放射免疫测定前列腺特异抗原的技术探讨
作者：贾建成
单位：贾建成(宁夏自治区医院检验科 750021)
关键词：放射免疫测定；前列腺特异抗原
宁夏医学杂志990307 【摘要】 目的 对前列腺特异性抗原(PSA)作方法学鉴定，并对检测的若干影响因素进行探讨。方法 采用放射免疫法作PSA定值质检血清的检测并在不同实验条件下对结果的影响进行观察。结果 本法灵敏度为0.22ng%，回收率97.3%～102.6%，平均回收率99.8%，非特异性结合率(NSB)平均为3.6%，批内平均变异系数CV5.4%，批间平均变异系数CV8.2%，健全性实验结果良好。新鲜血清分离后应当日内检测，因故可置-20℃保持。PAS的碘标记抗原溶液务必分装冻存，避免反复冻融，实验表明其使用期至少在30～40天。结论 系列实验的结果充分表明这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高了检验质量的保证。
, 百拇医药
The research of determination of prostate specific antigen by radio immino assay
Jia Jiancheng
(Dept.of Laboratory Ningxia Hul Automous Reglon′s Hosp.)
【Abstract】 Objectives The method was used to differentiate the prostate specific antigen (PSA) and some affecting factos were researched.Methods The radio immunoassay was used to determine the serum value of quality control and under different experiment conditions the factors affecting was investigated.Results Sensitivity of method was 0.22ng/ml， Recovery rate 97.3～102.6%(average 99.8%) the average rate of nonspecific binding (NSB) was 3.6%，the coefficient of variation of within-run was 5.4% (average) between-run was 8.2%(average) perfect experiment result was good.The fresh serum after isolated should be used at that day If neccssay it should be stored in -20℃ temperature . The I125 labelled PSA solution must be kept in frozen place seperately. The repeated melt and freeze of the serum must be avolded .The experiment showed the it could be used for 30～40day at least.Conclusions The results of series experiment fully should the it not only could be favor of the control of experiment conditions but more importart elevate the quality of the experiment
, http://www.100md.com
【Key words】 Radio immunoassay；Prostate specific；Antigen
当前，前列腺癌是中老年男性的多发病，前列腺特异抗原(PSA)已普遍公认为检测前列腺癌的肿瘤标记物，本文采用放免法检测PSA及其测定的若干技术因素作初步探讨，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 PSA(RIA)试剂盒：天津九鼎医学生物工程公司生产，批号：970508。
1.2 仪器：FJ-2008全自动免疫计数仪，西安262厂产。
1.3 PSA定值质控血清：批号C-21010B(质控Ⅰ，质控Ⅱ)。
1.4 方法：按试剂盒说明书。
, 百拇医药
2 结果与分析
2.1 方法学考核
