不同地点疟疾媒介对溴氰菊酯敏感性的比较观察
作者：余品红 张华勋 明桂珍 陈红安 徐博钊
单位：余品红 张华勋 明桂珍 徐博钊 湖北省医学科学院(武汉，430079)；陈红安 应城市卫生防疫站
关键词：
中国人兽共患病杂志990334 湖北省从1990年开始先后在疟疾复媒区的15个县(市)，共4.0万km2的范围内开展了溴氰菊酯浸帐灭蚊。为了解蚊虫对溴氰菊酯的敏感性和考核浸帐灭蚊的质量，常需要在现场采集蚊虫进行生物测定。为寻找既适合生测需求，又能反映实际情况的按蚊来源，我们于1996年6月底对应城市人房、牛栏二种按蚊的敏感性进行了比较观察，结果如下。
1 材料与方法
1.1 调查点概况 选择应城市巡检乡为试验地点，该乡为双季稻产区，1991年查出嗜人按蚊，其高峰季节在每年6月底、7月初和9月初。
, 百拇医药
1.2 试验材料
1.2.1 牛栏按蚊 于实验前夜在牛栏用捕蚊管采集饱吸血之按蚊，带回实验室饲养，次日上午胃血消化至谢拉氏Ⅲ～Ⅳ期供测定用。
1.2.2 人房按蚊 于实验当日凌晨用指管在人帐内扣捕饱吸血之按蚊，然后移至蚊笼内集中饲养，当日上午进行测定，此时胃血消化在谢拉氏Ⅲ～Ⅳ期。
1.2.3 蚊虫鉴定 人房、牛栏按蚊分别进行试验，试验完后主要根据成蚊中足基节外侧有无淡色鳞簇和腹侧膜上有无“T”字形暗斑等形态特征鉴定蚊种〔1〕。
1.2.4 测试药帐 为普通棉纱帐，药物为2.5%溴氰菊酯胶悬剂(江门农药厂生产，批号1995.5.5)，用药量为15mg ai/m2，按面积分别量取药物和水，混匀后浸泡帐纱，使药物均匀吸收，恰好湿而不滴，悬挂于室内晾干待用。
, 百拇医药
1.2.5 制备药膜滤纸用98%溴氰菊酯(法国产)，按WHO要求制作，用药量为3.57mg ai/m\+2(0.01%),8.93mg ai/m\+2(0.025%)〔2〕。
1.3 实验方法〔2，3〕
1.3.1 药帐接触法 将直径9cm的椎形生测筒固定在药帐上，吸入10～12只蚊虫，强迫接触3min后移入大口瓶内恢复饲养24h，观察死亡率，不同部位重复6次。同时以未浸药帐纱作对照，实验组死亡率以Abbott公式校正，校正死亡率<90%为抗性群体。
1.3.2 击倒试验 将椎形生测筒固定在药帐上，吸入10～12只蚊虫，记录每只蚊虫被击倒时间，不同部位重复6次，以Finney机率分析法进行对数—机率分析，分析结果进行显著性检验〔4〕。
1.3.3 我国推荐区分剂量法 蚊虫在抗药性接触筒内接触3.57mg ai/m2药膜滤纸30min，恢复饲养24h，观察死亡率，同时设空白对照，实验组死亡率以Abbott公式校正，校正死亡率<80%为抗性群体。
, 百拇医药
1.3.4 WHO推荐区分剂量法 蚊虫在抗药性接触筒内接触8.57mg ai/m2药膜滤纸60min，恢复饲养24h，观察死亡率，设立对照和评判标准同前。
2 结果
2.1 蚊虫组成 实验蚊虫经鉴定为嗜人按蚊和中华按蚊二种，其中人房嗜人按蚊88只，占32.12%，中华按蚊186只，占67.88%；牛栏嗜人按蚊41只，占12.73%，中华按蚊281只，占87.27%。二者嗜人按蚊构成比有非常显著性差异(P<0.005)。
2.2 击倒试验 人房、牛栏媒介按蚊接触15mg ai/m2溴氰菊酯药帐的半数击倒时间(KT50)无显著性差异(P>0.05)，见表1。
表1 人房、牛栏媒介按蚊击倒时间比较
, 百拇医药
Table 1 Comparison on the time for knockdown of vectors in house and
cowshed 地点
place
KT50(min)
95%可信限
95% confident
斜率
slope
χ2(n-2)
人 房
, http://www.100md.com
dwellinghouse
12.84
12.11～13.73
6.20±0.28
2.04
牛 栏
cowshed
12.47
11.81～13.24
6.33±0.78
3.76
2.3 接触试验 人房、牛栏按蚊接触15mg ai/m2溴氰菊酯药帐3min的校正死亡率分别为96.16%和97.14%；接触3.57mg ai/m2药膜滤纸30min的校正死亡率分别为94.40%和90.00%，二者无显著性差异(P>0.05)；接触8.57mg ai/m2药膜滤纸60min，人房、牛栏按蚊均全部死亡。3种不同试验方法蚊虫死亡率见表2。表2 不同实验方法媒介按蚊死亡率比较
