血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白及层粘蛋白对肝纤维化的诊断价值
作者：王 进 张国元 熊良仕 唐 中 何 兰 周祖寅
单位：四川省南充川北医学院附属医院 (637000)
关键词：透明质酸；Ⅲ型前胶原；Ⅳ型胶原；纤维连接蛋白；层粘蛋白；肝纤维化
重庆医学CHONGQING MEDICAL JOURNAL1999年 第28卷 第3期 Vol摘 要 目的 探讨多项血清指标联合检测对诊断肝纤维化的价值。方法 用放免法和速率散射比浊法测定26例正常人和73例急、慢性肝病患者的血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘蛋白(LN)。结果HA、PCⅢ、Ⅳ-C随肝纤维化程度而增高(P<0.01～0.05)，慢活肝、肝硬化均较正常组和慢纤肝显著增高(P<0.01～0.05)，HA、PCⅢ在急性肝炎是即有升高，LN在急肝、慢肝、肝硬化均高于正常组(P<0.01)，FN则低于正常组(P<0.01)。5项指标的变化均与γ球蛋白、A/G显著相关(P<0.01～0.05)。结论 测定血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN和FN水平和肝纤维化有较大诊断价值，HA和PCⅢ最敏感。
, 百拇医药
Diagnostic Value of Serum hyaluronic Acid,Procollagen type Ⅲ,Collagen type Ⅳ，Fibronectin and Laminin Levels for Liver Fibrosis
Wang Jin,Zhang Guoyuan,Xiong Liangshi,et al.
Department of Infectious Diseases,the Affiliated Hospital,North Sichuan Medical College,Nanchong 637000
Abstract Aim:To investigate the diagnostic value of combined defermination of multide serologic parameters multiple for liver fibrosis.Methods:The serum hyaluronic acid(HA),procollagen type Ⅲ (PCⅢ)，collage type Ⅳ(Ⅳ-C),fibronectin and laminin were determined in 73 cases of acute and chronic liver diseases and 26 normal subjects by means of RIA and rate nephelometry.results Serum HA,PCⅢ and Ⅳ-C increased with the severity of liver fibrosis(P<0.01～0.05),and these in patients with chronic active hepatitis,liver cirrhosis were significantly higher than those in patients with chronic persistent hepatits and normal group(P<0.01～0.05),HA and PCⅢ increased in acute hepatits,LN in patients with acute and chronic hepatits,liver cirrhosis was higher than that in normal group(P<0.01),but FN was lower than that in normal group(P<0.01),The changs of the five components were correlated with γ globulin and A/G.Conclusion To determine serum levels of HA,PCⅢ,Ⅳ-C,LN and FN is 06 diagnostic value for liver fibrosis and HA and PCⅢ is the most sensitive of the five components.
, 百拇医药
