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编号:10231778
刺激穴位经背根反射引起的神经源性炎症反应*
http://www.100md.com 《西安交通大学学报(医学版)》 1999年第3期
     作者:

    单位:

    关键词:背根反射;神经源性炎症反应;经络;穴位

    西安医科大学学报/990306 房娟芝 牛汉璋

    摘要 给大鼠静脉注射Evans蓝溶液,切断L1以下所有腹根,保留背根,横断脊髓,同心针电极刺激承山穴30min,记录并测定皮肤及内脏组织Evans蓝的含量。结果表明:连续电刺激右侧承山穴,于左、右侧腰部以下皮肤出现似足太阳膀胱经走行的蓝色渗出。测定其Evans蓝含量显著高于旁开1.0mm处(P<0.01),亦显著高于上背部及异体对照组(P<0.01)。同时测定内脏组织的Evans蓝含量发现,膀胱、输尿管及生殖系的含量显著高于异体对照组(P<0.01),穴位刺激经背根反射(Dorsal root reflex,DRR)可引起同侧和对侧皮肤及皮下组织跨脊髓节段的似循经走行的神经源性炎症反应,同时可引起同侧和对侧相关内脏组织的神经源性炎症反应。
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    NEUROGENIC INFLAMMATION EVOKED BY

    STIMULATION OF THE ACUPOINT THROUGH DRR

    Fang Juanzhi,Jiang Sainan,Niu Hanzhang

    (Department of Physiology)

    Abstract The purpose of this study is to investigate whether stimulation of the acupoint evoked the neurogenic inflammation distributed along the meridian through DRR (dorsal root reflex).We used 11 rats whose ventral roots below L1 were cut off and the spinal cords were transected between T13 and L1.After intravenous injection of Evans blue liquid and continuous electrostimulation of the right Chengshan acupoint of the rat,Evans blue extravasation distributed along the Bladder Meridian of Foot-Taiyang was observed on the skin of lower back and both hindlimbs.By means of measuring the amount of Evans blue, it was shown that the amount of Evans blue spot in the skin with the extravasation was obviously different from that in the skin of 1.0mm apart from (P<0.01),also obviously different from that in the skin of the upper back and from that in the skin of the control group (P<0.01),also shown that the amount of Evans blue in the bladder, ureter and germen was obviously different from that in the control group (P<0.01).These results indicate that the stimulation of the acupoint may produce the neurogenic inflammation of ipsilateral and contralateral skin up to several adjacent spinal segments as well as may produce the neurogenic inflammation of ipsilateral and contralateral visceral organs related to the Bladder Meridian through DRRs.
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    Key words dorsal root reflex(DRR);neurogenic inflammation;meridian ;acupoint

    神经源性炎症反应的动态变化可作为外周有关感受器活动的指标,又可以作为穴位与经络活动的指标[1~3]。刺激躯体和内脏神经通过背根反射(Dorsal root reflex ,DRR)可引起双侧皮肤节段性与跨节段的神经源性炎症反应,但是分布弥散而不与经络循行相吻合[4,5]。考虑到循经感传显著者的循经反应一般系由针刺穴位引起,而上述实验引起的反应则系由电刺激神经干引起,由于刺激条件不同,引起的反应分布自应有所不同,故穴位刺激可能引起反应的循经分布。

    本实验目的是为了研究刺激穴位经背根反射能否引起循经皮肤和相关内脏呈现神经源性炎症反应。分析背根反射在神经源性炎症反应循经分布及“经脉—脏腑相关”联系机制中的作用; 为穴位和经络实质的研究提供进一步的证据,为深入研究十四经脉循行线形成及与有关脏腑联系机理提供线索和途径。
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    材料与方法