, http://www.100md.com
Table 2 Comparison on the mortality of vectors in different methods 方法
method
地点
place
药物浓度
(mg/m2)
drug con-
centration
接触时间
(min)
time for
, 百拇医药
contacted
供虫数
(只)
number of
mosquito
死亡数
(只)
number of
death
校正死亡
率(%)
correct
mortality
, 百拇医药
中国法
Chinese
人房
dwelling
house
3.57
30
80
76
94.44
牛栏
cowshed
3.57
, http://www.100md.com
30
100
92
90.00
WHO法
人房
dwelling
house
8.93
60
76
76
100
, 百拇医药
牛栏
cowshed
8.93
60
100
100
100
药帐法
net treated
wit drug
人房
dwelling
house
, 百拇医药
15
3
60
58
96.16
牛栏
cowshed
15
3
59
58
97.14
3 讨论
, 百拇医药
嗜人按蚊是我国北纬33°以南广大地区的主要传疟媒介，由于它是一家栖蚊种，嗜吸人血，传疟能量大，因此在有嗜人按蚊分布的地区，疟疾流行较为严重。湖北省1990年开始先后在中华按蚊、嗜人按蚊复媒区15个县(市)，共4.0万km2的范围内开展了溴氰菊酯浸帐灭蚊，每年使用溴氰菊酯高达5T左右，累计浸帐约200万床，使疟疾发病得到了控制〔5〕。
为了解在持续的溴氰菊酯选择压力下蚊虫的抗性状况，考核这些地区的浸帐工作质量等，都需要采集现场蚊虫进行生物测定。而现场人房内嗜人按蚊比例虽然较高，但绝对数较少，室内平均密度仅为0.46只/帐〔6〕，动员很多人力采集，往往也难以满足一次实验的需求。如果采用实验室饲养，取其子Ⅰ代实验，在数量上虽能满足实验需求，但需要恒温的实验室和较熟练的饲养人员，不利于现场大面积应用及浸帐质量的实际考核。而在同一环境中牛栏的按蚊则来源较多，可以满足实验需求。
因此，我们采用目前较常用的击倒试验法，药帐接触法，区分剂量法(中国标准，WHO标准)等四种方法对采自人房、牛栏按蚊的敏感性进行了比较观察。结果表明无论是击倒时间还是死亡率，二者均无显著性差异，说明目前以四种方法测试，嗜人按蚊和中华按蚊对溴氰菊酯的抗击倒力较为一致。湖北省近年来的调查也表明，复媒区经溴氰菊酯浸帐1～6年，按蚊区分剂量死亡率(中国标准，WHO标准)在80%以上〔7〕。因此我们认为，在目前按蚊尚未产生抗性的情况下，进行杀虫剂敏感性的生物测定时，若人房按蚊来源困难，可在当地嗜人按蚊密度高峰季节采集牛栏按蚊作测试标本进行实验，其结果基本上可以反映该地蚊虫的敏感性。但如蚊虫产生抗性，死亡率和击倒率下降，存留的是嗜人按蚊还是中华按蚊则需进一步推断。
, 百拇医药
4 参考文献
1.中华人民共和国卫生部地方病防治司编.疟疾防治手册.第2版.北京：人民卫生出版社,1988,79.
2.刘维德.蚊类抗药性及其测定.北京：科学出版社,1979.49.
3.余品红，付在风，张华勋，等.防疟区媒介按蚊对溴氰菊酯浸泡蚊帐敏感性的调查.中国公共卫生,1995,11(11):512.
4.Finney,DJ.1971 Probit Analysis,3rd Edition.Cambrige University,press.
5.袁方玉，黄光全，徐博钊，等.湖北省连续四年溴氰菊酯浸泡蚊帐防制媒介和控制流行的效果观察.实用寄生虫病杂志,1996,4(增刊):27.
6.黄光全，黄小波，张华勋，等.湖北省浅丘双季稻区嗜人按蚊生态及传疟作用.中国媒介生物学及控制杂志,1994,5(4):283.
7.余品红，张华勋，明桂珍，等.溴氰菊酯浸泡蚊帐六年后媒介按蚊抗药性的现场调查.寄生虫与医学昆虫学报,1997,4(1):33.