Key words:Hyaluronic acid Procollagen type Collagen type Fibronectin Laminin Liver fibrosis
肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的共同途径，为了探讨肝纤维化过程中各种血清学指标的变化情况，以寻找早期诊断的依据，我们对73例急、慢性肝病患者进行了血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘蛋白(LN)的联合检测，同时检测肝功能。
材料与方法
1 检测对象
各种类型肝病73例，均为我院专科门诊和住院病人，男性57例，女性16例，年龄21～68岁，平均36.岁。其中急性肝炎10例，慢性迁延型肝炎20例，慢性活动型肝炎21例，肝硬化22例。临床诊断按1990年全国病毒性肝炎会议制定的诊断分型标准，26例正常对照组为健康献血员。
, 百拇医药
2 方法
空腹采静脉血清，离心后收集血清，置-20℃下保存，统一由专人检测。HA、Ⅳ-C、LN用上海海研医学生物技术中心提供的试剂盒，PCⅢ用重庆市肿瘤研究所中心研究室提供的试剂盒。以上4种检测操作据说明书用放免法测定。羊抗人FN抗血清及FN标准参考血浆均由上海生物制品研究所提供，采用速率散射比浊法测定。
3 检测结果用t检验和相关性分析处理。
结 果
1 各组肝病患者血清5项肝纤指标检测结果见表1。HA、PCⅢ、Ⅳ-C均随慢迁肝、慢活肝、肝硬化的发展而逐步增高。HA、PCⅢ、Ⅳ-C在慢活肝、肝硬化显著高于正常组和慢迁肝组(P<0.01～0.05)，HA和PCⅢ在急性肝炎时已开始升高。FN在急性肝炎、慢迁肝和慢活肝、肝硬化均低于正常组(P<0.01)，以肝硬化时最明显。而LN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝和肝硬化均显著高于正常组(P<0.01)，肝硬化与慢活肝比较有显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
2 5项指标与γ球蛋白、A/G之间作相关性分析有显著的相关性，见表2。同时与肝功能中的ALT、AST、ALP及TB作相关分析，结果无相关性。
讨 论
近年来许多学者进行了研究，其结果均表明HA、PCⅢ、Ⅳ-C的变化水平与肝纤维化的程度成正相关，随急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化的进程而逐次增高[1，2，3]，FN则逐渐降低。我们对73例各种病毒性肝炎和肝硬化进行多种纤维化血清指标检测，结果表明：HA、PCⅢ、LN、FN在急性肝炎时就有变化，前三者随着纤维化的进展而逐渐增高，FN则降低，Ⅳ-C在慢性肝炎后逐次升高，且均与γ球蛋白和A/G的变化相关。
HA是由肝内间质细胞合成，经肝窦内皮细胞降解，其升高反映了肝内间质细胞增生或血流受阻，使肝窦内皮细胞摄取和分解HA减少[4]。曾报道血清HA水平在急性肝损伤时既有增高，随着纤维化的发展而逐渐升高[5]，本文检测结果与之相符，且与γ球蛋白、A/G和其他几项肝纤指标有显著的相关性(与PCⅢ、FN、LN和Ⅳ-C的相关系数分别为0.472、-0.512、0.381和0.374，P<0.01)。PCⅢ为PⅢP的降解物，其升高与肝纤维化有关，与肝组织炎症坏死无关，最反映肝纤维化活动的指标[2，6]。我们的结果在慢迁肝较慢活肝、肝硬化及急性肝炎低，且与ALT和TB变化无关，也支持这一点。PCⅢ同样与γ球蛋白、A/G有较好的相关性。Ⅳ-C、LN和FN均为组成基底膜的成分，在肝纤维化进程中形成“毛细血管化”起重要作用。据报道[1，3]Ⅳ-C和LN在慢性肝病时随着纤维化程度的加重，血清值逐渐升高，可反映肝纤维化程度。本测定结果中Ⅳ-C从慢迁肝、慢活肝、肝硬化依次升高，且组间有显著差异。LN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝显著高于正常组，肝硬化又显著高于前三者。血浆型FN绝大部分由肝细胞合成，肝纤维化时肝组织中细胞型FN含量明显增加，而血浆FN水平则明显降低，反映了肝细胞合成蛋白质功能的减退。我们所测血浆FN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝均较正常组显著降低，肝硬化最明显且与慢活肝间比较有显著差异，FN与γ球蛋白成负相关，与A/G成正相关也说明这点。
, http://www.100md.com