    采用雄性SD大鼠,体重200~250g,皮肤无损伤(如寄生虫感染、蚊虫叮咬、结痂等)。1%戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔麻醉,脱去腰背部、骶部及两后肢皮毛,行气管插管术及一侧颈外静脉插管术,继之行椎板切除术,暴露L1~L5间脊髓,并切断L1以下所有腹根,于T13与L1间横断脊髓。手术完成后,用温生理盐水纱布覆盖动物暴露部位皮肤,并将动物置于37℃电热毯保温,待休息4h,排除脊休克等因素影响后开始实验。

    称取2g Evans蓝溶于100ml生理盐水中配成2%的Evans蓝溶液。经颈静脉注入2%Evans蓝溶液(40mg/kg),30min后,观察皮肤无肉眼可见的蓝色渗出后,用同心针电极连续电刺激右侧承山穴。刺激参数为:方波波宽0.5ms,强度100V,频率5Hz,连续电脉冲刺激30min。刺激开始后,观察并彩色照像记录皮肤蓝点渗出变化。实验完毕后,立即打开大鼠胸腔,将针头由心尖部插入左心室并剪开右心耳,连通生理盐水灌流瓶进行连续加压灌流冲洗,至皮肤完全变白,由静脉流出的冲洗液完全清亮为止。分别在左右侧大腿、小腿外侧部、爪部、背部及各点旁开1.0mm处,取2mm×2mm大小皮肤及皮下组织;然后打开大鼠腹腔,分别在膀胱、双侧输尿管、肾脏、输精管及睾丸、十二指肠、直肠、肝脏、脾脏、胃底、胃窦、左右侧肺脏、心肌取固定位置的内脏组织。将上述各组织块用滤纸吸干,分析天平称重,磨碎后直接放入3ml甲酰胺溶液中,编号记录。将试管置于50℃恒温水浴箱中反应24h后,离心15min,取上清液用紫外光栅分光光度仪比色。Evans蓝最适波长为620~640nm,取λ=630nm进行测试。在相同条件下,配制已知浓度的Evans蓝溶液,测定吸光度,计算出回归方程(相关系数为0.998),根据每份样本的吸光度,代入回归方程即可计算出每份样本的浓度,根据每份样本所取组织的重量计算出单位重量组织的Evans蓝含量(mol/kg)。
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    结果 静脉注射Evans蓝溶液,同心针电极连续电刺激右侧承山穴,结果显示:刺激10min以后,在刺激侧爪部背外侧缘开始出现肉眼可见的蓝色渗出点,以后小腿外侧、大腿背侧、下背部等部位皮肤也出现较多的蓝色渗出,随刺激时间的延长,点状渗出逐渐增多、增大,颜色变深,并有循足太阳膀胱经走行的趋势(足太阳膀胱经在大鼠的循行路线是拟人而定的)。对侧相应部位也有蓝色渗出,其余部位无明显的渗出。为了准确分析不同部位Evans蓝外渗量的差异,实验进行了异体对照(n=10)。在实验条件及手术完全相同的情况下,静脉注射Evans蓝溶液,但不给予连续电刺激,待60min后,取材测定蓝含量。

    图1 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的右侧不同部位皮肤及皮下组织的血浆外渗

    (Evans蓝含量10-3mol/kg)
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    O:为异体对照 A:为爪部 B:为小腿后外侧区 C:为股后外侧区 D:为下背部 E:为上背部

    a,b,c,d, e:分别为相应部位旁开1.0mm处P<0.01

    图2 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的左侧不同部位皮肤及皮下组织的血浆外渗

    (Evans蓝含量10-3mol/kg)

    O':为异体对照 A':为爪部 B':为小腿后外侧区

    C':为股后外侧区 D':为下背部E':为上背部

    a',b',c',d',e':分别为相应部位旁开1.0mm处
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    *P<0.01

    1 皮肤各部位Evans蓝含量的测定 测定结果(n=11)表明各渗出部位Evans蓝外渗量均显著高于旁开1.0mm处(P<0.01),亦显著高于上背部及同部位异体对照组(n=10)(P<0.01)。左、右侧相应部位比较无显著性差异(P>0.05)。(见表1、图1、表2、图2)。