收稿日期：1998年8月5日, 百拇医药
单位：余品红 张华勋 明桂珍 徐博钊 湖北省医学科学院(武汉，430079)；陈红安 应城市卫生防疫站
关键词：
中国人兽共患病杂志990334 湖北省从1990年开始先后在疟疾复媒区的15个县(市)，共4.0万km2的范围内开展了溴氰菊酯浸帐灭蚊。为了解蚊虫对溴氰菊酯的敏感性和考核浸帐灭蚊的质量，常需要在现场采集蚊虫进行生物测定。为寻找既适合生测需求，又能反映实际情况的按蚊来源，我们于1996年6月底对应城市人房、牛栏二种按蚊的敏感性进行了比较观察，结果如下。
1 材料与方法
1.1 调查点概况 选择应城市巡检乡为试验地点，该乡为双季稻产区，1991年查出嗜人按蚊，其高峰季节在每年6月底、7月初和9月初。
, 百拇医药
1.2 试验材料
1.2.1 牛栏按蚊 于实验前夜在牛栏用捕蚊管采集饱吸血之按蚊，带回实验室饲养，次日上午胃血消化至谢拉氏Ⅲ～Ⅳ期供测定用。
1.2.2 人房按蚊 于实验当日凌晨用指管在人帐内扣捕饱吸血之按蚊，然后移至蚊笼内集中饲养，当日上午进行测定，此时胃血消化在谢拉氏Ⅲ～Ⅳ期。
1.2.3 蚊虫鉴定 人房、牛栏按蚊分别进行试验，试验完后主要根据成蚊中足基节外侧有无淡色鳞簇和腹侧膜上有无“T”字形暗斑等形态特征鉴定蚊种〔1〕。
1.2.4 测试药帐 为普通棉纱帐，药物为2.5%溴氰菊酯胶悬剂(江门农药厂生产，批号1995.5.5)，用药量为15mg ai/m2，按面积分别量取药物和水，混匀后浸泡帐纱，使药物均匀吸收，恰好湿而不滴，悬挂于室内晾干待用。
, 百拇医药
1.2.5 制备药膜滤纸用98%溴氰菊酯(法国产)，按WHO要求制作，用药量为3.57mg ai/m\+2(0.01%),8.93mg ai/m\+2(0.025%)〔2〕。
1.3 实验方法〔2，3〕
1.3.1 药帐接触法 将直径9cm的椎形生测筒固定在药帐上，吸入10～12只蚊虫，强迫接触3min后移入大口瓶内恢复饲养24h，观察死亡率，不同部位重复6次。同时以未浸药帐纱作对照，实验组死亡率以Abbott公式校正，校正死亡率<90%为抗性群体。
1.3.2 击倒试验 将椎形生测筒固定在药帐上，吸入10～12只蚊虫，记录每只蚊虫被击倒时间，不同部位重复6次，以Finney机率分析法进行对数—机率分析，分析结果进行显著性检验〔4〕。
1.3.3 我国推荐区分剂量法 蚊虫在抗药性接触筒内接触3.57mg ai/m2药膜滤纸30min，恢复饲养24h，观察死亡率，同时设空白对照，实验组死亡率以Abbott公式校正，校正死亡率<80%为抗性群体。
, 百拇医药
1.3.4 WHO推荐区分剂量法 蚊虫在抗药性接触筒内接触8.57mg ai/m2药膜滤纸60min，恢复饲养24h，观察死亡率，设立对照和评判标准同前。
2 结果
2.1 蚊虫组成 实验蚊虫经鉴定为嗜人按蚊和中华按蚊二种，其中人房嗜人按蚊88只，占32.12%，中华按蚊186只，占67.88%；牛栏嗜人按蚊41只，占12.73%，中华按蚊281只，占87.27%。二者嗜人按蚊构成比有非常显著性差异(P<0.005)。
2.2 击倒试验 人房、牛栏媒介按蚊接触15mg ai/m2溴氰菊酯药帐的半数击倒时间(KT50)无显著性差异(P>0.05)，见表1。
表1 人房、牛栏媒介按蚊击倒时间比较
, 百拇医药
Table 1 Comparison on the time for knockdown of vectors in house and
cowshed 地点
place
KT50(min)
95%可信限
95% confident
斜率
slope
χ2(n-2)
人 房
, http://www.100md.com
dwellinghouse
12.84
12.11～13.73
6.20±0.28
2.04
牛 栏
cowshed
12.47
11.81～13.24
6.33±0.78
3.76
2.3 接触试验 人房、牛栏按蚊接触15mg ai/m2溴氰菊酯药帐3min的校正死亡率分别为96.16%和97.14%；接触3.57mg ai/m2药膜滤纸30min的校正死亡率分别为94.40%和90.00%，二者无显著性差异(P>0.05)；接触8.57mg ai/m2药膜滤纸60min，人房、牛栏按蚊均全部死亡。3种不同试验方法蚊虫死亡率见表2。表2 不同实验方法媒介按蚊死亡率比较