2.1.1 灵敏度：以10次零标准管结合率的平均值±标准差为53.5±0.9%，以平均值减去2个标准差，在标准曲线上查出，本法灵敏度为0.22ng/ml。
2.1.2 正确度：取已知混合血清其PSA值为2.1ng/ml，分成三管，分别加入标准PSA 2.5、10、50ng/ml，其回收率为97.3～102.6%，平均回收率99.8%。非特异性的结合率(测定10次)平均为3.6%符合临床实验要求。
2.1.3 精密度：取质控血清在同批内重复测定5次，其批内平均变异数CV5.4%，批间重复测定5次，其变异系数CV8.2%。
2.1.4 健全性实验：取2份PSA高标准样品(50ng/ml，100ng/ml用温育液按1：2、1：4、1：8、1：16倍比稀释，分别测定PSA的含量，结果表明血清稀释后PSA的含量也按比例降低，测定值与稀释倍数呈线性关系。
, 百拇医药
2.2 不同实验条件对结果影响的观察
2.2.1 血清样品贮存的观察：取1份健康者的混合血清1ml，以0.5ml血清1管共分2管并分别置4℃～20℃保存。剩留血块的原管血清置4℃保存，当日即测新鲜血清PSA抗原的结合率，然后将3管分别隔2、4、6天检测PSA抗原。结果发现保存4℃、剩留血块的血清其PSA结合率比新鲜血清下降10.5%、22%、34.1%。笔者认为这可能与血块本身对抗原的非特异性吸附所致，而将血清分离后置-20℃以下贮存1周，结果无明显影响。
故建议分离的新鲜血清应在当日内检测，因故可置-20℃保存。
2.2.2 碘标记抗原PSA使用期限的观察：使用分装冻结PSA I125抗原对7例PSA阳性血清每7天测定1次、5次测定其B。结合率为68%～51.5%相差较小，符合放免实验要求〔1〕。结果提示PSA I125抗原存放-20℃以下最好〔2〕，切勿污染，这样至少可使用30～40天。笔者认为标记抗原水溶液应采用分装冻结保存，每次使用可取用1瓶，避免反复冻融造成对125I抗原的损伤，这可直接影响非特异性结合率的升高和灵敏度的降低。
, 百拇医药
2.2.3 影响血清PSA浓度的有关因素：检测血清PSA其血清标本的采集和贮存十分重要。年龄对血清PSA测值的影响目前仍有争议，有人认为随年龄增长PSA有上升的趋势，但年龄间的差异无显著性〔3〕，引起前列腺组织损伤的操作可导致PSA的假阳性上升，然而常规肛指检查对血清PSA影响甚小，故建议在前列腺抗原检查前或1周后采血为妥。PSA属于一种相对稳定的胞浆抗原其血清PSA水平将不呈现昼夜节律的波动，收集标本应当日内检测，因故可将标本存放-20℃以下保存，避免反复冻融。
质量是检验工作的生命，因此对临床特异性试验作方法学的考核，并对某些技术因素影响的可能性进行探讨，这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高检验质量，配合临床诊断，提供临床客观依据的可靠保证。
参考文献
1 张林，刘玲主编.现代实用临床检验质量控制学.西安：天则出版社，1990.182～183
2 蒋慧权，王鼎年主编.检验核医学.南京：江苏科学技术出版社，1988.54～55
3 赵长林，等.酶免疫法检测前列腺特异抗原.中华医学检验杂志，1993，16(5)：291
(收稿：1998—01—13 修回：1998—10—30)责编：马兴忠, 百拇医药
单位：贾建成(宁夏自治区医院检验科 750021)
关键词：放射免疫测定；前列腺特异抗原
宁夏医学杂志990307 【摘要】 目的 对前列腺特异性抗原(PSA)作方法学鉴定，并对检测的若干影响因素进行探讨。方法 采用放射免疫法作PSA定值质检血清的检测并在不同实验条件下对结果的影响进行观察。结果 本法灵敏度为0.22ng%，回收率97.3%～102.6%，平均回收率99.8%，非特异性结合率(NSB)平均为3.6%，批内平均变异系数CV5.4%，批间平均变异系数CV8.2%，健全性实验结果良好。新鲜血清分离后应当日内检测，因故可置-20℃保持。PAS的碘标记抗原溶液务必分装冻存，避免反复冻融，实验表明其使用期至少在30～40天。结论 系列实验的结果充分表明这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高了检验质量的保证。
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The research of determination of prostate specific antigen by radio immino assay
Jia Jiancheng
(Dept.of Laboratory Ningxia Hul Automous Reglon′s Hosp.)
