p21 ras和CD44在非小细胞肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系
作者：邓群益 武培敬 陈海霞 张怀岭
单位：邓群益 张怀岭(山东省单县中心医院呼吸内科 274300)；武培敬 陈海霞(山东省单县中心医院病理科 274300)
关键词：肺肿瘤；癌基因蛋白质p21；(ras)；CD44；转移灶；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志990344分类号 R734.2 R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)03-0277-01
ras癌基因和CD44基因异常表达与非小细胞肺癌的发生及转移行为有关。作者应用免疫组化S-P法检测非小细胞肺癌中p21 ras和CD44的表达情况，并探讨它们表达的相关性及其与淋巴结转移的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 标本 66例非小细胞肺癌原发灶及其20例转移性淋巴结标本均为我院近10年存档蜡块。其中鳞癌30例，腺癌30例，大细胞癌6例。转移性淋巴结标本20例(鳞癌10例，腺癌10例)。所有标本均4 μm厚切片2张备用。
1.2 方法 免疫组化采用S-P法。p21 ras和针对CD44各种变异体的单抗CD44H及S-P试剂盒(美国Maxim公司产品)均购自福州迈新公司。阴性对照由PBS代替一抗，由已证实阳性片作阳性对照。
1.3 结果判断 p21 ras和CD44染色结果判断标准：(1)无癌细胞着色或着色的癌细胞数<10%为阴性(-)；(2)着色的癌细胞数10%～50%为阳性(+)；(3)着色的癌细胞数>50%为强阳性(
)。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用χ2检验。
2 结果
2.1 p21 ras和CD44在非小细胞肺癌原发灶中的表达 见表1。
表1 p21 ras和CD44在非小细胞肺癌原发灶中的表达 分组
n
p21 ras+、CD+44
p21 ras+、CD-44
p21 ras-、CD+44
, 百拇医药
p21 ras-、CD-44
鳞癌
30
19(63.3)
5(16.7)
2(6.7)
4(13.3)
腺癌
30
17(56.7)
6(20)
3(10)
, 百拇医药
4(13.3)
大细胞癌
6
5(83.3)
0
1(16.7)
0
淋巴结状态
有转移
26
21(80.8)
3(11.5)
2(7.7)
, 百拇医药
0
无转移
40
20(50)
8(20)
4(10)
8(20)
p21 ras阳性着色部位在细胞浆，阳性细胞内呈弥漫 性细颗粒状。CD44阳性着色定位于细胞膜，阳性细胞膜呈棕色。66例非小细胞肺癌原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为78.8%和71.2%。p21 ras和CD44在鳞癌和腺癌中的阳性率无显著性差异。6例大细胞癌中p21 ras阳性5例，CD44阳性6例。
, 百拇医药
2.2 p21 ras和CD44表达与淋巴结转移的关系 见表1。20例转移性淋巴结标本中，p21 ras和CD44阳性率分别为90%和85%，均高于原发灶。66例非小细胞肺癌中有淋巴结转移者26例(鳞癌10例，腺癌10例，大细胞癌6例)。其原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为92.3%和88.5%。无淋巴结转移者，其原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为70%和60%，均低于有淋巴结转移者。两组相比，差异均有显著性(P<0.05)。
2.3 p21 ras和CD44表达的相关性 66例非小细胞肺癌原发灶中，p21 ras阳性52例，其中CD44阳性41例，阴性11例；p21 ras阴性14例，其中CD44阳性6例，阴性8例。相关性检验显示p21 ras阳性组和CD44阳性组间有非常显著相关性(P<0.01)。3 讨论
, 百拇医药
研究表明ras基因产物p21蛋白的过度表达可能与肺癌的致癌机制有关。由于p21的过量生成
，持续地将生长信号传入细胞内，从而导致细胞转化及恶变。Hofmann等〔1〕用激活的ras基因在克隆鼠胚胎成纤维细胞中诱导出CD44表达，不但CD44vs转录水平增加，而且CD44vs的转录与合成水平亦增加，CD44v的表达与细胞的转移行为有关。
本实验结果表明：非小细胞肺癌p21 ras和CD44阳性表达间有非常显著的相关性(P<0.01)。激活的ras基因可能通过增强CD44启动子活性而使CD44表达增加。在转移性淋巴结标本中，p21 ras和CD44阳性率高于原发灶。伴有淋巴结转移的原发灶p21 ras和CD44阳性率高于无淋巴结转移者，说明p21 ras和CD44的表达与淋巴结转移有关。
, http://www.100md.com
CD44是一种多形性细胞表面糖蛋白，与肿瘤的生长和转移行为有关。其机制可能与便于肿瘤细胞克隆形成，促进生长因子和血管形成因子的产生及便于与基质中的生长因子结合有关。抑制内源性细胞表面CD44功能可导致癌细胞凋亡〔2〕。另外，CD44分子与其它配体的结合亦可能与肿瘤转移行为有关。对于浸润相关基因来讲，ras基因作用似多效性控制蛋白，可以诱导胶原酶Ⅰ和Ⅳ，基质溶解酶，组织蛋白酶和CD44表达，使肿瘤细胞具有浸润转移能力〔1〕。
参考文献
1，Hofmann M, Rudy W, Gunthert U et al. A link between ras and metastatic behavior of tumor cells; ras induces CD44 promoter activity and leads to low-leves expression of metastasis-specific variants of CD44 in CREF cells. Cancer Res,1993;53:1516～1521
2，Yu Q, Toole BP, Stamenkovic I. Induction of apoptosis of metastatic mammary carcinoma cells in vivo by disruption of tumor cell surface CD44 function.J Exp Med,1997;186:1985～1996
收稿日期：1998-08-20, 百拇医药
单位：邓群益 张怀岭(山东省单县中心医院呼吸内科 274300)；武培敬 陈海霞(山东省单县中心医院病理科 274300)