上述五项指标从不同的角度反映肝纤维化的情况，其中HA、PCⅢ最敏感，Ⅳ-C次之，更次为LN和FN。临床工作中在没有肝组织病理结果的情况下，联合检测以上肝纤维化指标并结合病史、蛋白质的变化情况，可有助于提高肝纤维化和早期肝硬化的诊断，故以上五项指标不失为临床上简便而较好的反映肝纤维化的检查。
表1 各型肝病HA、PCⅢ、Ⅳ-C、FN和LN的血清水平(
±s) 组 别
例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
Ⅳ-C(μg/L)
FN(μg/L)
, 百拇医药
LN(μg/L)
正常对照
26
52.52±24.76
64.62±16.8
55.79±18.64
2.96±41
93.27±17.3
急性肝炎
10
107.8±48.38*
104.62±34.28*
, 百拇医药
66.59±24.87
228.39±54.06*
113.94±18.74*
慢迁肝
20
99.66±78.09*
97.91±26.37*
81.02±33.51*
251.99±56.86*
118.77±20.04*
, 百拇医药
慢活肝
21
475.06±322.85▲
133.03±53.06△
107.78±38.12○
223.06±67.04*
117.15±17.67*
肝硬化
22
979.96±633.2#
, http://www.100md.com
173.45±57.04□
130.65±55.01▲
149.11±67.24#
126.7±18.03#
注：*与正常组比较P<0.01，▲与慢迁肝比较P<0.01，△与慢迁肝比较P<0.02，○与慢迁肝比较P<0.05，#与慢活肝比较P<0.01，□与慢活肝比较P<0.05。表2 5项肝纤维化指标与γ球蛋白、A/G的相关性
HA
PCⅢ
Ⅳ-C
, 百拇医药 FN
LN
γ球蛋白
0.597*
0.561*
0.362*
-0.635*
0.149
A/G
-0.426*
-0.339*
, 百拇医药
-0.253**
-0.656*
-0.401*
注：*P<0.01，**P<0.05
参考文献
1 李兵顺,王继,刘金星,等.中华肝脏病杂志,1996,4(3)：173
2 白石山,李秀霞,杨守昌,等.中华肝脏病杂志,1997,5(2)：72
3 刘预,李伟道,林丁,等.中华肝脏病杂志,1997,5(2)：76
4 Guechot J,Loria A,Serfaty L,et al.Serun hyaluronan as a marker of liver fibrosis in chronic viral hepatits C:effect of α-interferon therapy.J Hepatol,1995,22:22
5 陈岳祥,等.国外医学消化系疾病分册,1995,15(4)：200
6 李伟道,欧晓娟,叶红军,等.中华消化杂志,1995,15(4)：238
, 百拇医药
单位：四川省南充川北医学院附属医院 (637000)
关键词：透明质酸；Ⅲ型前胶原；Ⅳ型胶原；纤维连接蛋白；层粘蛋白；肝纤维化
重庆医学CHONGQING MEDICAL JOURNAL1999年 第28卷 第3期 Vol摘 要 目的 探讨多项血清指标联合检测对诊断肝纤维化的价值。方法 用放免法和速率散射比浊法测定26例正常人和73例急、慢性肝病患者的血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘蛋白(LN)。结果HA、PCⅢ、Ⅳ-C随肝纤维化程度而增高(P<0.01～0.05)，慢活肝、肝硬化均较正常组和慢纤肝显著增高(P<0.01～0.05)，HA、PCⅢ在急性肝炎是即有升高，LN在急肝、慢肝、肝硬化均高于正常组(P<0.01)，FN则低于正常组(P<0.01)。5项指标的变化均与γ球蛋白、A/G显著相关(P<0.01～0.05)。结论 测定血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN和FN水平和肝纤维化有较大诊断价值，HA和PCⅢ最敏感。
, 百拇医药
Diagnostic Value of Serum hyaluronic Acid,Procollagen type Ⅲ,Collagen type Ⅳ，Fibronectin and Laminin Levels for Liver Fibrosis
Wang Jin,Zhang Guoyuan,Xiong Liangshi,et al.
