显减轻。提示MSG大鼠HPA轴亢进状态得到改善(见附图)。
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图1 左归丸对MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴形态学的影响
A：MSG，B：左归丸；PVN(paraventricular nucleus)：室旁核；
ME(median eminence):正中隆起；pit(pituitaru)：垂体；adrenal：肾上腺
讨论
神经内分泌免疫网络的研究表明，下丘脑是机体重要的整合中枢，参与神经内分泌免疫系统的调节。MSG是一种神经毒素，能选择性地破坏新生期大鼠、小鼠等动物下丘脑弓状核，继而使弓状核与HPA轴的功能联系出现病理生理学改变，导致HPA轴系统的紊乱。1988年Dolniko MS等首先报道大鼠注射谷氨酸单钠成年后肾上腺体积缩小，但束状带细胞核体积增大，细胞呈广泛空泡化伴血窦扩张充血，束状带与球状带宽度之比也相对增加，束状带细胞功能活跃；血浆CORT基础水平升高，应激后绝对值较正常组高，提示HPA轴功能则处于亢进状态，还有报道MSG大鼠血浆CORT基础水平在上午10时升高，而在下午4时则正常，表现为血浆CORT维持在高水平的日分泌节律异常；MSG大鼠对地塞米松的反馈抑制反应减弱，血浆皮质酮结合球蛋白(CBG)升高，ACTH对醚的应激反应增强，提示HPA轴在垂体水平的亢进[5、6、7]。本文研究结果提示，MSG大鼠血中CORT、ACTH、下丘脑CRH明显增高，与对照组比较P<0.05；下丘脑PVN小细胞区CRH免疫组化反应阳性细胞及正中隆起CRH免疫反应阳性纤维及垂体前叶ACTH分泌细胞较对照组明显增深增多，支持MSG大鼠HPA轴功能亢进的观点。MSG大鼠ARC破坏后导致HPA轴功能亢进的可能机理为ARC投射到PVN的抑制性纤维消失：(1)ARC投射纤维到PVN，对PVN分泌CRH的小细胞神经元起抑制作用[8]；(2)MSG大鼠PVN的神经肽Y(NP-Y)免疫组化染色为强阳性，正常大鼠为阳性，而NPY能促进CRH细胞分泌与合成CRH，使CRH纤维数目增多[9]。
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左归丸是中医滋补肾阴的代表名方，为明代医家张景岳创制，临床广泛用于肾阴不足引起的神经内分泌免疫功能紊乱的多种病证。我们以往的工作表明，肾阳虚表现为下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能低下[1]，而MSG大鼠的HPA轴则处于功能亢进状态[10]。根据中医阴阳学说推断，HPA轴功能亢进可能与肾阴虚相关，因此我们选用阳中求阴代表名方左归丸对MSG大鼠进行调节治疗。结果表明，左归丸能有效参与MSG大鼠HPA轴的调节：降低MSG大鼠血中CORT与ACTH及下丘脑CRH的含量，与MSG组比较P<0.05；下丘脑PVN小细胞区CRH免疫组化阳性细胞及正中隆起CRH免疫组化阳性纤维及垂体前叶ACTH分泌细胞较MSG组明显减弱减少，支持HPA亢进与肾阴虚证相关的假说。
*国家自然科学基金(NO.39370863)，卫生部科学研究基金(NO.94-1-186)及上海市卫生系统百人计划资助课题
参考文献
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[4] 蔡定芳，沈自尹，陈晓红，等.乌头碱对大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素含量的影响.中国中西医结合杂志 1996；(16)9：544～546
[5] Dolnikoff MS,Kater CE,Egami M,Andrade LS,et al.Neonatal Treatment with Monosodium Glutamate Increase Plasma Corticosterone on the Rat.Neuroendocrinology.1988;48:645～649
[6] Larsen PJ,Mlkkelsen JD,Jessop D,et al.Neonatal monosodium glutamate treatment alters both the activity and the sensitivity of the rat hypothalamo-pituitary-adrenocortical axis.Journal of Endocrinology,1994;14IL:497～503
