紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量
作者：庞西英 高 虹
单位：庞西英 高 虹(宁夏药品检验所 750004)
关键词：
宁夏医学杂志990331 氯霉素(choromycetin)具有抗菌谱广、疗效高、副作用小等特点，是目前临床上常用的抗生素之一。氯霉素滴眼液对沙眼、结膜炎、角膜炎、眼睑缘炎等，具有良好的治疗效果，目前其含量的测定方法是采用微生物检定法〔1〕，此方法操作步骤复杂。因此，本文采用紫外分光光度法，快速简便，稳定性好，结果准确。
1 仪器与试剂
紫外分光光度计：日立U-3210、UV-556型；上海分析仪器厂WZ-800型、751-GW型。
氯霉素对照品由中国药品检定所提供。氯霉素滴眼液(河北磁州制药厂)，含量为8ml：25mg。水为4级处理，其它试剂为AR。
, 百拇医药
2 实验条件的选择
2.1 紫外吸收光谱：精密称取氯霉素对照品适量，用乙醇溶解用水制成约20μg/ml溶液，在200～400nm测定紫外吸收光谱。选定最大吸收位置278nm作为测定波长，基质及水在278nm处无吸收。
2.2 吸收度与浓度的关系：精密称取氯霉素对照品适量，按氯霉素每10mg加乙醇1ml使其溶解，加水制成1mg/ml溶液。精密吸取此液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml分别置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，用日立U-3210分光光度计在278nm波长处测定吸收度。结果表明，浓度在5.0～25.0μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系。回归方程为c=0.02931A-0.00088；相关系数r=0.9999(n=5)。
2.3 溶液稳定性实验：将20μg/ml的氯霉素溶液在278nm波长处于0、2、4、6、8、10小时测定吸收度。结果表明，0～4小时吸收值基本不变，RSD%=0.89%，4～10小时，吸收值略有变化，RSD%=3.21%，因此建议在4小时之内测定。
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2.4 回收率测定：精密吸取已测得含量的氯霉素样品溶液共5份，分别置于100ml容量瓶中，准确加入已知量氯霉素对照品溶液，加水至刻度，摇匀，在278nm波长处测定吸收度。另取对照品适量，精密称定，定量稀释成1ml中含20μg的溶液，同法测定。以吸收度比值算出样品溶液的回收率，经统计分析，平均回收率为99.5%(n=5)，RSD%=1.0%。
2.5 精密度实验：将20μg/ml的氯霉素溶液分别用日立U-3210、日立UV-556、上海WZ-800、751-WG4台分光光度计，于278nm波长处测定吸收度。结果表明，吸收度无较大变化，RSD%=0.6%。
3 样品测定
精密量取氯霉素滴眼液适量，加水稀释成浓度为20μg/ml溶液，另取氯霉素对照品适量，精密称定，按氯霉素每10mg加乙醇1ml溶解，加水定量稀释成浓度为20μg/ml的溶液，在278nm波长处分别测定二者吸收度，计算，即得。同时与抗生素微生物检定法比较，结果见附表。
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附表 两种方法测定氯霉素滴眼液含量的比较 编号
样品测定结果(标示量%，n=3)
分光光度法
微生物检定法
1
93.7
94.0
2
98.2
98.3
3
96.2
, 百拇医药
96.0
4 讨论
本法平均回收率为99.5%，符合制剂含量测定的要求，其结果与微生物检定法同样准确。实验结果表明，用紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量，操作简便，快速，结果准确，省去了微生物法中实验繁琐的操作步骤，使得3天才能完成的实验缩短为几小时内。既节省了时间，又节省了人力和物力，大大提高了工作效率。
参考文献
1 中国药典.1995年版，二部：974
(收稿：1998—06—29 修回：1998—09—18)责编：杨自革, 百拇医药
单位：庞西英 高 虹(宁夏药品检验所 750004)
关键词：
宁夏医学杂志990331 氯霉素(choromycetin)具有抗菌谱广、疗效高、副作用小等特点，是目前临床上常用的抗生素之一。氯霉素滴眼液对沙眼、结膜炎、角膜炎、眼睑缘炎等，具有良好的治疗效果，目前其含量的测定方法是采用微生物检定法〔1〕，此方法操作步骤复杂。因此，本文采用紫外分光光度法，快速简便，稳定性好，结果准确。
1 仪器与试剂
紫外分光光度计：日立U-3210、UV-556型；上海分析仪器厂WZ-800型、751-GW型。
氯霉素对照品由中国药品检定所提供。氯霉素滴眼液(河北磁州制药厂)，含量为8ml：25mg。水为4级处理，其它试剂为AR。
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2 实验条件的选择
2.1 紫外吸收光谱：精密称取氯霉素对照品适量，用乙醇溶解用水制成约20μg/ml溶液，在200～400nm测定紫外吸收光谱。选定最大吸收位置278nm作为测定波长，基质及水在278nm处无吸收。
2.2 吸收度与浓度的关系：精密称取氯霉素对照品适量，按氯霉素每10mg加乙醇1ml使其溶解，加水制成1mg/ml溶液。精密吸取此液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml分别置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，用日立U-3210分光光度计在278nm波长处测定吸收度。结果表明，浓度在5.0～25.0μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系。回归方程为c=0.02931A-0.00088；相关系数r=0.9999(n=5)。
2.3 溶液稳定性实验：将20μg/ml的氯霉素溶液在278nm波长处于0、2、4、6、8、10小时测定吸收度。结果表明，0～4小时吸收值基本不变，RSD%=0.89%，4～10小时，吸收值略有变化，RSD%=3.21%，因此建议在4小时之内测定。
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2.4 回收率测定：精密吸取已测得含量的氯霉素样品溶液共5份，分别置于100ml容量瓶中，准确加入已知量氯霉素对照品溶液，加水至刻度，摇匀，在278nm波长处测定吸收度。另取对照品适量，精密称定，定量稀释成1ml中含20μg的溶液，同法测定。以吸收度比值算出样品溶液的回收率，经统计分析，平均回收率为99.5%(n=5)，RSD%=1.0%。
2.5 精密度实验：将20μg/ml的氯霉素溶液分别用日立U-3210、日立UV-556、上海WZ-800、751-WG4台分光光度计，于278nm波长处测定吸收度。结果表明，吸收度无较大变化，RSD%=0.6%。
3 样品测定
精密量取氯霉素滴眼液适量，加水稀释成浓度为20μg/ml溶液，另取氯霉素对照品适量，精密称定，按氯霉素每10mg加乙醇1ml溶解，加水定量稀释成浓度为20μg/ml的溶液，在278nm波长处分别测定二者吸收度，计算，即得。同时与抗生素微生物检定法比较，结果见附表。
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附表 两种方法测定氯霉素滴眼液含量的比较 编号
样品测定结果(标示量%，n=3)
分光光度法
微生物检定法
1
93.7
94.0
2
98.2
98.3
3
96.2
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96.0
4 讨论
本法平均回收率为99.5%，符合制剂含量测定的要求，其结果与微生物检定法同样准确。实验结果表明，用紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量，操作简便，快速，结果准确，省去了微生物法中实验繁琐的操作步骤，使得3天才能完成的实验缩短为几小时内。既节省了时间，又节省了人力和物力，大大提高了工作效率。
参考文献
1 中国药典.1995年版，二部：974
(收稿：1998—06—29 修回：1998—09—18)责编：杨自革, 百拇医药