Department of Infectious Diseases,the Affiliated Hospital,North Sichuan Medical College,Nanchong 637000
Abstract Aim:To investigate the diagnostic value of combined defermination of multide serologic parameters multiple for liver fibrosis.Methods:The serum hyaluronic acid(HA),procollagen type Ⅲ (PCⅢ)，collage type Ⅳ(Ⅳ-C),fibronectin and laminin were determined in 73 cases of acute and chronic liver diseases and 26 normal subjects by means of RIA and rate nephelometry.results Serum HA,PCⅢ and Ⅳ-C increased with the severity of liver fibrosis(P<0.01～0.05),and these in patients with chronic active hepatitis,liver cirrhosis were significantly higher than those in patients with chronic persistent hepatits and normal group(P<0.01～0.05),HA and PCⅢ increased in acute hepatits,LN in patients with acute and chronic hepatits,liver cirrhosis was higher than that in normal group(P<0.01),but FN was lower than that in normal group(P<0.01),The changs of the five components were correlated with γ globulin and A/G.Conclusion To determine serum levels of HA,PCⅢ,Ⅳ-C,LN and FN is 06 diagnostic value for liver fibrosis and HA and PCⅢ is the most sensitive of the five components.
, 百拇医药
Key words:Hyaluronic acid Procollagen type Collagen type Fibronectin Laminin Liver fibrosis
肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的共同途径，为了探讨肝纤维化过程中各种血清学指标的变化情况，以寻找早期诊断的依据，我们对73例急、慢性肝病患者进行了血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘蛋白(LN)的联合检测，同时检测肝功能。
材料与方法
1 检测对象
各种类型肝病73例，均为我院专科门诊和住院病人，男性57例，女性16例，年龄21～68岁，平均36.岁。其中急性肝炎10例，慢性迁延型肝炎20例，慢性活动型肝炎21例，肝硬化22例。临床诊断按1990年全国病毒性肝炎会议制定的诊断分型标准，26例正常对照组为健康献血员。
, 百拇医药
2 方法
空腹采静脉血清，离心后收集血清，置-20℃下保存，统一由专人检测。HA、Ⅳ-C、LN用上海海研医学生物技术中心提供的试剂盒，PCⅢ用重庆市肿瘤研究所中心研究室提供的试剂盒。以上4种检测操作据说明书用放免法测定。羊抗人FN抗血清及FN标准参考血浆均由上海生物制品研究所提供，采用速率散射比浊法测定。
3 检测结果用t检验和相关性分析处理。
结 果
1 各组肝病患者血清5项肝纤指标检测结果见表1。HA、PCⅢ、Ⅳ-C均随慢迁肝、慢活肝、肝硬化的发展而逐步增高。HA、PCⅢ、Ⅳ-C在慢活肝、肝硬化显著高于正常组和慢迁肝组(P<0.01～0.05)，HA和PCⅢ在急性肝炎时已开始升高。FN在急性肝炎、慢迁肝和慢活肝、肝硬化均低于正常组(P<0.01)，以肝硬化时最明显。而LN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝和肝硬化均显著高于正常组(P<0.01)，肝硬化与慢活肝比较有显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
2 5项指标与γ球蛋白、A/G之间作相关性分析有显著的相关性，见表2。同时与肝功能中的ALT、AST、ALP及TB作相关分析，结果无相关性。