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[10] 蔡定芳，陈晓红，刘彦芳，等.新生期大鼠注射谷氨酸单钠毁损弓状核对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴的影响.中国病理生理学杂志 1998；(14)3, 百拇医药
单位：蔡定芳 刘彦芳 陈晓红 李文伟 柏 洁 沈思钰 林锓武 陈锡群 阮晴珉 (上海医科大学中西医结合研究所 上海 200040)
关键词：左旋谷氨酸单钠；下丘脑-垂体-肾上腺轴；肾阴虚；左归丸
摘 要 目的 观察左归丸对左旋单钠谷氨酸 摘 要 目的 观察左归丸对左旋单钠谷氨酸(monosodium glutamate MSG)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响，探讨肾阴虚与MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴亢进的联系。方法 新生期大鼠出生后的第2、4、6、8、10天皮下注射MSG(4 mg/g/d)，成年后以不同浓度的左归丸灌胃1个月，观察血中CORT，ACTH及下丘脑CRH含量的变化。结果 MSG大鼠血CORT、ACTH和下丘脑CRH含量明显升高(P<0.05)，不同浓度的左归丸灌胃后，能不同程度地减轻HPA轴的功能亢进状态。提示 MSG大鼠所表现的HPA轴功能亢进与肾阴虚有关，左归丸能有效地改善HPA轴的功能亢进。
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我国近40年的中西医结合肾本质研究阐明肾虚证具有不同程度的下丘脑-垂体-肾上腺轴(Hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA)紊乱，补肾参与神经内分泌免疫网络的调节。我们前期研究工作证明温补肾阳能有效改善皮质酮大鼠HPA轴的抑制状态[1]。根据中医学阴阳对立原理，我们推论HPA轴功能亢进可能属于中医肾阴虚范畴。为了论证这一假说，发展和深化肾本质研究，阐明中医肾阴肾阳与现代医学神经内分泌的内在联系，本研究用左旋谷氨酸单钠(monosodium L-glutamate,MSG)造成大鼠HPS轴功能亢进模型，观察阳中求阴代表名方左归丸的调节作用。
材料与方法
1 主要试剂 左旋单钠谷氨酸(monosodium glutamate MSG)购自Sigma公司，使用时以双蒸水溶解，125I-CRH购自Amersham公司，特异性放射比强度74 TBq/mmol，每0.37KBq溶于100μl 0.1%醋酸，-20℃保存，使用时再用测定缓冲液稀释至750 Bq/100μl，兔抗人/鼠CRH抗体购自日本大阪肽研究所，50μl/瓶冻干品，使用时以测定缓冲液稀释，标准人/鼠CRH购自Sigma公司，100μg CRH溶于200 μl 0.1%醋酸，-20℃保存，用时以测定缓冲液稀释至不同浓度。每1000 m CRH测定缓冲液含25 mmol/L磷酸氢二钠/磷酸二氢钠(pH7.4)，15 mmol/L氯化镁，100 mmol/L氯化钠，0.1%*****，0.1%叠氮钠，0.1%明胶。每1000 ml CRH分离液含聚乙二醇(PEG6000)300g，0.2mol/L硼酸pH8.4，牛血清白蛋白5 g。125I-ACTH和125I-CORT放射免疫检测药盒购自美国DPC公司。兔抗鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)抗血清(anti-ACTH)，兔抗鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)抗血清(anti-CRH)购自美国UCB公司；免疫组织化学ABC试剂盒购自Vector公司。
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2 左归丸制备 取《景岳全书》左归丸原方，熟地、淮山药、枸杞子、山茱萸、菟丝子、牛膝、鹿角胶、龟板胶依次按8∶4∶4∶4∶4∶3∶4∶4重量比例称量。10倍体积饮用水煎1小时，滤取上清，如此重复3次。合并3次所得药汁，微火浓缩成100%浓度，冷却后置磁力搅拌器上边搅拌边加入无水乙醇，至乙醇浓度为75%，继续搅拌过夜。2000g离心20min，上清液经100℃电恒温水浴锅蒸发尽酒精，用蒸馏水调节药物浓度至100%，0.1MPa灭菌15 min，4℃保存备用。