【Abstract】 Objectives The method was used to differentiate the prostate specific antigen (PSA) and some affecting factos were researched.Methods The radio immunoassay was used to determine the serum value of quality control and under different experiment conditions the factors affecting was investigated.Results Sensitivity of method was 0.22ng/ml， Recovery rate 97.3～102.6%(average 99.8%) the average rate of nonspecific binding (NSB) was 3.6%，the coefficient of variation of within-run was 5.4% (average) between-run was 8.2%(average) perfect experiment result was good.The fresh serum after isolated should be used at that day If neccssay it should be stored in -20℃ temperature . The I125 labelled PSA solution must be kept in frozen place seperately. The repeated melt and freeze of the serum must be avolded .The experiment showed the it could be used for 30～40day at least.Conclusions The results of series experiment fully should the it not only could be favor of the control of experiment conditions but more importart elevate the quality of the experiment
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【Key words】 Radio immunoassay；Prostate specific；Antigen
当前，前列腺癌是中老年男性的多发病，前列腺特异抗原(PSA)已普遍公认为检测前列腺癌的肿瘤标记物，本文采用放免法检测PSA及其测定的若干技术因素作初步探讨，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 PSA(RIA)试剂盒：天津九鼎医学生物工程公司生产，批号：970508。
1.2 仪器：FJ-2008全自动免疫计数仪，西安262厂产。
1.3 PSA定值质控血清：批号C-21010B(质控Ⅰ，质控Ⅱ)。
1.4 方法：按试剂盒说明书。
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2 结果与分析
2.1 方法学考核
2.1.1 灵敏度：以10次零标准管结合率的平均值±标准差为53.5±0.9%，以平均值减去2个标准差，在标准曲线上查出，本法灵敏度为0.22ng/ml。
2.1.2 正确度：取已知混合血清其PSA值为2.1ng/ml，分成三管，分别加入标准PSA 2.5、10、50ng/ml，其回收率为97.3～102.6%，平均回收率99.8%。非特异性的结合率(测定10次)平均为3.6%符合临床实验要求。
2.1.3 精密度：取质控血清在同批内重复测定5次，其批内平均变异数CV5.4%，批间重复测定5次，其变异系数CV8.2%。
2.1.4 健全性实验：取2份PSA高标准样品(50ng/ml，100ng/ml用温育液按1：2、1：4、1：8、1：16倍比稀释，分别测定PSA的含量，结果表明血清稀释后PSA的含量也按比例降低，测定值与稀释倍数呈线性关系。
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2.2 不同实验条件对结果影响的观察
2.2.1 血清样品贮存的观察：取1份健康者的混合血清1ml，以0.5ml血清1管共分2管并分别置4℃～20℃保存。剩留血块的原管血清置4℃保存，当日即测新鲜血清PSA抗原的结合率，然后将3管分别隔2、4、6天检测PSA抗原。结果发现保存4℃、剩留血块的血清其PSA结合率比新鲜血清下降10.5%、22%、34.1%。笔者认为这可能与血块本身对抗原的非特异性吸附所致，而将血清分离后置-20℃以下贮存1周，结果无明显影响。
故建议分离的新鲜血清应在当日内检测，因故可置-20℃保存。
2.2.2 碘标记抗原PSA使用期限的观察：使用分装冻结PSA I125抗原对7例PSA阳性血清每7天测定1次、5次测定其B。结合率为68%～51.5%相差较小，符合放免实验要求〔1〕。结果提示PSA I125抗原存放-20℃以下最好〔2〕，切勿污染，这样至少可使用30～40天。笔者认为标记抗原水溶液应采用分装冻结保存，每次使用可取用1瓶，避免反复冻融造成对125I抗原的损伤，这可直接影响非特异性结合率的升高和灵敏度的降低。
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2.2.3 影响血清PSA浓度的有关因素：检测血清PSA其血清标本的采集和贮存十分重要。年龄对血清PSA测值的影响目前仍有争议，有人认为随年龄增长PSA有上升的趋势，但年龄间的差异无显著性〔3〕，引起前列腺组织损伤的操作可导致PSA的假阳性上升，然而常规肛指检查对血清PSA影响甚小，故建议在前列腺抗原检查前或1周后采血为妥。PSA属于一种相对稳定的胞浆抗原其血清PSA水平将不呈现昼夜节律的波动，收集标本应当日内检测，因故可将标本存放-20℃以下保存，避免反复冻融。
质量是检验工作的生命，因此对临床特异性试验作方法学的考核，并对某些技术因素影响的可能性进行探讨，这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高检验质量，配合临床诊断，提供临床客观依据的可靠保证。
参考文献
1 张林，刘玲主编.现代实用临床检验质量控制学.西安：天则出版社，1990.182～183
2 蒋慧权，王鼎年主编.检验核医学.南京：江苏科学技术出版社，1988.54～55
3 赵长林，等.酶免疫法检测前列腺特异抗原.中华医学检验杂志，1993，16(5)：291
(收稿：1998—01—13 修回：1998—10—30)责编：马兴忠, 百拇医药