讨 论
近年来许多学者进行了研究，其结果均表明HA、PCⅢ、Ⅳ-C的变化水平与肝纤维化的程度成正相关，随急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化的进程而逐次增高[1，2，3]，FN则逐渐降低。我们对73例各种病毒性肝炎和肝硬化进行多种纤维化血清指标检测，结果表明：HA、PCⅢ、LN、FN在急性肝炎时就有变化，前三者随着纤维化的进展而逐渐增高，FN则降低，Ⅳ-C在慢性肝炎后逐次升高，且均与γ球蛋白和A/G的变化相关。
HA是由肝内间质细胞合成，经肝窦内皮细胞降解，其升高反映了肝内间质细胞增生或血流受阻，使肝窦内皮细胞摄取和分解HA减少[4]。曾报道血清HA水平在急性肝损伤时既有增高，随着纤维化的发展而逐渐升高[5]，本文检测结果与之相符，且与γ球蛋白、A/G和其他几项肝纤指标有显著的相关性(与PCⅢ、FN、LN和Ⅳ-C的相关系数分别为0.472、-0.512、0.381和0.374，P<0.01)。PCⅢ为PⅢP的降解物，其升高与肝纤维化有关，与肝组织炎症坏死无关，最反映肝纤维化活动的指标[2，6]。我们的结果在慢迁肝较慢活肝、肝硬化及急性肝炎低，且与ALT和TB变化无关，也支持这一点。PCⅢ同样与γ球蛋白、A/G有较好的相关性。Ⅳ-C、LN和FN均为组成基底膜的成分，在肝纤维化进程中形成“毛细血管化”起重要作用。据报道[1，3]Ⅳ-C和LN在慢性肝病时随着纤维化程度的加重，血清值逐渐升高，可反映肝纤维化程度。本测定结果中Ⅳ-C从慢迁肝、慢活肝、肝硬化依次升高，且组间有显著差异。LN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝显著高于正常组，肝硬化又显著高于前三者。血浆型FN绝大部分由肝细胞合成，肝纤维化时肝组织中细胞型FN含量明显增加，而血浆FN水平则明显降低，反映了肝细胞合成蛋白质功能的减退。我们所测血浆FN在急性肝炎、慢迁肝、慢活肝均较正常组显著降低，肝硬化最明显且与慢活肝间比较有显著差异，FN与γ球蛋白成负相关，与A/G成正相关也说明这点。
, http://www.100md.com
上述五项指标从不同的角度反映肝纤维化的情况，其中HA、PCⅢ最敏感，Ⅳ-C次之，更次为LN和FN。临床工作中在没有肝组织病理结果的情况下，联合检测以上肝纤维化指标并结合病史、蛋白质的变化情况，可有助于提高肝纤维化和早期肝硬化的诊断，故以上五项指标不失为临床上简便而较好的反映肝纤维化的检查。
表1 各型肝病HA、PCⅢ、Ⅳ-C、FN和LN的血清水平(
±s) 组 别例数
HA(μg/L)
PCⅢ(μg/L)
Ⅳ-C(μg/L)
FN(μg/L)
, 百拇医药
LN(μg/L)
正常对照
26
52.52±24.76
64.62±16.8
55.79±18.64
2.96±41
93.27±17.3
急性肝炎
10
107.8±48.38*
104.62±34.28*
, 百拇医药
66.59±24.87
228.39±54.06*
113.94±18.74*
慢迁肝
20
99.66±78.09*
97.91±26.37*
81.02±33.51*
251.99±56.86*
118.77±20.04*
, 百拇医药
慢活肝
21
475.06±322.85▲
133.03±53.06△
107.78±38.12○
223.06±67.04*
117.15±17.67*
肝硬化
22
979.96±633.2#
, http://www.100md.com
173.45±57.04□
130.65±55.01▲
149.11±67.24#
126.7±18.03#
注：*与正常组比较P<0.01，▲与慢迁肝比较P<0.01，△与慢迁肝比较P<0.02，○与慢迁肝比较P<0.05，#与慢活肝比较P<0.01，□与慢活肝比较P<0.05。表2 5项肝纤维化指标与γ球蛋白、A/G的相关性
HA
PCⅢ
Ⅳ-C
, 百拇医药 FN
LN
γ球蛋白
0.597*
0.561*
0.362*
-0.635*
0.149
A/G
-0.426*
-0.339*
, 百拇医药
-0.253**
-0.656*
-0.401*
注：*P<0.01，**P<0.05
参考文献
1 李兵顺,王继,刘金星,等.中华肝脏病杂志,1996,4(3)：173
2 白石山,李秀霞,杨守昌,等.中华肝脏病杂志,1997,5(2)：72
3 刘预,李伟道,林丁,等.中华肝脏病杂志,1997,5(2)：76
4 Guechot J,Loria A,Serfaty L,et al.Serun hyaluronan as a marker of liver fibrosis in chronic viral hepatits C:effect of α-interferon therapy.J Hepatol,1995,22:22
5 陈岳祥,等.国外医学消化系疾病分册,1995,15(4)：200
6 李伟道,欧晓娟,叶红军,等.中华消化杂志,1995,15(4)：238
, 百拇医药