    表1 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的右侧不同部位皮肤及皮下组织

    中Evans蓝外渗量比较 (10-3mol/kg) (±s) 组 别

    爪部

    小腿后外侧区

    股后外侧区
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    下背部

    上背部

    实验组

    1.85±0.41

    2.67±0.35

    2.87±0.31

    2.92±0.38

    0.51±0.05

    旁开组

    0.51±0.07

    0.51±0.05

    0.50±0.07
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    0.50±0.06

    0.51±0.04

    对照组

    0.52±0.06

    0.53±0.03

    0.55±0.05

    0.56±0.05

    0.52±0.04

    表2 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的左侧不同部位皮肤及皮下组织

    中Evans蓝外渗量比较 (10-3mol/kg) (±s) 组 别
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    爪部

    小腿后外侧区

    股后外侧区

    下背部

    上背部

    实验组

    1.59±0.38

    2.60±0.22

    3.00±0.38

    3.00±0.29

    0.51±0.04

    旁开组

, http://www.100md.com     0.49±0.03

    0.55±0.06

    0.55±0.05

    0.55±0.06

    0.51±0.05

    对照组

    0.54±0.05

    0.51±0.03

    0.52±0.05

    0.52±0.06

    0.51±0.05

    2 内脏Evans蓝含量的测定 测定结果表明,实验组(n=11)膀胱、输尿管、输精管、睾丸的Evans蓝含量显著高于对照组(n=10)相应器官(P<0.01),左、右侧相应器官比较无显著性差异(P>0.05),肾脏及其余组织实验组与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。(见表3、图3、表4)。表3 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的泌尿、生殖系脏器组织Evans蓝外渗量比较(10-3mol/kg) 组别
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    膀胱

    输尿管

    输精管

    睾丸

    肾脏

    右侧

    实验组

    对照组

    2.01±0.29

    1.11±0.40

    9.74±1.41

    3.64±0.57

    3.28±0.53
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    0.93±0.11

    3.76±0.33

    1.84±0.29

    3.94±0.65

    4.07±0.41

    左侧

    实验组

    对照组

    2.01±0.29

    1.11±0.40

    9.30±1.10

    3.26±0.40
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    3.21±0.59

    0.86±0.11

    3.82±0.30

    1.79±0.42

    3.76±0.52

    3.93±0.64

    表4 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的不同内脏组织Evans蓝外渗量比较(10-3mol/kg) 组 别

    肝脏

    脾脏

    胃底部

    胃窦部
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    十二指肠

    直肠

    右肺

    左肺

    心肌

    实验组

    1.58±

    0.23

    1.52±

    0.33

    1.56±

    0.24

    1.65±
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    0.20

    0.59±

    0.05

    1.75±

    0.08

    1.98±

    0.03

    1.96±

    0.03

    0.70±

    0.03

    对照组

    1.52±
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    0.40

    1.37±

    0.25

    1.59±

    0.30

    1.64±

    0.21

    0.60±

    0.04

    1.74

    ±0.07

    1.97±

    0.02
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    1.96±

    0.02

    0.67±

    0.02

    讨论 感觉神经纤维逆行冲动引起的神经源性炎症反应是由细纤维终末释放P物质(Substance P,SP)及其它多肽类物质直接或间接引起的[2,4,6,7],P物质定量难而Evans蓝正好能充分显示这一过程,并能以测定Evans蓝的外渗量直接判定神经源性炎症反应及外周终末感受器活动的程度[8]。本实验用同心针电极作针灸针(中心作阴极,外套作阳极),防止电流扩布的影响。实验结果发现特定穴位电针呈现出了具特征性的沿躯体纵向分布,似与足太阳膀胱经循行相吻合的点状蓝反应。与本组所作刺激PCT神经内侧枝中枢端经长轴突反射引起的神经源性炎症反应[4]相比,后者渗出部位仅限于刺激侧大腿后外侧区,而本实验渗出部位不仅限于大腿后外侧区,爪部、小腿、腰骶椎旁及对侧相应部位都有明显渗出;与刺激神经经DRR引起的神经源性炎症反应相比,本实验的反应呈纵向分布有循经走行的倾向。这说明穴位刺激经背根反射确实引起了跨脊髓节段的似循经走行的神经源性炎症反应。
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    图3 电刺激右侧承山穴通过DRR引起的泌尿、生殖系脏器组织的血浆外渗 (Evans蓝含量10-3mol/kg)O:为右侧异体对照 O:为左侧异体对照 F,G,H,I,J:分别为膀胱、右侧输尿管、输精管、肾脏 f,g,h,i,j:分别为膀胱、左侧输尿管、输精管、睾丸、肾脏