, http://www.100md.com
Table 2 Comparison on the mortality of vectors in different methods 方法
method
地点
place
药物浓度
(mg/m2)
drug con-
centration
接触时间
(min)
time for
, 百拇医药
contacted
供虫数
(只)
number of
mosquito
死亡数
(只)
number of
death
校正死亡
率(%)
correct
mortality
, 百拇医药
中国法
Chinese
人房
dwelling
house
3.57
30
80
76
94.44
牛栏
cowshed
3.57
, http://www.100md.com
30
100
92
90.00
WHO法
人房
dwelling
house
8.93
60
76
76
100
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牛栏
cowshed
8.93
60
100
100
100
药帐法
net treated
wit drug
人房
dwelling
house
, 百拇医药
15
3
60
58
96.16
牛栏
cowshed
15
3
59
58
97.14
3 讨论
, 百拇医药
嗜人按蚊是我国北纬33°以南广大地区的主要传疟媒介，由于它是一家栖蚊种，嗜吸人血，传疟能量大，因此在有嗜人按蚊分布的地区，疟疾流行较为严重。湖北省1990年开始先后在中华按蚊、嗜人按蚊复媒区15个县(市)，共4.0万km2的范围内开展了溴氰菊酯浸帐灭蚊，每年使用溴氰菊酯高达5T左右，累计浸帐约200万床，使疟疾发病得到了控制〔5〕。
为了解在持续的溴氰菊酯选择压力下蚊虫的抗性状况，考核这些地区的浸帐工作质量等，都需要采集现场蚊虫进行生物测定。而现场人房内嗜人按蚊比例虽然较高，但绝对数较少，室内平均密度仅为0.46只/帐〔6〕，动员很多人力采集，往往也难以满足一次实验的需求。如果采用实验室饲养，取其子Ⅰ代实验，在数量上虽能满足实验需求，但需要恒温的实验室和较熟练的饲养人员，不利于现场大面积应用及浸帐质量的实际考核。而在同一环境中牛栏的按蚊则来源较多，可以满足实验需求。
因此，我们采用目前较常用的击倒试验法，药帐接触法，区分剂量法(中国标准，WHO标准)等四种方法对采自人房、牛栏按蚊的敏感性进行了比较观察。结果表明无论是击倒时间还是死亡率，二者均无显著性差异，说明目前以四种方法测试，嗜人按蚊和中华按蚊对溴氰菊酯的抗击倒力较为一致。湖北省近年来的调查也表明，复媒区经溴氰菊酯浸帐1～6年，按蚊区分剂量死亡率(中国标准，WHO标准)在80%以上〔7〕。因此我们认为，在目前按蚊尚未产生抗性的情况下，进行杀虫剂敏感性的生物测定时，若人房按蚊来源困难，可在当地嗜人按蚊密度高峰季节采集牛栏按蚊作测试标本进行实验，其结果基本上可以反映该地蚊虫的敏感性。但如蚊虫产生抗性，死亡率和击倒率下降，存留的是嗜人按蚊还是中华按蚊则需进一步推断。
, 百拇医药
4 参考文献
1.中华人民共和国卫生部地方病防治司编.疟疾防治手册.第2版.北京：人民卫生出版社,1988,79.
2.刘维德.蚊类抗药性及其测定.北京：科学出版社,1979.49.
3.余品红，付在风，张华勋，等.防疟区媒介按蚊对溴氰菊酯浸泡蚊帐敏感性的调查.中国公共卫生,1995,11(11):512.
4.Finney,DJ.1971 Probit Analysis,3rd Edition.Cambrige University,press.
5.袁方玉，黄光全，徐博钊，等.湖北省连续四年溴氰菊酯浸泡蚊帐防制媒介和控制流行的效果观察.实用寄生虫病杂志,1996,4(增刊):27.
6.黄光全，黄小波，张华勋，等.湖北省浅丘双季稻区嗜人按蚊生态及传疟作用.中国媒介生物学及控制杂志,1994,5(4):283.
7.余品红，张华勋，明桂珍，等.溴氰菊酯浸泡蚊帐六年后媒介按蚊抗药性的现场调查.寄生虫与医学昆虫学报,1997,4(1):33.
收稿日期：1998年8月5日, 百拇医药