关键词：肺肿瘤；癌基因蛋白质p21；(ras)；CD44；转移灶；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志990344分类号 R734.2 R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)03-0277-01
ras癌基因和CD44基因异常表达与非小细胞肺癌的发生及转移行为有关。作者应用免疫组化S-P法检测非小细胞肺癌中p21 ras和CD44的表达情况，并探讨它们表达的相关性及其与淋巴结转移的关系。
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1 材料和方法
1.1 标本 66例非小细胞肺癌原发灶及其20例转移性淋巴结标本均为我院近10年存档蜡块。其中鳞癌30例，腺癌30例，大细胞癌6例。转移性淋巴结标本20例(鳞癌10例，腺癌10例)。所有标本均4 μm厚切片2张备用。
1.2 方法 免疫组化采用S-P法。p21 ras和针对CD44各种变异体的单抗CD44H及S-P试剂盒(美国Maxim公司产品)均购自福州迈新公司。阴性对照由PBS代替一抗，由已证实阳性片作阳性对照。
1.3 结果判断 p21 ras和CD44染色结果判断标准：(1)无癌细胞着色或着色的癌细胞数<10%为阴性(-)；(2)着色的癌细胞数10%～50%为阳性(+)；(3)着色的癌细胞数>50%为强阳性(
)。, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用χ2检验。
2 结果
2.1 p21 ras和CD44在非小细胞肺癌原发灶中的表达 见表1。
表1 p21 ras和CD44在非小细胞肺癌原发灶中的表达 分组
n
p21 ras+、CD+44
p21 ras+、CD-44
p21 ras-、CD+44
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p21 ras-、CD-44
鳞癌
30
19(63.3)
5(16.7)
2(6.7)
4(13.3)
腺癌
30
17(56.7)
6(20)
3(10)
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4(13.3)
大细胞癌
6
5(83.3)
0
1(16.7)
0
淋巴结状态
有转移
26
21(80.8)
3(11.5)
2(7.7)
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0
无转移
40
20(50)
8(20)
4(10)
8(20)
p21 ras阳性着色部位在细胞浆，阳性细胞内呈弥漫 性细颗粒状。CD44阳性着色定位于细胞膜，阳性细胞膜呈棕色。66例非小细胞肺癌原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为78.8%和71.2%。p21 ras和CD44在鳞癌和腺癌中的阳性率无显著性差异。6例大细胞癌中p21 ras阳性5例，CD44阳性6例。
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2.2 p21 ras和CD44表达与淋巴结转移的关系 见表1。20例转移性淋巴结标本中，p21 ras和CD44阳性率分别为90%和85%，均高于原发灶。66例非小细胞肺癌中有淋巴结转移者26例(鳞癌10例，腺癌10例，大细胞癌6例)。其原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为92.3%和88.5%。无淋巴结转移者，其原发灶p21 ras和CD44阳性率分别为70%和60%，均低于有淋巴结转移者。两组相比，差异均有显著性(P<0.05)。
2.3 p21 ras和CD44表达的相关性 66例非小细胞肺癌原发灶中，p21 ras阳性52例，其中CD44阳性41例，阴性11例；p21 ras阴性14例，其中CD44阳性6例，阴性8例。相关性检验显示p21 ras阳性组和CD44阳性组间有非常显著相关性(P<0.01)。3 讨论
, 百拇医药
研究表明ras基因产物p21蛋白的过度表达可能与肺癌的致癌机制有关。由于p21的过量生成
，持续地将生长信号传入细胞内，从而导致细胞转化及恶变。Hofmann等〔1〕用激活的ras基因在克隆鼠胚胎成纤维细胞中诱导出CD44表达，不但CD44vs转录水平增加，而且CD44vs的转录与合成水平亦增加，CD44v的表达与细胞的转移行为有关。
本实验结果表明：非小细胞肺癌p21 ras和CD44阳性表达间有非常显著的相关性(P<0.01)。激活的ras基因可能通过增强CD44启动子活性而使CD44表达增加。在转移性淋巴结标本中，p21 ras和CD44阳性率高于原发灶。伴有淋巴结转移的原发灶p21 ras和CD44阳性率高于无淋巴结转移者，说明p21 ras和CD44的表达与淋巴结转移有关。
, http://www.100md.com
CD44是一种多形性细胞表面糖蛋白，与肿瘤的生长和转移行为有关。其机制可能与便于肿瘤细胞克隆形成，促进生长因子和血管形成因子的产生及便于与基质中的生长因子结合有关。抑制内源性细胞表面CD44功能可导致癌细胞凋亡〔2〕。另外，CD44分子与其它配体的结合亦可能与肿瘤转移行为有关。对于浸润相关基因来讲，ras基因作用似多效性控制蛋白，可以诱导胶原酶Ⅰ和Ⅳ，基质溶解酶，组织蛋白酶和CD44表达，使肿瘤细胞具有浸润转移能力〔1〕。
参考文献
1，Hofmann M, Rudy W, Gunthert U et al. A link between ras and metastatic behavior of tumor cells; ras induces CD44 promoter activity and leads to low-leves expression of metastasis-specific variants of CD44 in CREF cells. Cancer Res,1993;53:1516～1521
2，Yu Q, Toole BP, Stamenkovic I. Induction of apoptosis of metastatic mammary carcinoma cells in vivo by disruption of tumor cell surface CD44 function.J Exp Med,1997;186:1985～1996
收稿日期：1998-08-20, 百拇医药