3 动物分组 雄性新生大鼠出生后的第2、4、6、8、10天皮下注射MSG，每次4mg/g体重，对照组注射等体积生理盐水。28天后离乳，分笼饲养，光照时间为12h(8∶00～20∶00)，温度(22±1)℃。至第8周时，将大鼠分成5组，即正常对照组、模型组以及三组不同浓度的左归丸(0.05 g/kg,0.5 g/kg，5g/kg)，每组各8只。左归丸组以上述不同浓度的左归丸灌胃，对照组与模型组以等体积的生理盐水灌胃。用药第31天，5组动物均以戊巴比妥钠麻醉，打开胸腔心脏取血。取血清测CORT，以EDTA抗凝血测ACTH，具体方法参见药盒说明。
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4 大鼠下丘脑CRH的放射免疫检测 按文献方法取大鼠下丘脑[2、3]。将得到的下丘脑移至盛有0.1N盐酸∶2N醋酸=1∶1的1 ml溶液的试管中。组织匀浆器4000 g匀浆20s，煮沸加热3min，2000g离心20min，取上清液保存于-20℃待测。将CRH抗血清稀释成1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1600，每个浓度加入750 Bq125I-CRH，4℃冰箱平衡24h，30%PEG分离，倾去上清，γ计数仪测cpm。计数不同稀释度抗血清结合标记CRH的百分率(B/T%)，以结合百分率为纵坐标，抗血清的稀释度为横坐标，得CRH抗血清的稀释度曲线。所有玻璃均需硅化。试管内依次加入测定缓冲液100μl，待测样品100μl，1∶400抗CRH血清100μl，125I-CRH100μl，标准CRH用测定缓冲液稀释成10pg/100μl，100pg/100μl，1000pg/100μl，10000pg/100μl，代替代测样品作为标准曲线，震荡混匀器混匀30s，置4℃冰箱孵育24h，每管加入30%PEG分离液1ml，2000g离心30min，弃上清，γ计数仪测cpm[4]。
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5 下丘脑-垂体-肾上腺轴的形态学观察 将固定12h的垂体、肾上腺、胸腺快速用滤纸吸干，电子天平(LIBROR L-160D)型称重。然后与下丘脑一起，室温下50～100%酒精梯度脱水，氯仿透明，石蜡包埋。下丘脑从视交叉至正中隆起止作冠状切片，全垂体作水平切片，每片均厚10μm，依次分置于10张载玻片上，各组取相同序号片作免疫组织化学染色。CRH抗血清终浓度为1∶1000，ACTH抗血清终浓度为1∶4000，第二抗体为羊抗兔IgG，终浓度为1∶200，DAB显色。肾上腺、胸腺常规切片作苏木素-伊红染色。
结果
1 左归丸对MSG大鼠血CORT、ACTH及下丘脑CRH含量的影响 如附表，MSG大鼠血CORT、ACTH及下丘脑CRH含量明显高于正常组(P<0.05)，提示MSG大鼠HPA轴功能处于亢进状态；左归丸能有效改善MSG大鼠的HPA亢进状态并呈现一定的剂量依赖性(P<0.05)。
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组 别
动物数
CORT(ng/ml)
ACTH(pg/ml)
CRH(ng/下丘脑)
对照组
8
375±26
52.8±11.8
2.35±0.85
模型组
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8
535±94#
91.0±19.7#
4.27±1.36#
左归丸(0.05g/kg)
8
496±72
73.3±12.1
3.22±1.12
左归丸(0.05g/kg)
8
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407±31*
58.3±14.0*
2.50±0.54*
左归丸(5g/kg)
8
360±21*
49.3±10.9*
2.41±0.43*
注：与对照组比较：# P<0.05；与模型组比较：*P<0.05。