    许多实验结果表明,针刺穴位对脏腑的功能调节确有一定的相对特异性。如针刺内关,对心脏功能有明显的影响。证明经穴和脏腑之间确有某种相对特异性联系。承山穴属足太阳膀胱经,膀胱经与生殖、泌尿系统关系密切,它属膀胱而络肾脏。本实验对内脏Evans蓝含量测定的结果表明,膀胱、输尿管、生殖系的Evans蓝含量实验组显著高于异体对照组(P<0.01),而肾脏及其余脏器渗出不显著。本实验中肾脏实验组与对照组Evans蓝含量无显著性差异可能是横断脊髓位置偏低所致。一些脏器的含量比实验组皮肤高,是因为皮肤与脏器的血流分布不同,其基础Evans蓝含量必不同,故皮肤与脏器均做了异体对照,且分别显著高于对照组。
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    由于脊髓横断,L1以下腹根全部离断,刺激侧的内脏及皮肤的神经源性炎症反应,应是轴突反射与背根反射共同作用的结果,而对侧产生反应的惟一途径是由背根反射引起的。结果说明十二经脉以脏腑命名是的确有它的内在机理,这为经络学说[9]中“经脉—脏腑相关”理论提供了证据和新的研究途径。同时也证明了背根反射在此显示了重要的作用,它解决了轴突反射不能解决的反应跨节段的问题。本实验未能呈现出足太阳膀胱经的全貌,这似与脊髓横断有关。十四经脉是很复杂的,本实验也只是对足太阳膀胱经作了些初步研究,与弄清各经脉及其与相关脏腑联系的要求还有很大的距离,今后有待于进一步探索。

    *国家自然科学基金资助项目(No.39470842)

    作者单位:牛汉璋(生理学教研室 西安 710061);房娟芝 现在西安医科大学第二附属医院神经内科工作
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    参考文献

    1 牛汉璋,江赛男.经络实质探秘.西安医科大学学报,1997;18(3)∶401

    2 房娟芝,江赛男,牛汉璋.细初级传入纤维传出引起的神经源性炎症反应.西安医科大学学报,1997;18(4)∶555

    3 张保真.经络线的构造和机能.西安:陕西科学技术出版社,1992∶1

    4 牛汉璋,江赛男.神经生理与经络生理学.西安:陕西科学技术出版社,1991∶102

    5 牛汉璋,江赛男.大鼠躯体和内脏神经刺激所诱发的背根反射效应.生理通讯,1994;13(增刊)∶72

    6 Rees H,Sluka KA,Westlund KN et al.Do dorsal root reflexes augment peripheral inflammation?Neuroreport,1994;5(7)∶821
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    7 Sluka KA,Wills WD,Westlund KN.Joint inflammation and hyperalgesin are reduced by spinal biculline.Neuroreport,1993;5(2)∶109

    8 Louis SM.The role of substance P and calcitonin gene-related peptide in neurogenic plasma extravasation and vasodilatation in the rat.Neuroscience,1989;32 (5)∶581

    9 胡翔龙,程莘农.金针之魂.长沙:湖南科学技术出版社,1997∶150

    (1998-12-27收稿 1999-03-10修回), 百拇医药