2 左归丸对MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴形态学影响 MSG-大鼠下丘脑室旁核(paraventricular,PVN)CRH神经元、正中隆起(median eminence,ME)CRH神经纤维免疫组化染色变深，数目增多；垂体前叶ACTH分泌细胞免疫组化染色变深，细胞数目增多；肾上腺HE染色示髓质层明显缩小，皮质层与髓质层之比增加，皮质束状带细胞数量增多，细胞绝对体积无明显变化，核有所缩小，核内染色质疏松淡染，胞浆相对增加(核/质比缩小)，血窦明显扩张充血。提示MSG大鼠HPA轴处于亢进状态。给予左归丸后，PVN的CRH神经元、ME的CRH神经纤维、垂体前叶ACTH分泌细胞免疫组化染色变浅，数目减少；垂体HE染色切片上与免疫组化切片ACTH着色区相同区域的细胞数目明显减少，胞浆有所增加。肾上腺HE染色切片上髓质层厚度增加，皮质束状带细胞数量减少，核染色有所加深，核/质比增加，血窦扩张充血明显减轻。提示MSG大鼠HPA轴亢进状态得到改善(见附图)。
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图1 左归丸对MSG大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴形态学的影响
A：MSG，B：左归丸；PVN(paraventricular nucleus)：室旁核；
ME(median eminence):正中隆起；pit(pituitaru)：垂体；adrenal：肾上腺
讨论
神经内分泌免疫网络的研究表明，下丘脑是机体重要的整合中枢，参与神经内分泌免疫系统的调节。MSG是一种神经毒素，能选择性地破坏新生期大鼠、小鼠等动物下丘脑弓状核，继而使弓状核与HPA轴的功能联系出现病理生理学改变，导致HPA轴系统的紊乱。1988年Dolniko MS等首先报道大鼠注射谷氨酸单钠成年后肾上腺体积缩小，但束状带细胞核体积增大，细胞呈广泛空泡化伴血窦扩张充血，束状带与球状带宽度之比也相对增加，束状带细胞功能活跃；血浆CORT基础水平升高，应激后绝对值较正常组高，提示HPA轴功能则处于亢进状态，还有报道MSG大鼠血浆CORT基础水平在上午10时升高，而在下午4时则正常，表现为血浆CORT维持在高水平的日分泌节律异常；MSG大鼠对地塞米松的反馈抑制反应减弱，血浆皮质酮结合球蛋白(CBG)升高，ACTH对醚的应激反应增强，提示HPA轴在垂体水平的亢进[5、6、7]。本文研究结果提示，MSG大鼠血中CORT、ACTH、下丘脑CRH明显增高，与对照组比较P<0.05；下丘脑PVN小细胞区CRH免疫组化反应阳性细胞及正中隆起CRH免疫反应阳性纤维及垂体前叶ACTH分泌细胞较对照组明显增深增多，支持MSG大鼠HPA轴功能亢进的观点。MSG大鼠ARC破坏后导致HPA轴功能亢进的可能机理为ARC投射到PVN的抑制性纤维消失：(1)ARC投射纤维到PVN，对PVN分泌CRH的小细胞神经元起抑制作用[8]；(2)MSG大鼠PVN的神经肽Y(NP-Y)免疫组化染色为强阳性，正常大鼠为阳性，而NPY能促进CRH细胞分泌与合成CRH，使CRH纤维数目增多[9]。
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左归丸是中医滋补肾阴的代表名方，为明代医家张景岳创制，临床广泛用于肾阴不足引起的神经内分泌免疫功能紊乱的多种病证。我们以往的工作表明，肾阳虚表现为下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能低下[1]，而MSG大鼠的HPA轴则处于功能亢进状态[10]。根据中医阴阳学说推断，HPA轴功能亢进可能与肾阴虚相关，因此我们选用阳中求阴代表名方左归丸对MSG大鼠进行调节治疗。结果表明，左归丸能有效参与MSG大鼠HPA轴的调节：降低MSG大鼠血中CORT与ACTH及下丘脑CRH的含量，与MSG组比较P<0.05；下丘脑PVN小细胞区CRH免疫组化阳性细胞及正中隆起CRH免疫组化阳性纤维及垂体前叶ACTH分泌细胞较MSG组明显减弱减少，支持HPA亢进与肾阴虚证相关的假说。
*国家自然科学基金(NO.39370863)，卫生部科学研究基金(NO.94-1-186)及上海市卫生系统百人计划资助课题
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